在叶绿体中同时表达7个外源基因的载体构建方法技术

本发明专利技术涉及一种基因工程技术领域的在叶绿体中同时表达７个外源基因的载体构建方法。构建了一种叶绿体表达载体含有组成Ｋ８８ａｃ鞭毛蛋白基因簇的ｆａｅＣ、ｆａｅＤ、ｆａｅＥ、ｆａｅＦ、ｆａｅＧ、ｆａｅＨ、ｆａｅＩ七个基因序列，提取编码Ｋ８８ａｃ野生菌Ｃ８３９０７的质粒，用核苷酸序列与ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：１相同的引物１和核苷酸序列与ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：２相同的引物２进行ＰＣＲ扩增，核苷酸序列３０１８ｂｐ与ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ．５相同；用核苷酸序列与ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：３相同的引物３和核苷酸序列与ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：４相同的引物４进行ＰＣＲ扩增，核苷酸序列与ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ．６相同，将其与ｐＭＤ１８－Ｔ载体连接，转化大肠杆菌ＤＨ５α，获得含ｆａｅＣＤ序列的大肠杆菌克隆ｐＴＥＩ。对克服传统的植物遗传改良的多基因操作技术的关键缺陷，同时为生产诱导仔猪产生更为有效的抗体的植物疫苗提出了一种方法。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种在叶绿体中同时表达７个外源基因的载体构建方法，其特征在于，构建了一种叶绿体表达载体含有组成Ｋ８８ａｃ鞭毛蛋白基因簇的ｆａｅＣ、ｆａｅＤ、ｆａｅＥ、ｆａｅＦ、ｆａｅＧ、ｆａｅＨ、ｆａｅＩ七个基因序列，提取编码Ｋ８８ａｃ野生菌Ｃ↓［８３９０７］的质粒，以野生菌Ｃ↓［８３９０７］的质粒为模板，用核苷酸序列与ＳＥＱＩＤＮＯ：１相同的引物１和核苷酸序列与ＳＥＱＩＤＮＯ：２相同的引物２进行ＰＣＲ扩增，获得全长基因ｆａｅＣＤ的扩增产物，为３０１１ｂｐ，且核苷酸序与ＳＥＱ ＩＤＮＯ．５相同；将其与ｐＭＤ１８－Ｔ载体连接，转化大肠杆菌ＤＨ５α，获得含ｆａｅＣＤ序列的大肠杆菌克隆...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：张大兵，申慧峰，梁婉琪，钱炳俊，袁政，
申请(专利权)人：上海交通大学，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]