一种深层液体发酵法制备富硒金针菇粗多糖原粉的方法技术

一种深层液体发酵法生产富硒金针菇粗多糖原粉的方法，属于生物工程技术领域。本发明专利技术主要包括菌种的培养，发酵工艺，硒元素的富集，菌丝体的收集，干燥，粉碎，得到富硒金针菇胞内粗多糖原粉；另外将发酵液超滤浓缩，将浓缩液醇提后冷冻干燥得到富硒金针菇胞外粗多糖原粉；二者合并后得到产品富硒金针菇粗多糖原粉。每克粗多糖原粉中有机硒含量达２０微克／克以上。富硒金针菇多糖有抗肿瘤，提高人体免疫力，抗疲劳，促进儿童大脑发育等保健功效，是上好的保健品有效成分。用本发明专利技术方法生产富硒金针菇粗多糖原粉，周期短，成本低，工艺简便，科技含量高，不易被仿冒，有效成分含量高，附加值高，适宜工业化生产。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种深层液体发酵法制备富硒金针菇粗多糖原粉的方法，其特征是将金针菇孢子接种至新鲜的固体斜面上进行培养，待斜面长好后移至液体培养基中进行种子液的培养；再通过三级发酵，最后转至３０００Ｌ发酵罐进行深层液体发酵培养，在发酵培养基中逐级加入无机硒元素，并逐级增加浓度，使金针菇菌丝体中积累高浓度的有机硒，同时发酵液中有效成分中也有一定浓度的硒元素；发酵结束后，通过对菌体的收集、烘干、粉碎得到富含硒元素的胞内金针菇粗多糖原粉，并对发酵液进行超滤浓缩、醇提、冷冻干燥得到胞外金针菇粗多糖原粉，将两者合并最终得到富硒金针菇粗多糖原粉；步骤为：１）菌种培养：出发菌株为金针菇（ＦｌａｍｍｕｌｉｎａＶａｌｕｔｉｐｅｓ）Ｆ１２；①斜面培养：培养基配方以ｇ／Ｌ计：葡萄糖１０，磷酸二氢钾１．０，硫酸镁０．５，马铃薯汁２００，琼脂２０，ｐＨ自然；培养方法：将保存在木屑上的菌种接种到新鲜的空白斜面上，在２６±１℃下培养７－１０天；②５００ｍＬ一级摇瓶种子培养，装液量１５０ｍＬ：培养基配方以ｇ／Ｌ计：葡萄糖２０，黄豆粉１０，玉米粉１５－２０，磷酸二氢钾１．０，硫酸镁０．５和维生素Ｂ↓［１］０．０５，ｐＨ自然；培养方法：将培养好的斜面接种至事先灭菌的摇瓶中，在２６±１℃，转速１１０ｒｐｍ下培养７天；③５０００ｍＬ二级摇瓶种子培养，装液量１５００ｍＬ：培养基配方以ｇ／Ｌ计：葡萄糖２０，蛋白胨１０，玉米粉１５－２０，磷酸二氢钾１．０，硫酸镁０．５和维生素Ｂ↓［１］０．０５，ｐＨ自然；培养方法：将培养好的一级种子以１０％的接种量接种至事先灭菌的摇瓶中，在２６±１℃，转速１１０ｒｐｍ下扩大培养２天，即成摇瓶种子液；２）三级发酵培养：①５０Ｌ一级发酵种子罐培养，装液量２５－３０Ｌ：一级种子罐培养基配方以ｇ／Ｌ计：葡萄糖２０，黄豆２０，黄豆浸泡后用胶体磨磨浆离心后取汁，玉米粉５．０，麸皮５０，麸皮水煮后取水溶性麸皮汁，酵母膏３．０，维生素Ｂ↓［１］０．０５，硫酸镁０．５，磷酸二氢钾１．０，豆油２．０和亚硒酸钠２０μｇ／Ｌ，ｐＨ自然；在０．１Ｍｐａ下灭菌３０分钟，冷却后按接种量５％－１０％接入摇瓶种子，温度２６±１℃，罐压０．０５Ｍｐａ，通气量１∶０．３，Ｖ／Ｖ，搅拌转速１００ｒｐｍ，转罐标准：发酵时间３０－３５小时，菌丝球上浮三分之一，镜检有锁状联合，无杂菌；②５００Ｌ二级发酵种子罐培养，装液量２５０－３００Ｌ：二级种子罐培养基配方以ｇ／Ｌ计：葡萄糖２０，黄豆...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：沈国强，杨春霞，潘维新，张栋，
申请(专利权)人：江苏省江大绿康生物工程技术研究有限公司，
类型：发明
国别省市：32[中国|江苏]