The invention discloses a two-phase system by enzymatic hydrolysis and extraction were prepared by coupling the prototype of sulforaphen extract methods: fresh radish seedling drying, crushing, n-hexane extraction, impurity was radish sprout powder; adding n-hexane pre dispersed; after adding phosphate buffer solution, enzymolysis and extraction coupling preparation of reduced sulforaphen; adjusting the pH value of the solution, the static; the addition of anhydrous sodium sulfate, dehydration treatment; vacuum distillation is the prototype of sulforaphane extract. Gain reduction type sulforaphen extract method of the invention can not only fast and high yield of enzymatic hydrolysis, but also has the characteristics of high extraction rate, high stability, improved significantly reduced sulforaphen extract overall preparation process yield, greatly reduce the production cost but also the prototype of sulforaphen, avoiding the use of dichloromethane, chloroform high toxic organic solvent, no pollution to the environment, especially suitable for industrialized production preparation reduced sulforaphen extract.
【技术实现步骤摘要】
一种利用两相体系酶解与萃取偶联制备还原型萝卜硫素提取物的方法
本专利技术属于生物化工
,具体涉及一种利用两相体系酶解与萃取偶联制备还原型萝卜硫素提取物的方法。
技术介绍
研究表明,萝卜具有很好的抗癌、防癌效果,长期大量食用萝卜的人群的癌症发病率明显低于不食用或少量食用萝卜的人群,原因在于萝卜中富含硫代葡萄糖苷类化合物。其能被萝卜自身的黑芥子酶催化酶解,再经分子内重排,最终生成具有显著抗癌、防癌效果的异硫氰酸酯类化合物。萝卜中主要富含两种硫代葡萄糖苷类化合物(氧化型萝卜硫苷,Glucoraphenin;还原型萝卜硫苷,Glucoraphasatin),其中,萝卜芽苗中主要富含的硫代葡萄糖苷类化合物为还原型萝卜硫苷,其经萝卜芽苗自身富含的黑芥子酶催化酶解,再经分子内重排反应,最终转化生成还原型萝卜硫素(Raphasatin,分子式为C6H9NS2)。还原型萝卜硫素的化学结构式如下:据相关研究报道,还原型萝卜硫素具有很好的抗癌、防癌效果,其抗癌与防癌作用机制为:(1)显著诱导Ⅱ相解毒酶的表达,促使人体快速代谢并排泄机体内积聚的大量致癌物质;(2)显著诱导多种癌细胞的快速凋亡;(3)显著诱导多种癌细胞增殖周期的停滞;(4)有效抑制多种癌细胞的增殖,并杀死癌细胞;(5)有效抑制幽门螺杆菌的增殖,并杀死幽门螺杆菌,从而高效预防胃癌的形成。另外,还原型萝卜硫素还具有很好的抗氧化、抗菌、抗突变等药理活性。近几年来,随着国内外对还原型萝卜硫素抗癌防癌及其它药理活性研究的不断深入,富含还原型萝卜硫素相关产品越来越受到人们的关注,对还原型萝卜硫素提取物的需求也在不断增加, ...
【技术保护点】
一种利用两相体系酶解与萃取偶联制备还原型萝卜硫素提取物的方法,其特征在于,是由以下步骤制得的:1)取新鲜萝卜芽苗,烘干,得干燥萝卜芽苗;将干燥萝卜芽苗粉碎,得萝卜芽苗微粉;2)将萝卜芽苗微粉置于高速剪切分散提取罐中分散提取,加入正己烷,在提取温度15‑55℃和分散盘转速50‑500rpm条件下,分散提取0.5‑3h;提取完成后静置8‑12h,减压过滤或离心,得微粉;重复分散提取1‑5次,得除杂的萝卜芽苗微粉;3)将除杂的萝卜芽苗微粉置于高速剪切分散提取罐中,加入正己烷,在温度15‑35℃和分散盘转速50‑500rpm条件下,预分散5‑30min;预分散完成后加入磷酸盐缓冲溶液,酶解与萃取偶联制备还原型萝卜硫素30‑180min;反应完成后用5mol/L盐酸调节溶液pH值至1.0‑2.5,静置1‑5h;充分收集正己烷相,加入无水硫酸钠,在转速为50‑500rpm条件下,脱水处理1‑5h;在温度为30‑50℃条件下,减压蒸馏回收正己烷,得还原型萝卜硫素提取物。
【技术特征摘要】
1.一种利用两相体系酶解与萃取偶联制备还原型萝卜硫素提取物的方法,其特征在于,是由以下步骤制得的:1)取新鲜萝卜芽苗,烘干,得干燥萝卜芽苗;将干燥萝卜芽苗粉碎,得萝卜芽苗微粉;2)将萝卜芽苗微粉置于高速剪切分散提取罐中分散提取,加入正己烷,在提取温度15-55℃和分散盘转速50-500rpm条件下,分散提取0.5-3h;提取完成后静置8-12h,减压过滤或离心,得微粉;重复分散提取1-5次,得除杂的萝卜芽苗微粉;3)将除杂的萝卜芽苗微粉置于高速剪切分散提取罐中,加入正己烷,在温度15-35℃和分散盘转速50-500rpm条件下,预分散5-30min;预分散完成后加入磷酸盐缓冲溶液,酶解与萃取偶联制备还原型萝卜硫素30-180min;反应完成后用5mol/L盐酸调节溶液pH值至1.0-2.5,静置1-5h;充分收集正己烷相,加入无水硫酸钠,在转速为50-500rpm条件下,脱水处理1-5h;在温度为30-50℃条件下,减压蒸馏回收正己烷,得还原型萝卜硫素提取物。2.根据权利要求1所述的利用两相体系酶解与萃取偶联制备还原型萝卜硫素提取物的方法,其特征在于,所述步骤1)中...
【专利技术属性】
技术研发人员:况鹏群,王兆玲,冯尚彩,吕鑫华,赵志龙,刘祁瑞,
申请(专利权)人:临沂大学,
类型:发明
国别省市:山东,37
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