一种从蛇毒中提取单一成份降纤酶的方法技术

一种从蛇毒中提取具有降纤溶栓作用的降纤酶的方法，属于医药技术领域。步骤包括如下：蛇毒经浸泡溶解、离心；上清液经亲和柱层析；洗脱液直接流经葡聚糖凝胶Ｇ２５脱盐层析；含有效成分的洗脱液经包埋、浓缩；浓缩样品再经分子筛层析，即可得到单一成分的降纤酶。本方法具有适合规模化生产、操作简便、生产周期短、产品纯度高等特点。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
从蛇毒中提取单一成份降纤酶的方法，步骤包括：（１）蛇毒用缓冲液浸泡、溶解过夜，离心去除沉淀，得上清液；（２）蛇毒上清液经亲和柱层析，上样结束后，用ｐＨ８．５～９．５含２．０～２．５ＭＮａＣＬ的Ｔｒｉｓ－ＨＣＬ缓冲液Ⅰ进行洗脱，至核酸蛋白检测仪读数达到基线后，再用ｐＨ８．５～９．５含０．１～０．５ＭＮａＣＬ和０．１～０．２Ｍ苯甲脒盐酸盐的Ｔｒｉｓ－ＨＣＬ缓冲液Ⅱ洗脱，核酸蛋白检测仪检测样品峰，收集得降纤酶粗提液；（３）降纤酶粗提液直接流经脱盐柱，去除苯甲脒盐酸盐；（４）去除苯甲脒酸盐的降纤酶粗提液用聚乙二醇２００００包埋、浓缩，得降纤酶粗提液的浓缩液；（５）降纤酶粗提液的浓缩液经分子筛柱层析，即得单一组份降纤酶；上述提取分离的全过程均在３～６℃的低温层析冷柜或冷室中进行。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王晶翼，刘禄娟，张润平，张明会，于萍，
申请(专利权)人：齐鲁制药有限公司，
类型：发明
国别省市：88[中国|济南]