ω-芋螺毒素M VII A突变体及制备和应用制造技术

本发明专利技术提供一种重组ω－芋螺毒素Ｍ　　Ⅶ　　Ａ（ＣＴＸ　　Ｍ　　ⅦＡ）突变体，具有ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：１的氨基酸序列，采用与谷胱甘肽Ｓ－转移酶（ＧＳＴ）融合表达的方法，在已构建的ｐＧＥＸ－２Ｔ／ＣＴＸ　　Ｍ　　ⅦＡ原核表达质粒基础上，在大肠杆菌中用ＩＰＴＧ诱导表达ＧＳＴ－ＣＴＸ　　Ｍ　　ⅦＡ融合蛋白，经ＧＳＴ亲和层析的方法纯化融合蛋白，用凝血酶进行酶切产生ＣＴＸ　　Ｍ　　ⅦＡ的突变体，产物经过凝胶柱进行分离纯化；为获得正确的二硫键配对，先用还原剂将突变体的二硫键配打开，再用ＰＢＳ透析过夜，空气氧化获得目的产物。本发明专利技术方法，操作简单、质量稳定、成本较低，可在制备无成瘾型的镇痛药物中应用。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种ω－芋螺毒素ＭⅦＡ突变体，具有ＳＥＱＩＤＮＯ：１的氨基酸序列：Ｇｌｙ－Ｓｅｒ－Ｃｙｓ－Ｌｙｓ－Ｇｌｙ－Ｌｙｓ－Ｇｌｙ－Ａｌａ－Ｌｙｓ－Ｃｙｓ－Ｓｅｒ－Ａｒｇ－Ｌｅｕ－Ｍｅｔ－Ｔｙｒ－Ａｓｐ－Ｃｙｓ－Ｃｙｓ－Ｔｈｒ －Ｇｌｙ－Ｓｅｒ－Ｃｙｓ－Ａｒｇ－Ｓｅｒ－Ｇｌｙ－Ｌｙｓ－Ｃｙｓ２７，该多肽有机化合物分子中Ｃｙｓ３与Ｃｙｓ１８、Ｃｙｓ１０与Ｃｙｓ２２、Ｃｙｓ１７与Ｃｙｓ２７之间分别形成三对二硫键，Ｃ－端为非酰胺化Ｃｙｓ。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：詹金彪，夏铮，王峰，徐小蓉，黄建松，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：86[中国|杭州]