一种鸡肠道β防御素的氨基酸序列与多核苷酸序列及提取方法技术

一种鸡肠道β－防御素ｃＤＮＡ，其特征在于：具有如下序列，ＴＣＡＧＡＣＡＧＣＣ　　ＡＧＣＴＧＴＧＣＡＧ　　ＧＡＡＣＡＡＣＣＡＴ　　ＧＧＣＣＡＣＴＧＣＣ　　ＧＧＡＧＧＣＴＣＴＧ　　ＣＴＴＣＣＡＣＡＴＧ　　ＧＡＧＡＧＣＴＧＧＧ　　ＣＴＧＧＧＡＧＣＴＧ　　ＣＡＴＧＡＡＣＧＧＣ　　ＣＧＣＣＴＧＣＧＣＴ　　ＧＣＴＧＣＡＧＧＴＴ　　ＣＴＣＣＡＣＣＡＡＧ　　ＣＡＧＣＣＣＴＴＴＴ　　ＣＣＡＡＣＣＣＴＡＡ　　ＡＣＡＴＴＣＡＧＴＧ　　ＣＴＧＣＡＣＡＣＡＧ　　ＣＡＧＡＧＣＡＧＧＡ　　ＣＣＣＴＴＣＣＣＣＡ　　ＡＧＣＣＴＴＧＧＡＧ　　ＧＧＡＣＧＴＧＡ。该β－防御素的氨基酸序列特征是：Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｓｅｒ－Ｇｌｎ－Ｌｅｕ　　Ｃｙｓ－Ａｒｇ－Ａｓｎ－Ａｓｎ－Ｈｉｓ　　Ｇｌｙ－Ｈｉｓ－Ｃｙｓ－Ａｒｇ－Ａｒｇ　　Ｌｅｕ－Ｃｙｓ－Ｐｈｅ－Ｈｉｓ－Ｍｅｔ　　Ｇｌｕ－Ｓｅｒ－Ｔｒｐ－Ａｌａ－Ｇｌｙ　　Ｓｅｒ－Ｃｙｓ－Ｍｅｔ－Ａｓｎ－Ｇｌｙ　　Ａｒｇ－Ｌｅｕ－Ａｒｇ－Ｃｙｓ－Ｃｙｓ　　Ａｒｇ－Ｐｈｅ－Ｓｅｒ－Ｔｈｒ－Ｌｙｓ－Ｇｌｎ　　Ｐｒｏ－Ｐｈｅ－Ｓｅｒ－Ａｓｎ－Ｐｒｏ　　Ｌｙｓ－Ｈｉｓ－Ｓｅｒ－Ｖａｌ－Ｌｅｕ　　Ｈｉｓ－Ｔｈｒ－Ａｌａ－Ｇｌｕ－Ｇｌｎ　　Ａｓｐ－Ｐｒｏ－Ｓｅｒ－Ｐｒｏ－Ｓｅｒ　　Ｌｅｕ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｔｈｒ。其提取方法，包括以下步骤：Ａ．收集破碎鸡肠道黏膜细胞，Ｂ．之后破碎小囊泡。Ｃ．５％乙酸搅拌浸提，离心，取上清，弃沉淀，上清液分装冻存，即为鸡肠道β－防御素粗提物。Ｄ．低温下将上清液上样于Ｓｅｐｈａｄｅｘ　　Ｇ－１００凝胶柱，用０．２ｍｏｌ／Ｌ乙酸钠洗脱，恒流泵的速度为３×１，经核酸蛋白检测仪检测后自动收集器收集，每管１．５ｍＬ，记录仪记录（速度为６ｃｍ／ｈ，量程２０ｍｖ）。Ｅ．通过琼脂糖弥散方法检测各收集管液体对巴氏杆菌的抗菌活性，收集有抑菌作用的洗脱液，真空冷冻干燥保存。Ｆ．有抑菌作用的洗脱液进行Ｔｒｉｃｉｎｅ－ＰＡＧＥ纯化，蛋白条带电转印至ＰＶＤＦ膜，采用Ｓａｎｇｅｒ水解逐段分析法做氨基酸序列分析。Ｇ．ＢＬＡＳＴ软件推导鸡肠道β防御素ｃＤＮＡ序列。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种鸡肠道β－防御素ｃＤＮＡ，其特征在于：具有如下序列，ＴＣＡＧＡＣＡＧＣＣ　　ＡＧＣＴＧＴＧＣＡＧ　　ＧＡＡＣＡＡＣＣＡＴ　　ＧＧＣＣＡＣＴＧＣＣ　　ＧＧＡＧＧＣＴＣＴＧ　　ＣＴＴＣＣＡＣＡＴＧ　　ＧＡＧＡＧＣＴＧＧＧ　　ＣＴＧＧＧＡＧＣＴＧ　　ＣＡＴＧＡＡＣＧＧＣ　　　　　ＣＧＣＣＴＧＣＧＣＴ　　ＧＣＴＧＣＡＧＧＴＴ　　ＣＴＣＣＡＣＣＡＡＧ　　ＣＡＧＣＣＣＴＴＴＴ　　ＣＣＡＡＣＣＣＴＡＡ　　ＡＣＡＴＴＣＡＧＴＧ　　ＣＴＧＣＡＣＡＣＡＧ　　　　ＣＡＧＡＧＣＡＧＧＡ　　ＣＣＣＴＴＣＣＣＣＡ　　ＡＧＣＣＴＴＧＧＡＧ　　ＧＧＡＣＧＴＧＡ。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：杨玉荣，姜义宝，梁宏德，王平利，焦喜兰，
申请(专利权)人：河南农业大学，
类型：发明
国别省市：41[中国|河南]