强抗寒白菜型冬油菜温敏雄性不育突变体的鉴定及筛选方法技术

本发明专利技术属于冬油菜育种技术领域，具体涉及一种强抗寒白菜型冬油菜温敏雄性不育突变体的鉴定与筛选方法。本发明专利技术在一套严格规范的栽培管理基础上，在不同生态区的特定生育期进行育性筛选与鉴定，利用特定设计的人工气候培养箱进行处理，所得的不育系雄性育性结果能准确反映测试不育系的育性特性。本发明专利技术为我国白菜型冬油菜温敏雄性不育突变体的鉴定与筛选方法提供了关键技术，具有操作简单，可靠性和工作效率高等优点。适用于不同白菜型冬油菜温敏雄性不育突变体的鉴定与筛选的技术体系。

Identification and screening of a thermosensitive male sterile mutant of strong cold resistant cabbage type Winter Rape

The invention belongs to the field of winter rape breeding technology, and specifically relates to a method for identification and screening of a thermosensitive male sterile mutant of strong cold resistant cabbage type winter rape. The present invention in a set of strict and standardized cultivation management based on fertility screening and identification of specific growth period in different ecological zones were processed by specific design of artificial climate incubator, the sterility of male sterility fertility characteristics of the results can accurately reflect the test of male sterile lines. The invention provides a key technology for the identification and screening methods of Chinese cabbage winter sensitive male sterility mutants, and has the advantages of simple operation, high reliability and high work efficiency. It is suitable for the identification and screening of different thermosensitive male sterile mutants of different cabbage type winter rapeseed.

【技术实现步骤摘要】
强抗寒白菜型冬油菜温敏雄性不育突变体的鉴定及筛选方法
本专利技术属于农作物育种领域，涉及一种强抗寒白菜型冬油菜温敏雄性不育突变体鉴定及筛选方法。
技术介绍
白菜型冬油菜在北方寒旱区农业生产中具有重要地位，它具有耐瘠、抗寒、早熟等特性，同时可增加北方冬春季植被覆度，生态意义十分重大。而白菜型冬油菜生产上主要应用品种为常规品种，产量潜力有限。选育杂交种、利用杂种优势是提高北方冬油菜产量的有效途径，而选育雄性不育系是选育杂交种、利用杂种优势的关键。目前油菜杂交种生产主要是利用细胞质雄性不育，涉及三系配套，三系的繁殖与制种程序繁琐，制种成本高。温敏型雄性不育使杂种优势由三系简化为二系，繁殖、制种不受恢保关系制约，育种程序简化，杂交组合配组自由，易获得强优势组合。生态不育(环境敏感型不育)是一种特殊的核不育系类型，其育性由外界环境条件调控，主要是光周期和温度。在一定的光温条件下表现为雄性不育，可用于生产杂交种；而在一定光温条件下育性转变为可育，进而繁育不育系。环境敏感型不育可使雄性不育杂交种由三系转变为两系，两系法杂交种的优势体现在：能够一系两用，避免冗长的杂交制种程序，杂交种子生产成本降低；不受“三系”制种程序中恢保关系的制约，容易扩大育种亲本的遗传多样性，容易找到恢保源，便于增加强优势组合筛选的成功率。本专利技术弥补传统温敏雄性不育筛选所需时间长，鉴定结果的准确性和鉴定效率低的问题，目前，白菜型冬油菜利用生态型筛选和鉴定温敏雄性不育突变体未见报道。
技术实现思路
为了解决
技术介绍
中存在的上述技术问题，本专利技术提供了一种直观、快速、准确的筛选及鉴定白菜型冬油菜温敏雄性不育突变体生态型的育性的白菜型冬油菜温敏雄性不育突变体鉴定及筛选方法。为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：一种强抗寒白菜型冬油菜温敏雄性不育突变体的鉴定及筛选方法，其特征在于：所述方法包括以下步骤：1)将强抗寒白菜型冬油菜种子秋播，正常越冬后的植株在返青后到初花期时，在日高温时段田间温度低于22℃时进行育性鉴定，所述育性鉴定的操作方式是拔掉不育株，留下可育株；2)将步骤1)获取得到的可育株的地上部分20-30cm留茬，剪除上面花枝部分，让其继续生长再开花，使生育期延后不小于20天，日高温时段田间温度不低于28℃的情况下进行育性鉴定，筛选并标记不育株，将筛选得到的不育株移栽到高海拔冷凉生态区；所述高海拔冷凉生态区的海拔不低于2200m；所述高海拔冷凉生态区的环境温度不高于22℃；若移栽至高海拔冷凉生态区的不育株转换为可育，则移栽至高海拔冷凉生态区的不育株为育性受生态因子变化影响的生态型不育株，同时对在高海拔冷凉可育生态区筛选得到的植株进行相互授粉或人工授粉得到后代；3)将步骤2)得到的后代进行盆栽育性鉴定：盆栽幼苗在四叶期4℃下进行30天的春化处理后，在开花前10天将其移入人工气候室；所述人工气候室的温度是28℃和22℃，在28℃和22℃下先后均处理7天，观察步骤2)所得后代的育性变化；若步骤2)所得后代在在28℃时全部表现为不育且在22℃时全部表现为可育，则通过步骤2)所确定得到的育性受生态因子变化影响的生态型不育株确定为生态型不育株。上述方法在步骤4)之后还包括：4)将步骤3)确定得到的生态型不育株相互授粉得到种子。本专利技术的优点是：本专利技术提供了一种强抗寒白菜型冬油菜温敏雄性不育突变体鉴定及筛选方法，是利用不同生态区来筛选和鉴定白菜型冬油菜温敏雄性不育突变体的一种方法，通过在自然群体中大量筛选，将发现的雄性不育材料在不同的温度环境条件下鉴定、筛选，在后代材料中筛选出稳定的温敏型雄性不育两用系，本专利技术使北方白菜型冬油菜利用两系法杂交制种来提高北方白菜型冬油菜产量成为可能，温敏型雄性不育恢复源广泛，组配杂交组合自由，更易获得强优势组合；结果为该温敏材料不育类型确定、制繁种适宜生态区域选择、恢复材料筛选、育性转育及新温敏材料的培育、亲本选择和组配等提供依据，具有直观、快速、准确的筛选及鉴定白菜型冬油菜温敏雄性不育突变体生态型的育性的优点。具体实施实例以下对本专利技术的原理和特征进行描述，所举实例只用于解释本专利技术，并非用于限定本专利技术的范围。本专利技术提供了一种强抗寒白菜型冬油菜温敏雄性不育突变体的鉴定及筛选方法，该方法包括以下步骤：1)将强抗寒白菜型冬油菜种子秋播，正常越冬后的植株在返青后到初花期时，在日高温时段田间温度低于22℃时进行育性鉴定，育性鉴定的操作方式是拔掉不育株，留下可育株；2)将步骤1)获取得到的可育株的地上部分20-30cm留茬，剪除上面花枝部分，让其继续生长再开花，使生育期延后不小于20天，日高温时段田间温度不低于28℃的情况下进行育性鉴定，筛选并标记不育株，将筛选得到的不育株移栽到高海拔冷凉生态区；高海拔冷凉生态区的海拔不低于2200m；高海拔冷凉生态区的环境温度不高于22℃；若移栽至高海拔冷凉生态区的不育株转换为可育，则移栽至高海拔冷凉生态区的不育株为育性受生态因子变化影响的生态型不育株，同时对在高海拔冷凉可育生态区筛选得到的植株进行相互授粉或人工授粉得到后代；3)将步骤2)得到的后代进行盆栽育性鉴定：盆栽幼苗在四叶期4℃下进行30天的春化处理后，在开花前10天将其移入人工气候室；人工气候室的温度是28℃和22℃，在28℃和22℃下先后均处理7天，观察步骤2)所得后代的育性变化；若步骤2)所得后代在28℃时全部表现为不育且在22℃时全部表现为可育，则通过步骤2)所确定得到的育性受生态因子变化影响的生态型不育株确定为生态型不育株；4)将步骤3)确定得到的生态型不育株相互授粉得到种子。实施例1：兰州-秦王川试验本专利技术实施例1：温敏型雄性不育系PK3-12S的选育1)将强抗寒白菜型冬油菜品系PK3-12(抗-28℃冬季极端低温)种子秋播正常越冬后的植株在次年返青后到初花期时，在日高温时段田间温度低于22℃时进行育性鉴定，育性鉴定的操作方式是拔掉不育株，留下可育株，得到50株材料；2)将步骤1)获取得到的可育株的地上部分20-30cm留茬，剪除上面花枝部分，让其继续生长再开花，生育期延20天后，在日高温时段田间温度不低于28℃的情况下进行育性鉴定，从50株植株中筛选出了20株不育株标记，并将不育株移栽到秦川高海拔冷凉生态区(兰州新区初花期温度≤22℃；海拔：2200m)；3)根据步骤2)移栽后进行育性鉴定：移栽的植株都表现为可育，故PK3-12疑似为育性受生态因子变化影响的生态型不育株，并将其进行剥蕾自交，获得自交种子。4)根据步骤3)将得到的后代进行盆栽育性鉴定。盆栽幼苗在四叶期4℃下进行30天的春化处理后，在开花前10天将其移入人工气候室；人工气候室的温度分别为28℃、22℃。每个温度7d处理，观察育性变化。5)通过观察发现，在28℃时，全部表现不育；而在22℃时，全部表现为可育。故选择出的植株一定为生态型不育型，命名为PK3-12S，并采用人工气候室控温法确定了PK3-12S育性转换温度区间22-28℃，即在蕾花期日最高温低于22℃时表现育性正常可育，当日最高温高于28℃时表现雄性不育。6)将步骤5)生态型不育株PK3-12S在22摄氏度可育条件下相互授粉得到种子。本专利技术首先在自然条件下发现温敏型雄性不育植株，该方法是在不同生态区鉴定本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种强抗寒白菜型冬油菜温敏雄性不育突变体的鉴定及筛选方法，其特征在于：所述方法包括以下步骤：1)将强抗寒白菜型冬油菜种子秋播，正常越冬后的植株在返青后到初花期时，在日高温时段田间温度低于22℃时进行育性鉴定，所述育性鉴定的操作方式是拔掉不育株，留下可育株；2)将步骤1)获取得到的可育株的地上部分20‑30cm留茬，剪除上面花枝部分，让其继续生长再开花，使生育期延后不小于20天，日高温时段田间温度不低于28℃的情况下进行育性鉴定，筛选并标记不育株，将筛选得到的不育株移栽到高海拔冷凉生态区；所述高海拔冷凉生态区的海拔不低于2200m；所述高海拔冷凉生态区的环境温度不高于22℃；若移栽至高海拔冷凉生态区的不育株转换为可育，则移栽至高海拔冷凉生态区的不育株为育性受生态因子变化影响的生态型不育株，同时在高海拔冷凉可育生态区对筛选得到的植株进行相互授粉或人工授粉得到后代；3)将步骤2)得到的后代进行盆栽育性鉴定：盆栽幼苗在四叶期4℃下进行30天的春化处理后，在开花前10天将其移入人工气候室；所述人工气候室的温度是28℃和22℃，在28℃和22℃下先后均处理7天，观察步骤2)所得后代的育性变化；若步骤2)所得后代在在28℃时全部表现为不育且在22℃时全部表现为可育，则通过步骤2)所确定得到的育性受生态因子变化影响的生态型不育株确定为生态型不育株。...

【技术特征摘要】
1.一种强抗寒白菜型冬油菜温敏雄性不育突变体的鉴定及筛选方法，其特征在于：所述方法包括以下步骤：1)将强抗寒白菜型冬油菜种子秋播，正常越冬后的植株在返青后到初花期时，在日高温时段田间温度低于22℃时进行育性鉴定，所述育性鉴定的操作方式是拔掉不育株，留下可育株；2)将步骤1)获取得到的可育株的地上部分20-30cm留茬，剪除上面花枝部分，让其继续生长再开花，使生育期延后不小于20天，日高温时段田间温度不低于28℃的情况下进行育性鉴定，筛选并标记不育株，将筛选得到的不育株移栽到高海拔冷凉生态区；所述高海拔冷凉生态区的海拔不低于2200m；所述高海拔冷凉生态区的环境温度不高于22℃；若移栽至高海拔冷凉生态区的不育株转换为可育，则移栽至高海拔冷凉生态区的不育株为育...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘自刚，董小云，孙万仓，米超，赵艳宁，武军艳，方彦，李学才，马骊，蒲媛媛，方园，白静，何辉立，许耀照，
申请(专利权)人：甘肃农业大学，
类型：发明
国别省市：甘肃,62