单细胞RT‑PCR芯片及其制备方法技术

本发明专利技术提供的单细胞RT‑PCR芯片包括具有双套孔微阵列结构的基片；所述双套孔微列阵结构包括若干双套孔，该双套孔包括第一孔和位于第一孔内下方的第二孔；所述第二孔实现单细胞捕获，所述第一孔可以盛装反应液，作为RT‑PCR反应池。本发明专利技术提供的单细胞RT‑PCR芯片解决了传统单细胞微孔阵列中反应池体积小的问题，高效快捷地实现单细胞捕获与反应试剂进样；同时本发明专利技术芯片的结构简单、无需复杂的微流控液路，节省了成本，为单细胞RT‑PCR的产品化提供了最大的可能性。

【技术实现步骤摘要】
单细胞RT-PCR芯片及其制备方法
本专利技术属于单细胞研究领域，特别涉及一种采用单细胞PT-PCR芯片及其制备方法。
技术介绍
1985年，美国Cetus公司人类遗传研究室的科学家Kary.B.Mullis在迥然灵感的启迪下专利技术了具有划时代意义的聚合酶链式反应(PolymeraseChainReaction,PCR)，实现了在人体外无限扩增DNA片段的梦想。随后，Saiki首次应用PCR法成功地扩增出人的β-珠蛋白DNA，并应用于镰刀状红细胞贫血的产前诊断。PCR是体外酶促反应合成特异性DNA的一种方法，它利用人工合成引物介导的DNA聚合酶促反应，扩增位于两段已知序列之间的DNA片段。单细胞逆转录-聚合酶链式反应(ReverseTranscription-PolymeraseChainReaction，RT-PCR)，通过对单个细胞进行捕获、裂解、mRNA逆转录、目标基因片段PCR扩增以及结果检测分析，实现在基因水平上对细胞异质性的研究。通过对多个单细胞进行平行化的RT-PCR分析，可以对样品细胞群进行种类区分，此过程可运用于循环肿瘤细胞的检测、癌症预后监测等领域；高通量单细胞本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种单细胞RT‑PCR芯片，包括基片、盖片，以及位于基片和盖片之间的密封圈，其特征在于，所述基片上具有双套孔微阵列结构，该双套孔微阵列结构包括若干双套孔；所述双套孔包括第一孔以及由第一孔底部部分区域进一步向下开设的第二孔。

【技术特征摘要】
1.一种单细胞RT-PCR芯片，包括基片、盖片，以及位于基片和盖片之间的密封圈，其特征在于，所述基片上具有双套孔微阵列结构，该双套孔微阵列结构包括若干双套孔；所述双套孔包括第一孔以及由第一孔底部部分区域进一步向下开设的第二孔。2.根据权利要求1所述的单细胞RT-PCR芯片，其特征在于：所述第一孔的直径大于第二孔的直径；所述第二孔的直径和深度均大于细胞的直径且小于细胞直径的两倍，保证只允许单个细胞进入第二孔。3.根据权利要求1所述的单细胞RT-PCR芯片，其特征在于：每一双套孔中所述第二孔为一个或多个；所述第二孔为一个时，该第二孔由第一孔底部中心进一步向下开设；所述第二孔为多个时，该第二孔均匀地由第一孔底部向下开设。4.根据权利要求1所述的单细胞RT-PCR芯片，其特征在于：所述双套孔微阵列结构的阵列排布形式包括矩形、环形、镜像和密排；所述密封圈将所述双套孔微列阵围绕在内部，使盖片与基片之间形成密封空间。5.根据权利要求1所述的单细胞RT-PCR芯片，其特征在于：所述基片为无生物毒性的材料，所述无生物毒性的材料包括石英玻璃、硅片、二氧化硅片、光纤面板、有机薄片和医用不锈钢；所述盖片为透明材料，所述透明材料包括石英玻璃、二氧化硅片和透明的有机薄片。6.根据权利要求1～5中任一项所述的单细胞RT-PCR芯片，其特征在于，该芯片在工作状态时，所述第二孔捕捉单细胞；所述双套孔中充满反应试剂，作为RT-PCR反应池...

【专利技术属性】
技术研发人员：王琛瑜，俞育德，刘文文，杨翎，魏清泉，
申请(专利权)人：中国科学院半导体研究所，
类型：发明
国别省市：北京,11