一种携人分子佐剂的融合蛋白避孕疫苗及其制备方法技术

本发明专利技术属生物制药领域，涉及一种与人分子佐剂ｈＣ３ｄ３交联的避孕疫苗，即ｈＣＧβ－ｈＣ３ｄ３融合蛋白避孕疫苗。本发明专利技术选用真核表达载体ｐＣＩ，构建带有纯化标签的ｈＣＧβ－ｈＣ３ｄ３融合蛋白和ｈＣＧβ蛋白的真核表达质粒，通过动物宿主获得高效表达，经鉴定、纯化得高纯度目的蛋白，通过体外刺激人ＰＢＭＣ实验，证实人分子佐剂ｈＣ３ｄ３增强ｈＣＧβ蛋白疫苗体液免疫效力和抗生育潜能。较现有技术，其抗生育效果及其作用机理将更为合理、安全。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属生物制药领域，涉及一种与人分子佐剂hC3d3交联的避孕疫苗，即hCG e-hC3d3融合蛋白避孕疫苗。
技术介绍
人絨毛膜促性腺激素(hCG)是由胎盘合体滋养细胞分泌的一种糖蛋白激素，其 主要的生理功能是延长黄体寿命，使之增大成为妊娠黄体，增加甾体激素的分泌以 维持妊娠。hCG是妊娠期暂时出现的一种特异性激素，己有研究证实，中和hCG的生 物学活性可以在不干扰其它生殖生物学功能的情况下中止妊娠，因此hCG成为避孕疫苗设计中最理想的靶抗原。基于hCG结构中e亚基的特异性，以hcce为基础的合成 肽疫苗已经进入了n期临床实验。实验结果显示，hCGe避孕疫苗具有可喜的应用前景，但免疫效果个体之间的差异性和目前仅有的80%的避孕效果距临床应用相距甚远。因此，如何显著增强其具有抗生育作用的体液免疫效应，减弱有可能导致生殖系自身免疫损伤的细胞免疫效应已成为hCGe避孕疫苗的研究目标。为了打破机体对 hCGe这个小分子自身抗原的免疫耐受，以往研究中大多采用白喉类毒素(DT)或破 伤风类毒素(TT)作为载体增强其免疫原性，但DT和TT却存在着载体介导的表位抑制 效应。在哺乳动物免疫系统本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种携人分子佐剂的融合蛋白避孕疫苗，其特征在于含有与人分子佐剂Ｃ３ｄ３交联的ｈＣＧβ－ｈＣ３ｄ３融合蛋白，通过下述方法制备：选用真核表达载体ｐＣＩ，构建带有纯化标签的ｈＣＧβ－ｈＣ３ｄ３融合蛋白和ｈＣＧβ蛋白的真核表达质粒，通过动物宿主表达系统获得高效表达，经鉴定、纯化得高纯度目的蛋白，包括下述步骤：１）ｈＣ３ｄ基因克隆及构建重组ｐＣＩ－ｇｓ－ｓｉｇｎａｌ－６Ｈｉｓ－ｈＣＧβ、ｐＣＩ－ｇｓ－ｓｉｇｎａｌ－６Ｈｉｓ－ｈＣＧβ－ｈＣ３ｄ３真核表达质粒；２）表达，鉴定、纯化目的蛋白融合蛋白ｈＣＧβ－ｈＣ３ｄ３；３）ｈＣＧβ－Ｃ３ｄ３促进Ｂ细胞表达ＣＤ８６及ＣＤ８０分子；４）ｈＣＧβ－Ｃ３ｄ３促进共培...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：李大金，
申请(专利权)人：复旦大学附属妇产科医院，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]