人源性胰腺分泌型胰蛋白酶抑制剂的基因工程生产方法技术

本发明专利技术公开了人源性胰腺分泌型胰蛋白酶抑制剂的基因工程生产方法。本发明专利技术采用真核分泌表达的方法来制备重组人胰腺分泌型胰蛋白酶抑制剂，包括：（１）具有工程菌密码子偏好性人胰腺分泌型胰蛋白酶抑制剂基因的合成以及表达载体的构建；（２）工程菌的构建及发酵；（３）重组人胰腺分泌型胰蛋白酶抑制剂的制备与纯化。本发明专利技术采用基因工程技术制备重组人胰腺分泌型胰蛋白酶抑制剂，克服了从人体组织中提取，成本高且来源少等缺点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属生物工程
，涉及一种人胰腺分泌型胰蛋白酶抑制剂的基因工程生产方法。
技术介绍
胰腺分泌型胰蛋白酶抑制剂是一种Kazal型丝氨酸蛋白酶抑制剂，存在于哺乳动物的消化系统。胰腺分泌型胰蛋白酶抑制剂是一种由胰腺腺泡细胞合成，并和各种淀粉酶，脂肪酶，蛋白水解酶等一起分泌到胆汁。胰腺分泌的蛋白水解酶有很大一部分是内源性蛋白水解酶，包括胰蛋白酶，糜蛋白酶，弹性蛋白酶等。这些蛋白水解酶可以水解蛋白之间的肽键，也会导致胰腺自身的损伤。体内有几种方式确保蛋白水解酶在一定的情况下以失活的状态存在以免造成自体损伤以蛋白酶原形式存在于胰腺的导管当中；以酶原颗粒的方式包装起来；分泌蛋白酶抑制剂抑制小部分被激活的蛋白酶原。胰腺分泌型胰蛋白酶抑制剂是一多功能抑制剂，能够有效抑制胰蛋白酶、糜蛋白酶、溶血纤维蛋白酶及各种组织或血浆激肽释放酶等多种蛋白水解酶的活性，减少溶酶体酶释放，改善循环状况和组织灌注，抑制炎症介质产生和释放。人源性胰腺分泌型胰蛋白酶抑制剂在治疗急性胰腺炎，烧伤后的休克及产后大出血等疾病，有独特的疗效；是治疗上述疾病最适合的胰蛋白酶抑制剂药物人源性蛋白，不会产生免疫原反应被机体的本文档来自技高网...

【技术保护点】
人源性胰腺分泌型胰蛋白酶抑制剂的基因工程生产方法，包括以下步骤：（１）按毕赤酵母密码子偏好性化学合成人胰腺分泌型胰蛋白酶抑制剂基因，其核苷酸序列为：５’－ＧＡＴＴＣＴＣＴＧＧＧＴＣＧＴＧＡＡＧＣＣＡＡＡＴＧＴＴＡＴＡＡＣＧＡ ＡＣＴＧＡＡＣＧＧＴＴＧＴＡＣＣＡＡＡＡＴＴＴＡＴＧＡＴＣＣＡＧＴＴＴＧＴＧＧＴＡＣＣＧＡＴＧＧＴＡＡＣＡＣＣＴＡＴＣＣＡＡＡＣＧＡＡＴＧＴＧＴＴＣＴＧＴＧＴＴＴＴＧＡＡＡＡＣＣＧＴＡＡＡＣＧＴＣＡＧＡＣＣＴＣＴＡＴＴＣＴＧ ＡＴＴＣＡＧＡＡＡＴＣＴＧＧＴＣＣＡＴＧＴ－３’；（２）设计引物，以所合成的人胰腺分泌型...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：徐安龙，任宇锋，赖春娥，区景行，王磊，
申请(专利权)人：中山大学，
类型：发明
国别省市：81[中国|广州]