一种用于原核分泌、融合表达大肠杆菌热敏毒素B亚单位的载体制造技术

本发明专利技术涉及一种用于原核分泌、融合表达大肠杆菌热敏毒素Ｂ亚单位（Ｅ．ｃｏｌｉ　　ｈｅａｔ－ｌａｂｉｌｅｅｎｔｅｒｏｔｏｘｉｎ　　Ｂ　　ｓｕｂｕｎｉｔ，ＬＴ－Ｂ）的载体，其是一个以ｐＥＴ３２ａ为基础骨架的闭环质粒，在ｐＥＴ３２ａ的ＲＢＳ后的第一个限制性酶切位点Ｎｄｅ　　Ｉ和多克隆位点区的Ｎｏｃ　　Ｉ之间插入人源大肠杆菌热敏毒素Ｂ亚基（ＬＴ－Ｂ）的核酸序列构建而成，即ｐＥＴ－ＬＴＢ。应用本发明专利技术所述的表达载体既可实现ＬＴ－Ｂ的原核分泌表达（克服包涵体表达形式的缺陷），同时又能与其保护性抗原蛋白融合表达（形成粘膜疫苗便于接种）。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种用于原核分泌、融合表达大肠杆菌热敏毒素Ｂ亚单位（Ｅ．ｃｏｌｉｈｅａｔ－ｌａｂｉｌｅｅｎｔｅｒｏｔｏｘｉｎＢｓｕｂｕｎｉｔ，ＬＴ－Ｂ）的载体，其特征在于，所说的载体是以ｐＥＴ３２ａ为基础骨架的闭环质粒，在ｐＥＴ３２ａ的ＲＢ Ｓ后的第一个限制性酶切位点ＮｄｅＩ和多克隆位点区的ＮｏｃＩ之间插入大肠杆菌热敏毒素Ｂ亚基（ＬＴ－Ｂ）的核酸序列构建而成，即ｐＥＴ－ＬＴＢ；其中：ＬＴ－Ｂ的核酸序列的前端带有起始密码子ＡＴＧ和完整的信号肽序列，末端去除终止密码 子，且与其后的多克隆位点直接相连。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：魏东芝，马兴元，王天文，郑文云，
申请(专利权)人：华东理工大学，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]