【技术实现步骤摘要】
【技术保护点】
人甲状旁腺激素与人血清白蛋白的融合蛋白的制备方法,其特征是从新鲜人甲状旁腺组织中分离单核甲状旁腺细胞,刺激培养,提取RNA;通过RT-PCR反转录得到PTHcDNA;通过PCR从人胎肝cDNA文库中扩增获得HSAcDNA;利用重叠P CR技术,连接HSAcDNA和PTHcDNA,中间不加入任何连接肽,得到的PTH-HAScDNA融合基因插入到克隆载体,PTH-HAScDNA融合基因在宿主系统中进行表达,PTH-HAScDNA融合基因被整合到宿主的染色 体中;(1)PTHcDNA的克隆:以RT-PCR反转录得到的PTHcDNA第一链为模板,通过PCR扩增出PTHcDNA,所用的引物如下:p1:5’-CGGAATTCATGACCCCCCTGGGCCCTGC -3’p2:5’-CGGCGGCCGCTCAGGGCTGGGCAAGGTGGC-3’PCR方法如下:50μl的反应体系中加入:10μmol/L的p1和p2的引物各1.5μl,2mmol/L的dNTP5μl,10×pf ...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员:沈微,金坚,诸葛健,王俊,张莲芬,
申请(专利权)人:江南大学,
类型:发明
国别省市:32[中国|江苏]
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