本发明专利技术涉及一种新的杆状细菌及分离方法和应用，该菌种被命名为Ｌｅｕｋｅｍｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｚｕｃｉｎｅｕｍ，保藏号为：ＣＣＴＣＣ Ｍ ２０５００４。该菌种可诱导多种肿瘤细胞凋亡，具有治疗肿瘤的前景。由于该杆状细菌可进入真核细胞（如人的细胞）内，并可在细胞内长期生存，因此该菌可作为载体携带任何类型的化合物（如遗传物质、蛋白质、药物、和其他任何类型的化合物）进入细胞。本发明专利技术提供的杆状细菌可制备治疗肿瘤制品中的应用。该杆状细菌在生物医学界具有广泛的应用前景。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种新型微生物及其应用，尤其涉及一种从人的肿瘤细胞系K562细胞中分离培养得到的新菌种。
技术介绍
K562细胞系来源于一个53岁的慢粒白血病患者的白血病细胞，由Lozzio CB和Lozzio BB在1975年(Blood.45(3)321-34，1975)建系。该细胞为费城染色体阳性，是一个在世界范围内被广泛使用的白血病细胞系。目前，未见报道有关在人的K562细胞中提取和分离到细菌；我们从该细胞系中分离到一种细菌，该细菌与人类细胞有非常良好的共生关系，这也是过去没有任何报道的。这表明该菌是人类从自然中分离的新菌种。
技术实现思路
本专利技术的一个目的是提供一种新的细菌，命名为Leukemibacteriumzucineum，其在中国典型培养物保藏中心保藏，保藏号为CCTCC M 205004，保藏日期为2005年1月7日。菌种来源所述的杆状细菌Leukemibacterium zucineum，生活在人的肿瘤细胞系K562细胞中，分离出Leukemibacterium zucineum的方法是将人的肿瘤细胞系K562细胞(由浙江大学肿瘤研究所提供)培养在RPMI-1640完全培养液中，培养温度为37℃，加入烟叶的甲醇提取物，培养2-7天后，K562细胞内的细菌(Leukemibacterium zucineum)生长，获得生长的细菌Leukemibacterium zucineum。可再将获得细菌Leukemibacterium zucineum用普通的细菌培养液扩增，培养液可为普通的Lb，营养肉汤，固体培养基可为哥伦比亚血琼脂平板，MacConkey琼脂平板，巧克力平板，中国蓝平板，MH琼脂平板。再将所述细菌Leukemibacterium zucineum接种于羊血平板上使其长成集落。Leukemibacterium zucineum的生长特性Leukemibacterium zucineum为非发酵菌，生长缓慢，初代培养35℃48小时以后长出细小、点状、圆形、凸起、灰白色的菌落，不溶血，72-96小时以后菌落长到直径2-3mm，表面干燥并联成一片，呈皱折状，整个菌落能推动，在液体培养基内，该细菌在液体表面生长，形成一层扩散的、灰白色的菌膜。能在麦康凯平板(MacConkey Agar)生长，但在SS平板上不能生长。以37℃生长最好，在人的细胞内可以生存。Leukemibacterium zucineum的形态为革兰氏阴性、短小的杆菌。长时间放置后再行涂片，细菌形态变得不规则，短小的和细长的杆菌均存在。在脑心浸液液体培养基中，细菌革兰染色呈链状。直径为0.5-1.0um，长为1.5-3um。鞭毛染色为单鞭毛，鞭毛位于菌体的一端。在电子显微镜下细菌的形态如短杆状。Leukemibacterium zucineum的详细生化特性参见表2。SEQ ID NO 1为Leukemibacterium zucineum的16S rRNA核苷酸序列5’-AGAGTTTGATCCTGGCTAGAGCGAACGCTGGCGGCAGGCCTAATACATGCAAGTCGAGCGGCCCTTCGGGGCAGCGGCGGACGGGTGAGTAACGCGTGGGAATGTGCCCTTTGGTACGGAACAACACAGGGAAACTTGTGCTAATACCGTATGTGCCCTTCGGGGGAAAGATTTATCGCCATTGGAGCAGCCCGCGTTGGATTAGGTAGTTGGTGAGGTAAAGGCTCACCAAGCCGACGATCCATAGCTGGTCTGAGAGGATGATCAGCCACACTGGGACTGAGACACGGCCCAGACTCCTACGGGAGGCAGCAGTAGGGAATCTTGCGCAATGGGCGAAAGCCTGACGCAGCCATGCCGCGTGAATGATGAAGGTCTTAGGATTGTAAAATTCTTTCACCGGGGAAGATAATGACGGTACCCGGAGAAGAAGTCCCGGCTAACTTCGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGAAGGGGGCTAGCGTTGCTCGGAATTACTGGGCGTAAAGGGCGCGTAGGCGGATGTTTAAGTCGGGGGTGAAAGCCCGGGGCTCAACCTCGGAATTGCCTTCGATACTGGACATCTTGATACGGGAGAGGTGAGTGGAACTCCGAGTGTAGAGGTGAAATTCGTAGATATTCGGAAGAACACCAGTGGCGAAGGCGACTCACTGGCCCGTTACTGACGCTGAGGCGCGAAAGCGTGGGGAGCAAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAACGATGCGTGCTAGTTGTCGGCATGCATGCATGTCGGTGACGCAGCTAACGCATTAAGCACTCCGCCTGGGGAGTACGGTCGCAAGATTAAAACTCAAGGGAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGTGGAGCATGTGGTTTAATTCGAAGCAACGCGCAGAACCTTACCACCTTTTGACATGCCCTGATCGCTGGAGAGATCCAGTTTTCCCTTCGGGGACAGGGACACAGGTGCTGCATGGCTGTCGTCAGCTCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCAACGAGCGCAACCCTCGCCATTAGTTGCCATCATTAAGTTGGGCACTCTAATGGGACCGCCGGTGGTAAGCCGGAGGAAGGTGGGGATGACGTCAAGTCCTCATGGCCCTTACGGGGTGGGCTACACACGTGCTACAATGGCGACTACAG AGGGTTGCGATGCTGCGAAGCGGAGCTAATCCCTAAAAGTCGTCTCAGTTCGGATTGCACTCTGCAACTCGAGTGCATGAAGTCGGAATCGCTAGTAGTCGCGGATCAGCATGCCGCGGTGAATACGTTCCCGGGCCTTGTACTCACCGCCCGTCGCACCATGGGAGTTGGCTTTACCCGAAGGCGGTGCGCTAACCAGCAATGGAGGCAGCCGACCACGGTAGGGTCAGCGACTGGGGTGAAGTCGTAACAAGGTAGCCGT-3’本专利技术的另一个目的是由于提供的这种杆状细菌Leukemibacteriumzucineum在制备治疗肿瘤相关药物中应用，该杆状细菌经实验证明可杀死多种肿瘤细胞，可诱导肿瘤细胞凋亡。本专利技术提供的这种杆状细菌也可在制备含有所述杆状细菌Leukemibacterium zucineum的生物制品中应用，生物制品包括试剂、或试剂盒。还可用所述杆状细菌Leukemibacterium zucineum及其来源的材料，包括其遗传物质，蛋白质，或该菌的其他成分，或用通过培养该菌而获得的成分，用于制备生物制品。由于Leukemibacterium zucineum可进入真核细胞(如人的细胞)内，并可在细胞内长期生存本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种新的杆状细菌，命名为Ｌｅｕｋｅｍｉｂａｃｔｅｒｉｕｍｚｕｃｉｎｅｕｍ，在中国典型培养物保藏中心保藏，保藏号为：ＣＣＴＣＣＭ２０５００４。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：胡讯，张昆，韩卫东，潘锵荣，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：86[中国|杭州]
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