以增强型绿色荧光蛋白为报告基因的ＢＩＶ指示细胞系制造技术

一株指示牛免疫缺陷病毒ＢＩＶ感染的细胞系及其应用。该细胞系可以在ＢＩＶ感染的特定条件下表达增强型绿色荧光蛋白（ＥＧＦＰ），从而通过检测该蛋白的表达来间接指示牛免疫缺陷病毒的感染。该细胞系（其保藏号为ＣＧＭＣＣ　　Ｎｏ．２０５０）的构建过程：首先构建成一个可以应答牛免疫缺陷病毒感染的具有序列表所示核苷酸序列的报告质粒，之后，将该质粒转染ＢＨＫ－２１细胞，筛选稳定表达的细胞系并单克隆化；挑选无本底表达但经过ＢＩＶ病毒攻击后高表达ＥＧＦＰ的阳性克隆即为ＢＩＶ的指示细胞系。本发明专利技术具有快速简便且可以实时指示ＢＩＶ感染和ＢＩＶ反式激活因子激活作用的特点。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种用于构建指示细胞系的可以应答牛免疫缺陷病毒感染的指示质粒，具有序列表所示核苷酸序列；该指示质粒是将增强型绿色荧光蛋白（ＥＧＦＰ）的基因插入到一种特异应答牛免疫缺陷病毒反式激活因子的应答元件下游构建而成，质粒含有Ｇ４１８抗性基因。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：乔文涛，姚雪，陈启民，耿运琪，
申请(专利权)人：南开大学，
类型：发明
国别省市：12[中国|天津]