一种提高玉米秸秆水解液培养油脂酵母产油量的方法技术

一种提高玉米秸秆水解液培养油脂酵母产油量的方法，属于微生物应用技术领域。本发明专利技术的目的是将细菌纤维素固定化后的油脂酵母投入到玉米秸秆水解液中，水解液对油脂酵母的毒性和抑制性减弱，提高油脂酵母微生物油脂产量的提高玉米秸秆水解液培养油脂酵母产油量的方法。本发明专利技术步骤是：细菌纤维素的制备、细菌纤维素固定化弯曲隐球酵母的制备、玉米秸秆水解液的制备、细菌纤维素固定化弯曲隐球酵母在玉米秸秆水解液中的培养。本发明专利技术为玉米秸秆的稳定利用提供了技术支持，可以达到经济效益和环境效益的双赢。

A method to improve the oil production of corn straw hydrolysate

【技术实现步骤摘要】
一种提高玉米秸秆水解液培养油脂酵母产油量的方法
本专利技术属于微生物应用

技术介绍
中国每年仅玉米等农作物秸秆就有7亿多吨，就地焚烧不仅浪费资源，还导致严重的环境污染。玉米秸秆的主要成分是纤维素、半纤维素和木质素，纤维素和半纤维素经过水解可以转化为微生物可利用的单糖或寡糖。油脂酵母可以利用玉米秸秆水解液中的单糖等营养物质进行油脂生产，得到微生物油脂，这为能源与环境的可持续发展提供了新的发展空间。但由于玉米秸秆中纤维素和半纤维素的结构复杂，导致玉米秸秆水解液中除了微生物可利用的糖类外，还有对微生物生长和产油脂有较大影响的具有毒性的抑制剂的存在，影响微生物油脂的产量。有报道显示，固定化酵母细胞可以提高预获得的产物量，但油脂酵母产生的微生物油脂属于酵母细胞的胞内产物，如果采用一般的固定化材料会影响后续产油酵母胞内微生物油脂的提取与获得，并且普通的固定化材料不具备抵抗玉米水解液中有毒抑制剂的作用。
技术实现思路
本专利技术的目的是将细菌纤维素固定化后的油脂酵母投入到玉米秸秆水解液中，水解液对油脂酵母的毒性和抑制性减弱，提高油脂酵母微生物油脂产量的提高玉米秸秆水解液培养油脂酵母产油量的方本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种提高玉米秸秆水解液培养油脂酵母产油量的方法，其特征在于：其步骤是：（1）细菌纤维素的制备：Ａ．木醋杆菌冻干菌体的恢复培养：在无菌条件下，用浸在体积分数为90%（v/v）酒精中的脱脂棉擦净安瓿瓶，用酒精灯外焰将安瓿瓶顶端加热，然后滴无菌水至加热的安瓿瓶顶端，使安瓿瓶瓶口玻璃开裂，用镊子敲下已开裂的安瓿瓶的顶端；向保存在安瓿瓶内编号为CGMCC NO：1.1812的木醋杆菌

【技术特征摘要】
1.一种提高玉米秸秆水解液培养油脂酵母产油量的方法，其特征在于：其步骤是：（1）细菌纤维素的制备：Ａ．木醋杆菌冻干菌体的恢复培养：在无菌条件下，用浸在体积分数为90%（v/v）酒精中的脱脂棉擦净安瓿瓶，用酒精灯外焰将安瓿瓶顶端加热，然后滴无菌水至加热的安瓿瓶顶端，使安瓿瓶瓶口玻璃开裂，用镊子敲下已开裂的安瓿瓶的顶端；向保存在安瓿瓶内编号为CGMCCNO：1.1812的木醋杆菌Gluconacetobacterxylinum的冻干菌体，滴入0.6mL的木醋杆菌富集培养基，轻轻振荡，得到木醋杆菌冻干菌体悬浮液；上述所述的木醋杆菌富集培养基成分重量份组成分别为：葡萄糖60.0，蛋白胨15.0，柠檬酸1.0，Na2HPO4·12H2O0.8，KH2PO42.5，MgSO4·7H2O0.5，去离子水1L，pH7.0；吸取100uL上述木醋杆菌冻干菌体悬浮液，用涂布棒均匀涂布于木醋杆菌固体培养基上，所述的木醋杆菌固体培养基重量份组成成分分别为：葡萄糖60.0，蛋白胨15.0，柠檬酸1.0，Na2HPO4·12H2O0.8，KH2PO42.5，MgSO4·7H2O0.5，琼脂20.0，去离子水1L，pH7.0；将上述涂有木醋杆菌的固体培养基在28℃恒温电热培养箱中培养48h，得到恢复培养好的木醋杆菌，保存于4℃的冰箱中，备用；B．木醋杆菌种子液的制备：将上述步骤A得到的恢复培养好的木醋杆菌，用接种环挑取一环菌种，转接到装有100mL木醋杆菌种子培养基的500mL锥形瓶中，上述木醋杆菌种子培养基重量份组成成分分别为：葡萄糖30.0，蛋白胨5.0，柠檬酸3.0，Na2HPO4·12H2O3.0，MgSO4·7H2O0.20，去离子水1L，pH7.0；在28℃，180r/min的恒温振荡器中振荡36h，得到木醋杆菌种子液；C．细菌纤维素的制备：将上述步骤B得到的木醋杆菌种子液以体积比10%（v/v）的接种量，接入到装有100mL木醋杆菌发酵培养基的方形容器中，方形容器的尺寸为：底面边长8cm×8cm，高度为8cm，上述所述木醋杆菌发酵培养基重量份组成成分分别为：葡萄糖100.0，蛋白胨20.0，柠檬酸3.0，Na2HPO4·12H2O2.5，KH2PO43.5，MgSO4·7H2O0.5，去离子水1L，pH7.0；然后将方形容器静置于28℃恒温电热培养箱中培养6天，在木醋杆菌发酵培养基表面得到细菌纤维素；D．细菌纤维素的提取和处理：用镊子将上述步骤C得到的细菌纤维素取出，并用去离子水冲洗3次后，浸入100mL浓度为0.05mol/L的NaOH溶液中，60℃水浴120min，除去细菌纤维素表面残存的菌体和培养基，然后用去离子水反复冲洗至中性，将细菌纤维素裁剪成4cm×4cm的小块，在灭菌锅中于121℃条件下灭菌15min后，放入4℃冰箱保存，备用；（2）细菌纤维素固定化弯曲隐球酵母的制备A．弯曲隐球酵母种子液的制备：将保存在斜面上的菌株编号为ATCC20509的弯曲隐球酵母Cryptococcusc...

【专利技术属性】
技术研发人员：乔楠，樊雪，于大禹，宋煜，张晓君，王磊，
申请(专利权)人：东北电力大学，
类型：发明
国别省市：吉林,22