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纳米TiO2颗粒在促进神经干细胞增殖中的应用制造技术

技术编号:1710299 阅读:246 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术涉及纳米TiO2颗粒在促进神经干细胞增殖中的应用。纳米TiO2颗粒的加入通过Cx43去磷酸化而实现对细胞增殖作用,而蛋白质的总量没有发生改变。根据加入的TiO2溶液的浓度不同,其促进作用也有很大差别。当TiO2浓度为150ug/ml时,其促进作用最显著。同时,可以看到这种促进作用在细胞生长的第三天进入对数期达到最大,故并不影响细胞正常的生活周期。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及纳米Ti02颗粒在促进神经干细胞增殖中的应用。专利技术背景纳米材料被定义为至少在一维尺度上小于lOOnui的物质,由于其尺寸很小,结构 特殊,具有许多新的物理化学特性,如小尺寸效应、大的比表面积、高的反应活性、 量子效应等。这些具有独特物理化学性质的纳米材料,对人体健康以及环境将带来的 潜在影响,已经引起科学界和政府部门的高度关注。研究表明,纳米Ti02颗粒可以 进入到嗅球的外部嗅觉神经层、内部粒状细胞层、嗅觉脑室区,并进一步迁移至大脑 的皮质、海马和丘脑区,并对海马神经元细胞造成了一定的损伤。随着神经干细胞(neural stem cells, NSCs)在胚胎和成年神经组织中的发现以 及对NSCs生物学特性和培养、分化研究的不断深入,NSCs这种独特无限增值和分化 潜能的性质使得它被视为对神经损伤和神经系统退行性疾病治疗的一个最有效方法。C17.2神经干细胞系是来源于小鼠的性神经干细胞,其本身带有LacZ基因,其 表达的产物半乳糖苷酶的催化水解反应能把5-溴-4-氢-3-刚哚-e-D-半乳糖苷 (X-Gal )水解成蓝色的5-溴-4-氯-靛青。这为细胞移植后的免疫示踪和鉴定提供 了支持。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供纳米Ti02颗粒在促进神经干细胞增殖中的应用。Cx43为细胞间隙连接中的关键蛋白。纳米Ti02颗粒的加入通过Cx43去磷酸化而实现对细胞增殖作用,而蛋白质的总量没有发生改变。附图说明图1为不同浓度的纳米二氧化钛,不同培养时间对神经干细胞c17.2增殖的作 用。(means ± S. D. ; *p < 0. 05;林p 〈 0. 001; Significance was calculated by Twoiay A丽A)图2为C17. 2的Nestin荧光免疫组化图。图3为纳米Ti02对Cx43磷酸化的影响。其中A为Western-blot结果,Cx43 由磷酸化状态(2)变为去磷状态(3),蛋白总量一致。B中e-actin作为内参;1: Marker; 2:Contro1;3:Ti02。图4 Cx43的实时定量PCR。具体实施方式实施例一纳米Ti02促进神经干细胞珠C17. 2增殖 C17.2是一种神经干细胞珠,其具有细胞周期短,复制快等特点。将不同浓度梯度 的Ti02稀释液与C17. 2共培养1-5天,然后用MTT试剂盒去检测细胞增殖率,参见 图1,结果表明纳米Ti02对神经干细胞的增值有很强的促进作用。根据加入的Ti02 溶液的浓度不同,其促进作用也有很大差别。当Ti02浓度为150ug/ml时,其促进作 用最显著。同时,可以看到这种促进作用在细胞生长的第三天进入对数期达到最大, 故并不影响细胞正常的生活周期。采用荧光免疫组织化学的方法,用Nestin这个神经干细胞特异表达的蛋白对增殖 中的细胞进行标记,其荧光标记物为TRITC红色荧光蛋白。Nestin阳性细胞的数量 明显增多,证实纳米二氧化钛对神经干细胞增殖的促进作用,结果参见图2。实施例二蛋白质水平研究纳米Ti02对神经干细胞间信号转递方式 Cx43为细胞间隙连接中的关键蛋白。纳米Ti02颗粒加入通过Cx43去磷酸化而 实现对细胞增殖作用,参见图3A,而蛋白质的总量没有发生改变,参见图3B。以e-actin为内参,在纳米二氧化钛的作用下,在m脂A水平,考察Cx43的表达 量是否变化。结果参见图4。权利要求1. 纳米TiO2颗粒在促进神经干细胞增殖中的应用。全文摘要本专利技术涉及纳米TiO2颗粒在促进神经干细胞增殖中的应用。纳米TiO2颗粒的加入通过Cx43去磷酸化而实现对细胞增殖作用,而蛋白质的总量没有发生改变。根据加入的TiO2溶液的浓度不同,其促进作用也有很大差别。当TiO2浓度为150ug/ml时,其促进作用最显著。同时,可以看到这种促进作用在细胞生长的第三天进入对数期达到最大,故并不影响细胞正常的生活周期。文档编号C12N5/06GK101260382SQ20081003637公开日2008年9月10日 申请日期2008年4月21日 优先权日2008年4月21日专利技术者任秀芳, 刘元方, 吕森林, 吴明红, 文铁桥, 正 焦, 邓小勇 申请人:上海大学本文档来自技高网...

【技术保护点】
纳米TiO2颗粒在促进神经干细胞增殖中的应用。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:文铁桥任秀芳邓小勇吕森林焦正吴明红刘元方
申请(专利权)人:上海大学
类型:发明
国别省市:31[中国|上海]

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