一种微球菌两级复凝固定化方法技术

本发明专利技术涉向Ｎａ.Ａｌｇ溶液里加入１ｍｌ吐温８０和微球菌，在４０－４５℃，通过９＃针头注射器，控制下滴速度４０－６０滴／分钟，向Ｇｅｌ和ＣａＣｌ↓［２］混合液中滴加，稳定３．５－５ｈ，然后在ＣａＣｌ↓［２］溶液中二次钙化１０－１５ｍｉｎ，随后在ＣＳ溶液中进行二级复凝聚反应２－３ｈ，再利用柠檬酸囊内液化５－８ｍｉｎ，以无菌生理盐水水浸泡６－２４ｈ，增殖培养制得微胶囊。本发明专利技术优点为：微球菌生理活性良好，微胶囊囊壁的机械强度高、壁结构均匀，微胶囊的缓释性能优异。（*该技术在2024年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及细胞固定化生物制剂，尤指微球菌(Micrococcus sp.)两级复凝固定化方法，具体地说是一种海藻酸钠(Na·Alg)-明胶(Gel)-氯化钙(CaCl2)-氯化钙(CaCl2)-壳聚糖(CS)两级复凝微胶囊工艺。
技术介绍
微胶囊包埋细菌技术因包埋细菌数量大、缓释、生物相容性好等特点，一直以来被人们广泛关注，已经在制药、食品、酿造、提纯等领域得到了普遍应用；但由于微胶囊壁(厚度)薄，机械强度较小，长期使用易破碎等缺陷，限制了其广泛范围。传统增强微胶囊壁厚度的方法有两种一是选用强度高的载体材料，一是延长制囊时间，以增加微胶囊壁厚。但是高强度载体的生物相容性和水溶性一般较差，制得的微胶囊缺少弹性；延长制囊时间将导致胶囊壁产生过多的单质渗出层，并使钙化层过度增厚，阻塞囊壁孔隙，不利于氧气、营养物质以及其它的小分子物质自由通过微胶囊膜进行物质传递，因此，如何在保证微胶囊壁渗透性的基础上，最大限度的提高囊壁强度，是微胶囊技术能否大规模实际应用的关键控制性因素。微球菌Micrococcus sp.菌体尺寸微小，适宜的微胶囊壁孔径不宜过大，否则容易泄漏；一般在Na·Alg-本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种微球菌两级复凝固定化方法，可按如下步骤操作，其特征在于：１）壁材配制：按质量百分比配制１．５－２．５％海藻酸钠的水溶液，灭菌冷却，加入与海藻酸钠的水溶液体积比为２００∶１的无菌吐温８０，并加入海藻酸钠的水溶液总质量１５－３０％的 黄杆菌液体种子，搅拌均匀；２）一级芯材溶液配制：按质量百分比配制含１．５－２．５％明胶和１．０－２．０％氯化钙的水溶液，ｐＨ＝５．０－７．０，灭菌冷却，备用；３）二次钙化溶液配制：按质量百分比配制０．２－０．８％氯化钙的水溶 液，灭菌冷却，备用；４）二级芯材溶液配制：按质量百分比配制０．１－０．７％壳聚糖的水溶液，ｐＨ＝...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：李培军，李海波，鞠京丽，张轶，许华夏，
申请(专利权)人：中国科学院沈阳应用生态研究所，
类型：发明
国别省市：89[中国|沈阳]