以萤火虫荧光素酶为报告基因的ＢＩＶ感染性指示细胞系制造技术

一株指示牛免疫缺陷病毒（Ｂｏｖｉｎｅ　　Ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ　　Ｖｉｒｕｓ，ＢＩＶ）感染的细胞系及其应用。该细胞系可以在ＢＩＶ感染的特定条件下表达萤火虫荧光素酶（ｆｉｒｅｆｌｙ　　ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ），从而通过检测萤火虫荧光素酶的活性来间接指示牛免疫缺陷病毒的感染。该细胞系（其保藏号为ＣＧＭＣＣ　　Ｎｏ．２０４９）的构建过程：萤火虫荧光素酶的基因插入到一种特异应答牛免疫缺陷病毒反式激活因子的应答元件下游构建指示质粒；将该质粒转染ＢＨＫ－２１细胞，筛选稳定表达的细胞系并单克隆化；挑选经过ＢＩＶ病毒攻击后萤火虫荧光素酶的活性明显增高的阳性克隆即为ＢＩＶ的指示细胞系。本发明专利技术具有可以定量指示ＢＩＶ感染和ＢＩＶ反式激活因子激活作用的特点。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一个用于构建指示细胞系的可以应答牛免疫缺陷病毒感染的指示质粒，具有序列表所示核苷酸序列；即将萤火虫荧光素酶（ｆｉｒｅｆｌｙｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ）的基因插入到一种特异应答牛免疫缺陷病毒反式激活因子的应答元件下游，质粒含有Ｇ４１８抗性基因。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：乔文涛，姚雪，陈启民，耿运琪，
申请(专利权)人：南开大学，
类型：发明
国别省市：12[中国|天津]