可诱导型siRNA表达载体及其制备和应用制造技术

本发明专利技术公开了一种新型shRNA及其制备方法和应用。所述shRNA从5′端到3′端依次为：(a)5′端旁侧序列区；(b)5′端配对siRNA区域；(c)顶端环区域；(d)3′端配对siRNA区域，并且所述5′端配对siRNA区域与3′端配对siRNA区域形成双链区域；(e)3′端旁侧序列区；所述shRNA产生siRNA，且所述siRNA的核苷酸序列对应于所述3′端配对siRNA区域或5′端配对siRNA区域。本发明专利技术还提供了包含所述的shRNA的表达盒、构建物、慢病毒载体和细胞。

Inducible siRNA expression vector and its preparation and Application

The invention discloses a new type of shRNA and a preparation method and application. The shRNA from the 5 'end to 3' end is as follows: (a) 5 'flanking sequence region; (b) the 5' end of the paired siRNA region; (c) the top ring region; (d) the 3 'end of the paired siRNA region, and the 5' end and 3 'end region matching siRNA paired siRNA region to form a double stranded region; (E) 3' flanking sequence region; the shRNA siRNA, and the nucleotide sequence corresponding to the siRNA in the 3 'end of the paired siRNA region or the 5' end of the paired siRNA region. The invention also provides an expression box containing the shRNA, a construct, a lentivirus carrier and a cell.

【技术实现步骤摘要】
可诱导型siRNA表达载体及其制备和应用
本专利技术涉及生物
，更具体地涉及可诱导型siRNA表达载体及其制备和应用。
技术介绍
RNA干扰(RNAinterference,RNAi)是真核生物中由双链小RNA分子(smallinterferingRNA，siRNA)介导的RNA降解现象。RNAi最初在秀丽线虫中被发现，此后在果蝇、拟南芥、斑马鱼和哺乳动物等多种真核生物中发现RNAi都是高度保守的。由于RNAi可以被用来特异性关闭靶基因的表达，具有极大的应用价值。因此，自1998年被发现以来，RNAi多次入选Science杂志评出的年度十大科学进展，并名列2002年十大科学进展之首。2006年，CraigMello和AndrewFire因发现RNAi现象而被授予诺贝尔生理医学奖。目前大量生物技术公司和国际大制药企业投资进入RNAi技术开发和应用领域，其中针对呼吸道合胞体病毒感染(Respiratorysyncytialvirusinfection)以及湿性年龄相关性黄斑变性病症(Wetage-relatedmaculardegeneration)等几种疾病的RNAi治疗已进入二本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种短发夹RNA(shRNA)序列，其特征在于，所述shRNA序列为核苷酸序列，并且从5′端到3′端依次具有以下区域：(a)5′端旁侧序列区，所述5′端旁侧序列区长度大于或等于17nt；(b)5′端配对siRNA区域，所述5′端配对siRNA区域长度大于或等于19nt；(c)顶端环区域，所述顶端环区域的序列如SEQ ID NO.:1所示；(d)3′端配对siRNA区域，所述3′端配对siRNA区域长度大于或等于19nt，并且所述5′端配对siRNA区域与3′端配对siRNA区域形成双链siRNA区域，所述双链区域长度大于或等于19bp；(e)3′端旁侧序列区，所述3′端旁侧序列区长度大于或等于...

【技术特征摘要】
1.一种短发夹RNA(shRNA)序列，其特征在于，所述shRNA序列为核苷酸序列，并且从5′端到3′端依次具有以下区域：(a)5′端旁侧序列区，所述5′端旁侧序列区长度大于或等于17nt；(b)5′端配对siRNA区域，所述5′端配对siRNA区域长度大于或等于19nt；(c)顶端环区域，所述顶端环区域的序列如SEQIDNO.:1所示；(d)3′端配对siRNA区域，所述3′端配对siRNA区域长度大于或等于19nt，并且所述5′端配对siRNA区域与3′端配对siRNA区域形成双链siRNA区域，所述双链区域长度大于或等于19bp；(e)3′端旁侧序列区，所述3′端旁侧序列区长度大于或等于17nt；其中，所述shRNA序列产生siRNA，且所述siRNA的核苷酸序列对应于所述3′端配对siRNA区域或5′端配对siRNA区域。2.如权利要求1所述的shRNA序列，其特征在于，所述5′端配对siRNA区域长度为19-28nt，更佳地为20-25nt。3.如权利要求1所述的shRNA序列，其特征在于，所述3′端配对siRNA区域长度为19-28nt，更佳地为20-25nt。4.如权利要求1所述的shRNA序列，其特征在于，所述的5′端旁侧序列区含有限制性内切酶识别序列，较佳地，所述的3′端旁侧序列区...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴立刚，尚仁福，
申请(专利权)人：中国科学院上海生命科学研究院，
类型：发明
国别省市：上海,31