【技术实现步骤摘要】
【技术保护点】
一种蒜氨酸酶的一步分离纯化方法，其特征是，在温度为０－４℃的条件下，按以下步骤完成： ａ、均浆：把新鲜的大蒜粉碎，按每千克新鲜大蒜加入８００－１２００ｍＬ ｐＨ６－８的缓冲液的量计算，在粉碎后的新鲜大蒜内加入缓冲液，同时进行搅拌使它们混合均匀； ｂ、提取上清液：将经步骤ａ所得物质进行冷冻离心处理，而后提取上清液； ｃ、盐析：在步骤ｂ中提取的上清液内加入饱和硫酸胺溶液，加入同时进行搅拌； ｄ、溶解：把经过盐析后得到的上清液做冷冻离心处理，而后去掉上清液，留下滤饼，再把滤饼重新溶于ｐＨ７的缓冲液内； ｅ、超滤：把溶解后的滤饼用截留分子量为１万－５万的滤膜过滤，得到截留物，即为新鲜大蒜的蒜氨酸粗液； ｆ、分离纯化：把制得的新鲜大蒜的蒜氨酸粗液采用Ｓｅｐｈａｃｒｙｌ Ｓ－２００凝胶柱进行分离：并用ｐＨ６－８的缓冲液以１０－６０ｍＬ／ｈ流速进行梯度洗脱，同时用紫外检测仪在２８０ｎｍ进行检测，收集洗脱液组分；再把它透析得到纯化的蒜氨酸酶。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：李瑜，许时婴，吴坤，
申请(专利权)人：河南农业大学，
类型：发明
国别省市：41[中国|河南]
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