本发明专利技术公开的一种尿液中肿瘤标志物5‑羟吲哚乙酸的检测试剂，组成该检测试剂的成分包括硫酸汞、硝酸亚汞、硝酸镍。还公开了制备方法，包括(1)A溶液的制备：称取硫酸汞溶于硫酸溶液中获得A溶液；(2)B溶液的制备：称取硝酸亚汞溶于硝酸溶液中获得B溶液；(3)C溶液的制备：称取硝酸镍溶于纯化水中获得C溶液；(4)将步骤(1)～(3)制备得到的A、B、C溶液混合，即得所述尿液中肿瘤标志物5‑羟吲哚乙酸检测试剂。本发明专利技术的优点，组成检测尿液中肿瘤标志物5‑羟吲哚乙酸试剂的成分成本低廉、引入的其它杂质少，检测结果准确，增强了检测试剂的灵敏度，打破温度对反应速度的限制，同时，制备方法简单易操作，易于规模化推广。
【技术实现步骤摘要】
一种尿液中肿瘤标志物5-羟吲哚乙酸的检测试剂及其制备方法
本专利技术属于生化检测
，具体为一种尿液中肿瘤标志物5-羟吲哚乙酸的检测试剂及其制备方法。
技术介绍
据2014年世界卫生组织报告指出：中国新增癌症病例居全球之首，新诊断癌症例数为307万，占全球总数的21.8％。癌症死亡人数约220万，占到全球癌症死亡人数的26.9％。在所有疾病中癌症的死亡率更是占据首位，是人类健康的第一杀手。肿瘤的发展分为5个阶段：良性、肿瘤细胞启动期、肿瘤早期、肿瘤中期、晚期。实际上，在肿瘤发展的前4个阶段早期发现、早期治疗，都是可以完全治愈的，在前三个阶段发现并治疗，治愈率可达100％。而癌症的可怕之处在于在前三个阶段，寻常的临床手段根本无法检测出来，即便是到了中晚期，也只有非常专业的医生通过较为先进的设备才能检测出。最新的技术为采用化学方法，例如公开号为CN104390975A专利公开的技术方案，对尿液中肿瘤的标志物5-羟吲哚乙酸进行检测，根据显色即可判断出是否患癌，但是，该技术存在反应速度慢的特点，尤其是在20℃以下需要水浴加热或者延长反应时间，并且该专利公开的检测化学物在尿液中5-羟吲哚乙酸浓度低时显色并不明显，所以，现有技术存在的缺陷为在肿瘤细胞前期，尿液中肿瘤标志物5-羟吲哚乙酸浓度低时不易检测，温度限制检测反应速度慢，并不能真正实现广谱性。
技术实现思路
为解决上述技术问题，本专利技术提供了一种尿液中肿瘤标志物5-羟吲哚乙酸的检测试剂及其制备方法，实现的目的为增强检测试剂的灵敏度，打破温度对反应速度的限制，对5-羟吲哚乙酸有较高的特异性，即使在肿瘤前期5-羟吲哚乙酸浓度低时也能够检测到，广谱性强。为了实现上述目的，本专利技术公开的技术方案为：本专利技术提供的一种尿液中肿瘤标志物5-羟吲哚乙酸的检测试剂，组成该检测试剂的成分包括硫酸汞、硝酸亚汞、硝酸镍。选择所述三种成份组成检测试剂，能够增强试剂的抗干扰性。进一步的，本专利技术组成该检测试剂的成分还包括1-亚硝基-2-萘酚。本试剂的1-亚硝基-2-萘酚可与5-羟吲哚乙酸偶联呈紫色，颜色的深浅与尿液中5-羟吲哚乙酸含量呈正比，在5-羟吲哚乙酸极低的浓度(30mg/L左右)下人眼即可分辨出来；现有技术中的试剂一般都是根据亚汞离子与5-羟吲哚乙酸生成红色来判定，当意识颜色变化时5-羟吲哚乙酸浓度已经为150mg/L以上，因此在5-羟吲哚乙酸150mg/L以下无法做出有效判定，所以，本专利技术的检索试剂具有更强的灵敏度，广谱性强。优选的，组成该检测试剂的各成份在检测试剂中的浓度分别为，硫酸汞0.15～0.39g/ml，硝酸亚汞0.05～0.31g/ml，硝酸镍7.9～64mg/ml。优选的，1-亚硝基-2-萘酚在检测试剂中的浓度为0.06～0.20g/ml。本专利技术还公开了制备上述检测试剂的方法，(1)A溶液的制备：称取硫酸汞溶于硫酸溶液中获得A溶液；(2)B溶液的制备：称取硝酸亚汞溶于硝酸溶液中获得B溶液；(3)C溶液的制备：称取硝酸镍溶于纯化水中获得C溶液；(4)将步骤(1)～(3)制备得到的A、B、C溶液混合，即得所述尿液中肿瘤标志物5-羟吲哚乙酸检测试剂。制备方法简单，简单混合即可得到检测试剂，成本低廉、易于规模化生产。优选的，所述步骤(1)中硫酸溶液的浓度为3mol/L；所述步骤(2)中硝酸溶液的浓度为4mol/L。优选的，所述步骤(4)中A、B、C溶液按照的1∶1.1～1.8∶0.3～0.7体积比混合。在此体积比下试剂的显色效果最好，成本低。进一步的，当组成检测试剂的成分还包括1-亚硝基-2-萘酚时，所述步骤(3)中还包括D溶液的制备：称取1-亚硝基-2-萘酚溶于质量浓度为5％的乙酸溶液中获得D溶液。优选的，所述步骤(4)中还包括将步骤(1)～(3)制备得到的A、B、C、D溶液按1∶1.1～1.8∶0.3～0.7∶1.1～1.5体积比混合，即得所述尿液中肿瘤标志物5-羟吲哚乙酸检测试剂。进一步的，所述步骤(1)中A溶液的浓度为0.15～0.39g/ml；所述步骤(2)B溶液的浓度为0.05～0.31g/ml；所述步骤(3)中C溶液的浓度为7.9～64mg/ml。进一步的，所述步骤(3)中D溶液的浓度为0.06～0.20g/ml。本专利技术的积极进步效果在于：本专利技术选择的组成检测尿液中肿瘤标志物5-羟吲哚乙酸试剂的成分成本低廉、引入的其它杂质少，检测结果准确，增强了检测试剂的灵敏度，打破温度对反应速度的限制，同时，制备方法简单易操作，易于规模化推广。具体实施方式下面通过具体的实施例对本专利技术做进一步的详细描述。实施例一：本专利技术提供的一种尿液中肿瘤标志物5-羟吲哚乙酸的检测试剂，其成分包括硫酸汞、硝酸亚汞、硝酸镍、1-亚硝基-2-萘酚，各成份在检测试剂的浓度为硫酸汞0.15g/ml、硝酸亚汞0.05g/ml、硝酸镍7.9mg/ml、1-亚硝基-2-萘酚0.06g/ml。制备上述检测试剂的方法，包括如下步骤，(1)A溶液的制备：称取硫酸汞溶于3mol/L的硫酸溶液中获得A溶液；(2)B溶液的制备：称取硝酸亚汞溶于4mol/L硝酸溶液中获得B溶液；(3)C溶液的制备：称取硝酸镍溶于纯化水中获得C溶液，称取1-亚硝基-2-萘酚溶于质量浓度为5％的乙酸溶液中获得D溶液；(4)将步骤(1)～(3)制备得到的A、B、C、D溶液混合，即得所述尿液中肿瘤标志物5-羟吲哚乙酸检测试剂。采用本专利技术得到的检测试剂在检测尿液中肿瘤标志物5-羟吲哚乙酸时，在肿瘤初期5-羟吲哚乙酸浓度极低也能够响应，且无温度影响，如下述试验内容。1.试验设计1.1检测试剂采用实施例1制备的检测试剂1.2尿液样本的选择a尿样样本应新鲜、洁净，并排除呈红色、绿色、灰绿色的尿液样本。b所用样本尿液含5-羟吲哚乙酸浓度应低于150mg/L。1.3试验方法将每份尿液样本平均分为两份，随机选取一份稀释5倍，同时加入检测试剂中检测结果如下：实施例二：本专利技术提供的一种尿液中肿瘤标志物5-羟吲哚乙酸的检测试剂，其成分包括硫酸汞、硝酸亚汞、硝酸镍、1-亚硝基-2-萘酚。各成份在检测试剂中的浓度分别为，硫酸汞0.39g/ml，硝酸亚汞0.31g/ml，硝酸镍64mg/ml、1-亚硝基-2-萘酚0.20g/ml。(1)A溶液的制备：称取硫酸汞溶于3mol/L的硫酸溶液中获得A溶液；(2)B溶液的制备：称取硝酸亚汞溶于4mol/L的硝酸溶液中获得B溶液；(3)C溶液的制备：称取硝酸镍溶于纯化水中获得C溶液，称取1-亚硝基-2-萘酚溶于质量浓度为5％的乙酸溶液中获得D溶液；(4)将步骤(1)～(3)制备得到的A、B、C、D溶液按照体积比1∶1.1∶0.3∶1.1混合，即得所述尿液中肿瘤标志物5-羟吲哚乙酸检测试剂。本专利技术所选择的A、B、C、D溶液体积比混合，使得显色速度快、显色稳定，使检测结果更为可靠，下述试验列举了在选择该体积比例时所进行的部分试验。A、B、C、D溶液体积比显色时间(min)显色稳定时间(min)1∶1.1∶0.3∶1.13101∶2∶1.5∶3651∶1.8∶0.7∶1.53.510.21∶1.5∶0.5∶1.33112∶3∶1.5∶27.553∶2.5∶1∶2.56.56由上表可以明确，本专利技术所选的体积比不仅显色速度快，显色本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种尿液中肿瘤标志物5‑羟吲哚乙酸的检测试剂，其特征在于，组成该检测试剂的成分包括硫酸汞、硝酸亚汞、硝酸镍。
【技术特征摘要】
1.一种尿液中肿瘤标志物5-羟吲哚乙酸的检测试剂，其特征在于，组成该检测试剂的成分包括硫酸汞、硝酸亚汞、硝酸镍。2.根据权利要求1所述的尿液中肿瘤标志物5-羟吲哚乙酸的检测试剂，其特征在于，组成该检测试剂的成分还包括1-亚硝基-2-萘酚。3.根据权利要求1所述的尿液中肿瘤标志物5-羟吲哚乙酸的检测试剂，其特征在于，组成该检测试剂的各成份在检测试剂中的浓度分别为，硫酸汞0.15～0.39g/ml，硝酸亚汞0.05～0.31g/ml，硝酸镍7.9～64mg/ml。4.根据权利要求2所述的尿液中肿瘤标志物5-羟吲哚乙酸的检测试剂，其特征在于，1-亚硝基-2-萘酚在检测试剂中的浓度为0.06～0.20g/ml。5.一种制备权利要求1-4任一项所述尿液中肿瘤标志物5-羟吲哚乙酸的检测试剂的方法，其特征在于，该方法包括如下步骤，(1)A溶液的制备：称取硫酸汞溶于硫酸溶液中获得A溶液；(2)B溶液的制备：称取硝酸亚汞溶于硝酸溶液中获得B溶液；(3)C溶液的制备：称取硝酸镍溶于纯化水中获得C溶液；(4)将步骤(1)～(3)制备得到的A、B、C溶液混合，即得所述尿液中肿瘤标志物5-羟吲哚乙酸检测试剂。6.根据权利要求5所述的制备尿液中肿瘤标志物5-羟吲哚乙酸的检测试剂的方法，其特征在于，所述步骤(1)中硫酸溶液的浓度为3mol/L。7.根据权利要求5所述的制备尿液中肿瘤标志物5...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘东，
申请(专利权)人：刘东，
类型：发明
国别省市：江苏,32
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