本发明专利技术公开了成团泛菌（Ｐａｎｔｏｅａ ａｇｇｌｏｍｅｒａｎｓ）Ｂ５０１ ＣＧＭＣＣ Ｎｏ．１６５５及其发酵培养方法与应用。其发酵培养方法包括以下步骤：１）将成团泛菌（Ｐａｎｔｏｅａａｇｇｌｏｍｅｒａｎｓ）Ｂ５０１ ＣＧＭＣＣ Ｎｏ．１６５５接种到其三角瓶、种子罐专用培养基中，在２８－３５℃、ｐＨ为７．０－８．０下培养２４－４８小时，得到种子液；２）将步骤１）制备的种子液接种到该菌的发酵罐专用培养基中，在２８－３５℃、ｐＨ为７．０－８．０下培养４８－９６小时。该菌及以该菌为活性成分的菌剂可用于防治果蔬真菌病害，并具有以下优点：１）抑菌谱较广，防病效果好；２）作用效率高；３）生物安全性高；４）发酵周期短，菌剂制备工艺简单，具有工业化生产的可能性。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一株成团泛菌及其发酵培养方法与应用。
技术介绍
1989年，Gavini等(Gavini，F.et al.Transfer of Enterobacter agglomerans(Beijerinck 1888)Ewing and Fife 1972 to Pantoea gen.nov.as Pantoeaagglomerans comb.nov.and description of Pantoea dispersa sp.nov..Int.J.Syst.Bacteriol，1989，39337-345.)创立了泛菌属(Genus Pantoea)，该属包括成团泛菌(Pantoea agglomerans)和分散泛菌(Pantoea dispersa)二个种，其中成团泛菌种(Pantoea agglomerans)与成团肠杆菌(Enterobacter agglomerans)、草生欧文氏菌(Erwinia herbicola)和鸡血藤欧文氏菌(Erwinia milletiae)为同义名，它是产类胡萝卜素的黄色菌群，最早从植物、种子中分离获得，后来在多种环境中均发现了该菌群的存在。研究人员对成团泛菌进行了大量研究工作，发现它在医学、农业及遗传学上都具有重要作用，主要表现在以下方面1)生物代谢方面具有脱卤素、降解三硝酸甘油及将甘油转化为1，3-丙二醇的能力。2)促生方面不仅具有溶磷、生物固氮能力，还可分泌植物激素及各种酶类，具有潜在的应用价值。3)生物防治方面近年来，研究人员发现该菌可以有效地抑制由不同细菌、真菌引起的植物病害。例如，从玉米根际土壤分离到的成团泛菌对引起植物病害的一种土著致病真菌(Fusarium moniliforme)具有抑制作用；对由解淀粉欧文氏菌(Erwiniaamylovora)引起的水果火疫病也具有一定的防治效果；在大麦田间试验中，成团泛菌对由丁香假单胞菌丁香致病变种(Pseudomonas syringae pv.syringae)引起的粒疫病的防治效果可达到45％-70％；从水稻分离到的内生成团泛菌对立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)具有拮抗作用；从苹果表面分离的成团泛菌CPA-2能有效抑制苹果、梨和柑桔的主要真菌病害。目前，大多数细菌的生防效果与抗生素的产生有关。频繁使用抗生素可使病原物产生抗药性，降低防病效果，并且还会对人类健康造成威胁。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一株对果蔬真菌病害具有防治作用且不产生抗生素的成团泛菌及其发酵培养方法。本专利技术所提供的成团泛菌菌株是(Pantoea agglomerans)B501，该菌株已于2006年03月20日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.1655。成团泛菌(Pantoea agglomerans)B501 CGMCC No.1655的是革兰氏阴性菌(0.5-0.8×1-3μm)，在LB培养基上划线后，经28℃培养1-2d后，可产生光滑、圆形、凸起的黄色菌落。D-甘露糖、D-木糖、D-甘露醇、L-阿拉伯糖、L-鼠李糖、蔗糖、乳糖、水扬甘、麦芽糖及海藻糖产酸为阳性；卫矛醇、间-肌醇(慢)、D-阿东醇、α-甲基-D-葡萄糖甘和D-山梨醇(慢)产酸为阴性。精氨酸脱酸酶、鸟氨酸脱酸酶、精氨酸双水解酶、苯丙氨酸脱氨酶、脲水解、氧化酶、吲哚产生、明胶液化、脂酶、D-葡萄糖产气、H2S产生和KCN生长为阴性；运动性、七叶灵水解、丙二酸利用、柠檬酸盐及D-葡萄糖产酸为阳性。生长温度范围3-42℃，最适生长温度28-32℃；生长酸碱度范围pH＝5-8.6，最适pH＝7.2-7.5。本专利技术的第二个目的是提供一种成团泛菌(Pantoea agglomerans)B501 CGMCCNo.1655的发酵培养方法。本专利技术所提供的成团泛菌(Pantoea agglomerans)B501 CGMCC No.1655的发酵培养方法，包括以下步骤1)将成团泛菌(Pantoea agglomerans)B501 CGMCC No.1655接种到三角瓶、种子罐专用培养基中，在28-35℃、pH为7.0-8.0下培养24-48小时，得到种子液；所述成团泛菌(Pantoea agglomerans)B501 CGMCC No.1655的三角瓶、种子罐专用培养基配方为胰蛋白胨8-12g，酵母提取物4-6g，蔗糖10-20g，NaCl 8-12g，用水定容至1000mL；2)将步骤1)制备的种子液接种到该菌的发酵罐专用培养基中，在28-35℃、pH为7.0-8.0下培养48-96小时；所述成团泛菌(Pantoea agglomerans)B501 CGMCCNo.1655的发酵罐专用培养基的配方为蔗糖8-12g，胰蛋白胨4-6g，玉米粉15-25g，大豆粉15-25g，麦麸15-25g，Na2HPO41.5-2.5g，NaH2PO40.15-0.25g，MgSO40.2-0.4g，ZnSO40.4-0.6g，CaCO31.5-2.5g，泡敌0.08-0.12g，用水定容至1000mL。在上述发酵培养方法中，接种比例为5-8％，培养条件优选为在28-32℃、pH为7.2-7.5下通气培养，通气量为26-53mM O2L-1h-1。优选的成团泛菌(Pantoea agglomerans)B501 CGMCC No.1655三角瓶、种子罐专用培养基配方为胰蛋白胨10g，酵母提取物5g，蔗糖15g，NaCl 10g，用水定容至1000mL。优选的成团泛菌(Pantoea agglomerans)B501 CGMCC No.1655发酵罐专用培养基配方为蔗糖10g，胰蛋白胨5g，玉米粉20g，大豆粉20g，麦麸20g，Na2HPO42g，NaH2PO40.2g，MgSO40.3g，ZnSO40.5g，CaCO32g，泡敌0.1g，用水定容至1000mL。此外，为获得更好的培养效果，在进行种子罐培养前可先进行三角瓶培养，具体方法为将成团泛菌(Pantoea agglomerans)B501 CGMCC No.1655接种到其三角瓶专用培养基中，在28-35℃、pH为7.0-8.0下培养24-48小时。在三角瓶培养方法中，接种比例为5-8％，培养条件优选为在28-32℃、pH为7.2-7.5下振荡培养，振速为100-250rpm。本专利技术的另一个目的是提供一种成团泛菌(Pantoea agglomerans)B501 CGMCCNo.1655菌剂。本专利技术所提供的成团泛菌(Pantoea agglomerans)B501 CGMCC No.1655菌剂，其活性成分为成团泛菌(Pantoea agglomerans)B501 CGMCC No.1655。用上述发酵培养方法获得的发酵液可直接作为成团泛菌(Pantoea agglomerans)B501 CGMCC No.1655菌剂使用，并可根据需要调整发酵条件，得到不同浓度的菌剂。将发酵液经低温(32-35℃)干燥后，可得到干粉剂型的成团泛菌(Pantoeaagglomerans)B501 CGMCC No.1655菌剂。此外，在上述发酵液的基础上本文档来自技高网...
【技术保护点】
成团泛菌（Ｐａｎｔｏｅａ ａｇｇｌｏｍｅｒａｎｓ）Ｂ５０１ ＣＧＭＣＣ Ｎｏ．１６５５。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：薛梦林，
申请(专利权)人：西北农林科技大学，
类型：发明
国别省市：61[中国|陕西]
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