一种冠状病毒基因工程蛋白质及应用制造技术

本发明专利技术公开了一种冠状病毒基因工程蛋白质及应用。与冠状病毒ＳＡＲＳ－ＣｏＶ的Ｓ蛋白相关的基因工程蛋白质ＦＳＰＡ以及编码该ＦＳＰＡ的核苷酸序列和氨基酸序列。一种含ＳＡＲＳ－ＣｏＶ　　Ｓｐｉｋｅ基因的重组昆虫病毒株－重组苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒毒株ＡｃＮＰＶ－ＦＳＰＡ，ＣＣＴＣＣ　　ＮＯ．Ｖ２００５１３，该重组病毒株插入了ＳＡＲＳ－ＣｏＶ　　Ｓｐｉｋｅ表达盒。基因工程蛋白质ＦＳＰＡ在检测严重的急性呼吸综合征的病原－冠状病毒ＳＡＲＳ－ＣｏＶ中的应用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及冠状病毒SARS-CoV相关的重组基因工程蛋白质FSPA，同时还涉及基因工程蛋白质FSPA在检测急性呼吸综合征(Severe acute respiratory syndrome，SARS，又称传染性非典型肺炎Atypical pneumonia，AP)的病原——SARS-CoV中的应用。
技术介绍
严重急性呼吸综合征(Severe acute respiratorysyndrome，SARS)，又称传染性非典型肺炎(Atypicalpneumonia，AP)。可以引起感染者出现发热、干咳和呼吸困难等症状，感染严重可导致患者死亡[Marra M A，Jones S J，Astell C Ret al.The genome sequence of the SARS-associatedcoronavirus[J].Science，2003；3001399.][Lew T W，KwekT K，Tai D et al.Acute respiratory distress syndrome incritically ill patients with severe acuterespiratory syndrome[J].JAMA，2003；290374.][Holmes KV.SARS2associatedcoronavirus[J].New Engl J Med，2003；3481948.]。SARS首发病例于2002年11月出现在我国广东地区，并迅速向周边地区蔓延[Nie Q H，Luo X D，Zhang JZ，et al.Current status ofsevere acute respiratory syndrome in China.World JGastroenterol[J]，2003，9(8)1635-1645.]。从2002年底到2003年，SARS已经播散到全世界33个国家和地区，造成8千多人感染，800多人死亡的严重后果[Cumulative Number ofReported Probable Cases of Severe Acute Respiratory Syndrome(SARS)2Worldwide[DB].11.July.2003.WHO.http://www.who.int/csr/sars/country/2003-07-11/en/]。其中疫情以中国大陆，中国香港为重。其传染性强，感染率高，严重威胁人类的健康，影响着社会发展和经济建设的正常进行。 严重急性呼吸综合征(SARS)是一种由冠状病毒引起的急性传染病。[Lew TW，Kwek TK，Tai D，et al.Acute respiratorydistress syndrome in critically ill patients with severe acuterespiratory syndrome[J].JAMA，2003，290374.]。4月，香港的研究人员宣布，一种未知的新型冠状病毒(SARS-CoV)可能是SARS的病因[Peiris J SM，Lai ST，Poon LLM，et al.Coronavirus as a possible cause of severe acute respiratorysyndrome[J].Lancet，2003，361(9366)1319-1325.]。随后，加拿大[Marra MA，Jones SJM，Astell CR，et al.TheGenome Sequence of the SARS2Associated Coronavirus[J].Science，2003，300(5624)1399-1404.]、美国[Rota PA，Oberste MS，Monroe SS，et al.Characterization of a novelcoronavirus associated with severe acute respiratory syndrome[J].Science，2003，300(5624)1394-1399.]和中国[QinED，Zhu Qy，Wang J，et al.A complete sequence and comparativeanalysis of a SARS-associated virus(Isolate BJ01)[J].ChinSci Bull，2003，48(10)941-948.]的科研人员相继公布了SARS-CoV的全基因组序列。 SARS-CoV属巢状病毒目(OrderNidovirus)，冠状病毒科(FamilyCoronaviridae)，冠状病毒属(GenusCoronavirus)。根据其基因组结构分类，它属于单链正义RNA病毒，即(+)sense，ssRNA virus。在电镜下，病毒颗粒呈不规则形，直径约为60～220nm。颗粒中心负染在电镜下呈不定形态，核壳体呈疏松状态[Konrad Stadler，Vega Masignani，Markus Eickmann，et al.SARS-beginning to understand a new virus[J].Nature reviewsmicrobiology，2003，1(3)209-218.]。病毒体为六角形状。组成病毒体衣壳的结构蛋白总共有4～5种。包括S蛋白(Spikeprotein)，M蛋白(Membrane protein)，E蛋白(small membraneprotein)，N蛋白(nucleoprotein)，在某些冠状病毒中还有HE蛋白(hemagglutinin-esterase)(图1)。SARS-CoV中的S、E、M和N蛋白在病毒颗粒进入宿主细胞、形态发生及释放过程中起到重要作用。 SARS-CoV基因组有27～31kb、11个开放阅读框(openingreading f rames，ORF)组成[H.Garoff，R Hewson，D2J.E.Opstelten，et al.Virus maturation by budding[J].Micro MolBiol，Rev，1998，62(4)1171-1190.]SARS-CoV RNA聚合酶的编码区占用了5′端21.2kb，约全基因组的三分之二[WeiRui，Qi peng Zhang，Lei Shi，et al.The preliminary analysisof SARS coronavirus proteins′sequences.May 1，2003.http://cmbi.bjmu.edu.cn/cmbidata/sars/sars-polymerase/sars-polymerase.html]；后三分之一的区域，编码病毒结构蛋白，按基因组上的排列顺序依次为S蛋白、E蛋白、M蛋白、N蛋白；未发现HE蛋白编码序列[Paul A.Rota，M.Steven Oberste，Stephan S.Monroe，et al.Characterization of a novelcoronavirus associat本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种基因工程表达、分离和纯化的蛋白质，其具有与ＳＥＱＩＤＮＯ．１所示氨基酸序列至少７０％同源性的序列。

【技术特征摘要】
1.一种基因工程表达、分离和纯化的蛋白质，其具有与SEQ IDNO.1所示氨基酸序列至少70％同源性的序列。2.一种基因工程表达、分离和纯化的蛋白质，其具有与SEQ IDNO.1所示氨基酸序列至少80％同源性的序列。3.一种基因工程表达、分离和纯化的蛋白质，其具有与SEQ IDNO.1所示氨基酸序列至少90％同源性的序列。4.根据权利要求1或2所述的蛋白质，其特征在于所述的蛋白质的分子量为144千道尔顿。5.根据权利要求1或2或3所述的蛋白质，其特征在于所述的蛋白质还包括载体序列MPRGSHHHHHHGMASMTGGQQMGRDLYDDDDKDRWGSELE。6.一种基因工程表达、分离和纯化的蛋白质，其具有与SEQ IDNO.2所示核苷酸序列至少50％同源性的序列。7.一种基因工程表达、分离和纯化...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐进平，孟小林，王健，鲁伟，
申请(专利权)人：武汉大学，
类型：发明
国别省市：83[中国|武汉]