一种猪胞内劳森菌ELISA检测试剂盒制造技术
【技术实现步骤摘要】
一种猪胞内劳森菌ELISA检测试剂盒
本专利技术属于生物检测
，尤其涉及一种猪胞内劳森菌ELISA检测试剂盒。
技术介绍
：胞内劳森菌(Lawsoniaintracellularis，LI)是一种专性细胞内寄生细菌，主要寄生在猪肠黏膜上皮细胞内，引起猪的增生性肠炎。临床上导致发病猪食欲下降、拉稀和生长发育迟缓，给养猪业造成巨大的经济损失。猪增生性肠炎自1931年被报道以来，已经在世界主要养猪国家存在和流行。我国对胞内劳森菌感染的关注度并不高，有关该菌在我国猪群中的流行现状尚没有全面和明确的了解。造成这种现状的主要原因除了关注度不高之外，更主要的原因是由于检测方法的欠缺。血清学诊断无论是在了解疾病流行情况、抗体水平检测、评价疫苗免疫效果还是评价药物治疗效果等方面都发挥重要作用，血清学诊断是控制疾病流行的关键步骤。对于胞内劳森菌的血清学诊断，已有学者运用免疫过氧化物酶单层细胞测定(IPMA)和间接免疫荧光试验(IFAT)检测劳森菌的抗体，但这两种方法均需要荧光显微镜，对人员及设备的要求较高，而且试验结果判定的主观性较强。Boesen等采用培养的胞内劳森菌的脱氧胆...
【技术保护点】
一种猪胞内劳森菌ELISA检测试剂盒，其特征在于，所述猪胞内劳森菌ELISA检测试剂盒包括固相载体和包被在固相载体上的抗原，所述抗原为LsaA重组蛋白，所述LsaA重组蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
【技术特征摘要】
1.一种猪胞内劳森菌ELISA检测试剂盒，其特征在于，所述猪胞内劳森菌ELISA检测试剂盒包括固相载体和包被在固相载体上的抗原，所述抗原为LsaA重组蛋白，所述LsaA重组蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。2.根据权利要求1所述的猪胞内劳森菌ELISA检测试剂盒，其特征在于，所述LsaA重组蛋白是由具有SEQIDNo.2所示的核苷酸序列的基因编码。3.根据权利要求1所述的猪胞内劳森菌ELISA检测试剂盒，其特征在于，所述LsaA重组蛋白的制备方法为：合成opt-LsaA基因，将opt-LsaA基因克隆至pET-32a载体得到重组表达载体pET-32a-opt-LsaA；将重组表达载体pET-32a-opt-LsaA转化入宿主菌中，挑选出含有重组表达载体pET-32a-opt-LsaA的阳性克隆菌，对阳性克隆菌进行IPTG诱导表达；将表达产物通过Ni-NTA琼脂糖亲和层析柱纯化后，获得纯化的LsaA重组蛋白；其中，所述opt-LsaA基因的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示。4.根据权利要求...
【专利技术属性】
技术研发人员：赵军，王川庆，吴艳阳，高冬生，常洪涛，陈陆，李永涛，杨霞，王新卫，刘红英，
申请(专利权)人：河南农业大学，
类型：发明
国别省市：河南,41
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