一种融合蛋白的酵母表达载体及其基因工程产品制造技术

本发明专利技术涉及一种融合蛋白的酵母表达载体及其基因工程产品，属于生物技术制药工业中的基因工程生产疫苗药物的技术领域。分别以乙脑Ｅ蛋白基因和人结核杆菌Ｈ３７Ｒｖ标准株的基因组为模板扩增出Ｅ蛋白主要抗原片段基因和Ｍ．Ｔｈｓｐ７０基因，先将这两个基因以一个酶切位点ＢａｍＨＩ连接的方式克隆入ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔ　　ＳＫ＋质粒中，最后将该融合基因克隆入ｐＰＩＣＺα－Ａ中，构建酵母表达载体ｐＰＩＣＺα－Ｅ－ｈｓｐ７０，按照说明书，该融合表达载体ｐＰＩＣＺα－Ｅ－ｈｓｐ７０线性化后，电转化酵母菌，通过甲醇诱导表达，从而获得融合蛋白Ｅ－ｈｓｐ７０，来开发研制相关的基因工程产品。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种融合蛋白的酵母表达载体，是通过以下方法获得的：１）设计引物：上游引物ｐ１：５’ＧＡＡＴＴＣＡＴＣＣＴＣＣＴＧＣＴＧＴＴＧＧＴＣ３’；下游引物ｐ２：５’ＧＧＡＴＣＣＧＡＡＧＧＧＧＴＴＣＡＣＴＧＴＣＡＣ３’； 以乙脑Ｅ蛋白基因为模板，通过ＰＣＲ方法扩增获得乙脑Ｅ蛋白上主要抗原片段基因，Ｅ蛋白上主要抗原片段基因位于乙脑ＳＡ１４－１４－２毒株基因组的９４６ｎｔ－２０５８ｎｔ；２）设计引物：上游引物ｐ１：５’ＧＧＡＴＣＣＡＴＧＧＣＴＣＧ ＴＧＣＧＧＴＣＧＧＧＡＴＣＧＡＣＣ３’；下游引物ｐ２：５’ＴＣＴＡＧＡＡ...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：陈溥言，葛菲菲，邱亚峰，曹瑞兵，周斌，
申请(专利权)人：南京农业大学，
类型：发明
国别省市：84[中国|南京]