使用基于JP170三维结构的蛋白质建模修饰枯草杆菌酶制造技术

本发明专利技术涉及产生亲本ＪＰ１７０枯草杆菌酶变体和亲本ＢＰＮ’枯草杆菌酶变体的方法，并涉及与亲本ＪＰ１７０／ＢＰＮ’枯草杆菌酶相比具有改变的特性的ＪＰ１７０和ＢＰＮ’变体。（*该技术在2024年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及JP170和BPN’样枯草杆菌酶(subtilase)以及构建这些具有改变特性的变体的方法，所述特性包括如稳定性(例如热稳定性或储藏稳定性)、Ca2+依赖性、pH依赖的活性，在洗涤和清洁应用中更好的性能。
技术介绍
酶已在在洗涤剂工业中作为洗涤制剂的一部分使用了30年以上。从商业观点看蛋白酶是这些制剂中最相关的酶，但也经常使用其他酶包括脂肪酶、淀粉酶、纤维素酶或酶混合物。为改进蛋白酶的成本和/或性能，正在寻找具有改变特性的蛋白酶，这些特性如更高的低温活性、更高的热稳定性、在给定pH下更高的比活性、改变的Ca2+依赖性、在其他洗涤剂成份(例如漂白剂、表面活性剂等)存在下更高的稳定性等。寻找具有改变特性的蛋白酶包括发现天然存在的蛋白酶(即所谓野生型蛋白酶)和改造已熟知的蛋白酶(如通过对编码所述蛋白酶的核酸序列的基因操作)。对蛋白质三维结构和功能之间关系的认识提高了评估改变蛋白质的哪一区域来影响蛋白质特定性状的能力。经常在洗涤剂中使用的一个蛋白酶家族是枯草杆菌酶。Siezen RJ和Leunissen(JAM，1997，Protein Science，6，501-523.本文档来自技高网...

【技术保护点】
构建亲本枯草杆菌酶变体的方法，其中变体与所述亲本枯草杆菌酶相比具有至少一项改变的特性，其方法包括：ａ）在评估与ＪＰ１７０三维结构相关的结构因素的基础上分析亲本枯草杆菌酶的三维结构，以鉴定出该枯草杆菌酶中与改变所述特性相关的至少一个氨基酸残基或至少一个结构区域；ｂ）修饰编码该亲本的多核苷酸ＤＮＡ，以构建编码变体枯草杆菌酶的多核苷酸，其变体与亲本枯草杆菌酶相比通过缺失、替换或插入修饰了ａ）中鉴定的氨基酸残基或结构部分以改变所述特性；ｃ）在适当的宿主中表达变体枯草杆菌酶；并ｄ）测试枯草杆菌酶变体的所述特性。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：A斯文森，S米宁，
申请(专利权)人：诺和酶股份有限公司，
类型：发明
国别省市：DK[]