一种用于家蚕转基因的方法技术

本发明专利技术涉及用于家蚕转基因的方法。包括家蚕产卵、注射胚胎时期、排卵方法、注射和封口、催青等，可以提高显微注射的效率和转基因效率。方案中使用强生粉配制糨糊将蚕卵固定，用７０％酒精消毒处理蚕卵，用细毛笔将蚕卵逐颗排列，将外源基因克隆到转座子载体上构建成重组转座子，将纯化的重组转座子与Ｈｅｌｐｅｒ质粒按１∶１的重量比例用注射缓冲液调整浓度为０．４μｇ／μｌ，在实体显微镜下实施显微注射，注射量为１５－２０ｎｇ　　ＤＮＡ，注射后蚕卵用皮革用胶封口；将注射后的蚕卵连同载玻片移入催青容器，２５℃催青，孵化饲养、挑选继代、检测。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，涉及用于家蚕转基因的方法。具体为虫卵注射方法导入外源基因，包括家蚕产卵、注射胚胎时期、排卵方法、注射和封口、催青等，较大地提高了转基因效率。
技术介绍
所谓转基因是指基因的转移，即用各种工方法插入生物体自身不具有的基因，由于染色体遗传物质的交换而使其表现形态得以改变。通过获得的生物称为转基因生物，即转基因植物和转基因动物。进而所谓转基因昆虫是指昆虫染色体上插入了别的生物的基因的重组昆虫。利用病毒导入外源遗传物质时，被重组的基因存在于病毒染色体上，于是病毒仅只感染生物体(也称宿主)，而不将重组基因传递给他的下一代。但是转基因昆虫则在染色体上进行了遗传物质的重组，一旦外源基因导入后则可在后代中传递，与昆虫自身所具有的基因在后代中的表达完全相同。因此，一旦作成转基因昆虫，可以轻易地进行饲育、繁殖、传代。即是所说的彻底改变生物自身性状的生物技术。目前研究现状，家蚕转基因主要通过以下三种途径进行1、提取外源DNA并用技术手段导入另一昆虫体内，主要在胚胎早期进行。早期应用此方法也曾获得多一些变异个体，但通常这些外源DNA仅仅进入细胞质而非整合到染色体上，因此往往不本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于家蚕转基因的方法，其特征在于以下步骤：（１）将强生粉配制成６０％重量比的水剂，蒸成糨糊状，均匀涂抹于蚕连纸上，自然晾干，取刚羽化交配雌蛾，按１小时间隔分批在蚕连纸上产卵，每隔１小时将雌蛾移至另一蚕连纸上继续产卵，直至产卵完毕 ；（２）用７０％酒精喷洒卵面，进行消毒处理，然后用清水水洗蚕卵到容器中，用细毛笔将蚕卵逐颗整齐排列于载玻片上，蚕卵卵孔部位朝上，卵窝部位朝右，自然晾干，利用蚕连纸上的糨糊将蚕卵粘于载玻片上，自然晾干；（３）将外源基因克隆到转 座子载体上构建成重组转座子ｐｉｇｇｙＢａｃ－ＤｓＲｅｄ－ＦｉｇＨ－外源基因－ＬＢＳ，将纯化的重组...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：缪云根，李广李，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：86[中国|杭州]