角毛壳菌几丁质酶基因密码子偏爱性突变体基因及其制备方法和所用引物技术

角毛壳菌几丁质酶基因密码子偏爱性突变体基因及其制备方法和所用引物，它涉及一种几丁质酶基因密码子偏爱性突变体基因及其制备方法和所用引物。本发明专利技术解决了ｃｈｉ５８在巴斯德毕赤酵母中不能高效表达的问题。本发明专利技术密码子偏爱性突变体基因序列如ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２所示。本发明专利技术引物Ｐｎ１～Ｐｎ６的基因序列分别如ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：５、６、７、８、９和１０所示。本发明专利技术通过融合ＰＣＲ法获得密码子偏爱性突变体基因。本发明专利技术基因与真核表达载体ｐＰＩＣ９Ｋ连接构建重组表达载体，再经甲醇诱导后表达的蛋白质分子量为５８ｋＤ，等电点ｐＩ为４．４７，经测序检测氨基酸序列如ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３所示，证实为角毛壳菌几丁质酶，且几丁质酶的酶活性提高了约３倍。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
角毛壳菌几丁质酶基因密码子偏爱性突变体基因，其特征在于角毛壳菌几丁质酶基因密码子偏爱性改造突变体基因序列如下所示：　ＡＴＧＡＡＧＡＣＧＴＣＴＣＴＧＡＧＣＴＧＣＧＴＣＴＴＧＣＴＣＴＧＧＧＣＴＧＧＧＣＴＧＧＣＣＧＴＧＧＣＣＧＣＧＴＣＣＡＧＣＴＡＴＧＡＧＴＣＴＡＧＴＴＴＣＣＴＣＧＴＣＣＡＡＧＣＣＣＧＣＣＡＧＡＧＣＡＣＧＡＧＧＣＡＡＡＡＧＣＴＣＴＧＧＡＣＧＣＧＡＧＡＣＧＡＣＴＣＡＧＡＣＣＣＧＡＡＧＴＧＣＡＣＣＡＡＧＧＡＴＡＴＴＣＣＧＴＧＣＡＡＧＡＴＣＧＧＧＴＧＣＴＧＴＧＧＧＣＣＡＴＴＡＧＡＣＡＡＡＧＡＣＡＣＴＧＧＴＧＴＣＧＧＣＡＴＣＴＧＣＧＧＣＴＴＧＧＧＡＣＣＡＡＣＣＴＴＣＴＧＣＧＧＣＧＡＣＧＧＧＴＧ...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：杨谦，王艳君，
申请(专利权)人：哈尔滨工业大学，
类型：发明
国别省市：93[中国|哈尔滨]