一种特异性调节枯草芽孢杆菌外源基因表达的dcas9‑ω融合蛋白及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种特异性调节枯草芽孢杆菌外源基因表达的dcas9‑ω融合蛋白及其应用。dcas9‑ω融合蛋白的氨基酸序列如序列表中SEQ ID NO.1所示，该融合蛋白可被引导至特定靶向位点并与其结合，RNA聚合酶ω亚基在此位点招募RNA聚合酶其他亚基组装成RNA聚合酶，促进下游基因转录，从而提高靶基因的表达量，即融合蛋白dcas9‑ω保留dcas9的DNA结合能力与RNA聚合酶亚基的转录激活能力，从而特异性提高靶基因表达。

【技术实现步骤摘要】
一种特异性调节枯草芽孢杆菌外源基因表达的dcas9-ω融合蛋白及其应用
本专利技术属于基因工程
，具体而言，涉及一种表达dcas9与RNA聚合酶亚基的融合蛋白dcas9-ω，尤其涉及一种特异性调节枯草芽孢杆菌外源基因表达的dcas9-ω融合蛋白及其应用。
技术介绍
大肠杆菌表达系统是目前最常用的原核表达系统，然而，该表达系统仍存在一定的缺陷，比如外源蛋白容易形成包涵体，产内毒素等。近年来，枯草杆菌表达系统被越来越多的研究者用来表达目的蛋白。枯草芽孢杆菌具有很强的分泌能力，能将外源蛋白直接分泌到培养基中，不仅有效避免蛋白形成包涵体，且能够极大简化后续纯化步骤，降低生产成本。枯草芽孢杆菌不产脂多糖等内毒素，属于GRAS菌株，可用于生产食品、医药等相关蛋白及代谢产物。此外，目前已有很成熟的枯草芽孢杆菌遗传操作手段和大规模发酵技术。经过很多年的努力，许多原核和真核基因都已经在芽孢杆菌表达系统中得以克隆和表达，其中有的已应用于工业生产。然而，以枯草芽孢杆菌作为表达宿主表达的蛋白主要来源于芽孢属近缘种，其表达非芽孢属来源的蛋白表达能力较差，因此，如何提高外源蛋白在枯草芽孢杆菌中的表达量，是本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种特异性调节枯草芽孢杆菌外源基因表达的dcas9‑ω融合蛋白，其氨基酸序列如序列表中SEQ ID NO.1所示。

【技术特征摘要】
1.一种特异性调节枯草芽孢杆菌外源基因表达的dcas9-ω融合蛋白，其氨基酸序列如序列表中SEQIDNO.1所示。2.编码权利要求1所述dcas9-ω融合蛋白的DNA片段。3.根据权利要求2所述的DNA片段，其特征在于，其核苷酸序列如序列表中SEQIDNO.2所示。4.含有权利要求3所述核苷酸序列的重组表达载体。5.一种遗传工程化的宿主细胞，其特征在于，所述的细胞含有权利要求4所述的重组表达载体。6.根据权利要求5所述遗传工程化的宿主细胞，其特征在于，所述的细胞还含有靶向靶基因的载体，该载体含有P-RS-sgRNA元件，其中P为sgRNA的转录启动子，RS为IIs型限制性酶...

【专利技术属性】
技术研发人员：张桂敏，卢争辉，袁芯，彭文舫，石云云，蒋思婧，马延和，
申请(专利权)人：湖北大学，
类型：发明
国别省市：湖北,42