当前位置: 首页 > 专利查询>浙江大学专利>正文

从未经发芽的豇豆干种子中直接快速提取DNA的方法技术

技术编号:1712683 阅读:423 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术公开了一种从未经发芽的豇豆干种子中直接快速提取DNA的方法。从豇豆种子中直接提取DNA,所得DNA的质量与用幼苗叶片提取的DNA相比,无论从OD值计算所得的纯度还是从电泳验证的结果来看均没有显著差异,且经检验符合作为PCR扩增模板的条件。本发明专利技术简化了从豇豆中提取DNA的步骤,缩短了提取DNA的时间,并且采用了从种子中直接提取DNA的方法,略去了发芽过程,大大节省了时间,在利用DNA指纹图谱进行品种真实性和纯度快速鉴定中具有重要的应用价值。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种从未经发芽的豇豆干种子中直接快速提取DNA的方法,其特征在于包括如下步骤:1)取1.5mL离心管装入1mLCTAB提取液,于60~65℃水浴下预热;2)将一颗种子置于研钵中,冰浴中充分研磨,将研磨后的粉末转入预热的离心管中,剧烈振荡,置于60~65℃水浴中加热10~30min后于15~20℃,10000转/min离心10~20min;3)取上清液转入另一1.5mL离心管,加入等体积的混合液,混合液中,苯酚、氯仿、异戊醇的体积比为25∶24∶1,反复上下颠倒离心管,充分混匀后于15~20℃,10000转/min离心10~20min,重复一次;4)取上清液,加入2倍体积的无水乙醇,以及1/10体积的3M醋酸钠溶液,轻轻上下颠倒混匀,出现絮状DNA沉淀;5)4℃,5000转/min离心1~2min,去上清液,加入200~500μl无水乙醇,上下颠倒离心管,使DNA沉淀充分被洗涤;6)去掉上清液,室温风干至无酒精味;7)加入50~100μlTE将干燥的DNA沉淀室温溶解。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:张颖胡晋曹栋栋关亚静
申请(专利权)人:浙江大学
类型:发明
国别省市:86[中国|杭州]

网友询问留言 已有0条评论
  • 还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。

1