对虾白斑杆状病毒基因组DNA提取方法技术

本发明专利技术公开了一种对虾白斑杆状病毒基因组ＤＮＡ提取方法。它以患对虾白斑杆状病毒病的存活的患病虾或新鲜的病死虾为样品，先用无菌水清洗后，再置样品于加热器皿中，加无菌水浸没至２～３ｃｍ，加热至沸腾，保持８～１０ｍｉｎ，加入ＴＮ缓冲液研磨制成匀浆液，经中速离心等步骤的处理，得到ＷＳＳＶ基因组ＤＮＡ。本发明专利技术由于采用了加温煮沸法预处理样品的方法，使样品研磨容易，匀浆迅速而充分；还因为样品加热后，动物蛋白包括病毒蛋白凝固变性，病毒粒子核衣壳易于分离出组织，ＤＮＡ得率大幅度提高；同时，对于苗种等病虾的早期检测，还可以采用全虾，方便了样品的获取。本发明专利技术为提取ＷＳＳＶ基因组ＤＮＡ提供了快捷、简便、有效的途径。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种对虾白斑杆状病毒基因组ＤＮＡ提取方法，其特征在于提取步骤如下：１）以患对虾白斑杆状病毒病的病虾体为样品先用无菌水清洗；２）置样品于加热器皿中，加无菌水浸没至２～３ｃｍ，加热至沸腾，保持８～１０ｍｉｎ；３）称取经上 述步骤处理后的样品１～１０ｇ，加入重量比为８～１２倍的ＴＮ缓冲液研磨制成匀浆液；４）将上述匀浆液在４℃条件下经８０００～１２０００×ｇ离心处理后，取上清，加入：蛋白酶Ｋ至终浓度为１００ｕｇ／ｍｌ、氯化钾至终浓度为５０ｍｍｏｌ／Ｌ、ｐ Ｈ８．３～８．５的三羟甲基氨基甲烷盐酸盐至终浓度为１０ｍｍｏｌ／Ｌ、明胶至终浓度为０．１...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：许雅香，张茂友，沈卫德，朱玉芳，李兵，刘衬丽，
申请(专利权)人：苏州大学，
类型：发明
国别省市：32[中国|江苏]