一种超氧化物歧化酶基因的食品级表达方法及其专用载体技术

一种超氧化物歧化酶基因的食品级表达方法，其特征在于包括如下步骤：首先，超氧化物歧化酶基因插入酿酒酵母表达载体的多克隆位点处后，构建含有超氧化物歧化酶基因的酿酒酵母表达载体，通过限制性内切酶ＮｃｏＩ和ＡｐａＬＩ双酶切该表达载体，完全去除Ａｍｐｉｃｉｌｌｉｎ↑［Ｒ］抗生素筛选标志，同时切去了ＵＲＡ３基因片段的部分片段；然后，将被酶切去除的ＵＲＡ３片段重新与含有超氧化物歧化酶基因的酿酒酵母表达载体连接，得到含有超氧化物歧化酶基因、ＧＡＬ１启动子和终止子序列、多克隆位点、ＵＲＡ３片段以及不含有Ａｍｐｉｃｉｌｌｉｎ↑［Ｒ］抗生素筛选标志的食品级酿酒酵母表达载体即食品级表达超氧化物歧化酶基因的专用载体；将改造好的酿酒酵母食品级表达载体导入酿酒酵母中，筛选获得重组酿酒酵母，诱导重组酿酒酵母使超氧化物歧化酶基因得到表达。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，特别涉及一种超氧化物歧化酶基因的食品级表 达方法及其专用载体。
技术介绍
超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,简称SOD)广泛存在于各类生物 体中，是机体内超氧阴离子自由基(02—)的天然消除剂，对机体细胞起保护 作用。因此，SOD在防御02—的毒性、抗衰老以及预防肿瘤和抗炎等方面起着 重要的生理作用，受到国内外医药日用化工、食品及生化界的极大关注。根据SOD所含金属辅基的不同， 一般可将其分为Cu, Zn-SOD、 Mn-SOD、 Fe-SOD三种类型。SOD在临床上有较广泛的应用，如用于骨关节炎、急肝与慢活肝的炎症反 应，SOD可去除由炎症反应产生的大量的超氧化自由基，对消退炎症，恢复 肝功能起到一定作用；用于治疗因超氧阴离子伤害引起的疾病，如心肌缺血与 缺血再灌注综合症、类风湿关节炎、放射性膀胱炎、红斑狼疮等(FattmanCL， Enghild JJ, Crapo JD， W a/. Purification and characterization of extracellular superoxide dismutase本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种超氧化物歧化酶基因的食品级表达方法，其特征在于包括如下步骤：首先，超氧化物歧化酶基因插入酿酒酵母表达载体的多克隆位点处后，构建含有超氧化物歧化酶基因的酿酒酵母表达载体，通过限制性内切酶ＮｃｏＩ和ＡｐａＬＩ双酶切该表达载体，完全去除Ａｍｐｉｃｉｌｌｉｎ↑［Ｒ］抗生素筛选标志，同时切去了ＵＲＡ３基因片段的部分片段；然后，将被酶切去除的ＵＲＡ３片段重新与含有超氧化物歧化酶基因的酿酒酵母表达载体连接，得到含有超氧化物歧化酶基因、ＧＡＬ１启动子和终止子序列、多克隆位点、ＵＲＡ３片段以及不含有Ａｍｐｉｃｉｌｌｉｎ↑［Ｒ］抗生素筛选标志的食品级酿酒酵母表达载体即食品级表达超氧化物歧化酶基因的专用载体；将...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：朱倩婷，赵士炜，黄晓峰，张文庆，
申请(专利权)人：中山大学，
类型：发明
国别省市：81