具有抗幽门螺旋杆菌活性的抗菌肽以及包含该抗菌肽的融合蛋白制造技术

本发明专利技术提供了一种具有抗幽门螺旋杆菌活性的抗菌肽以及包含该抗菌肽的融合蛋白，属于制药领域。该抗菌肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。该融合蛋白具有以下一级氨基酸序列结构：载体蛋白‑连接肽‑抗菌肽；其中，抗菌肽具有SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列。这种抗菌肽具有抗幽门螺旋杆菌活性，且在胃环境中具有较强的稳定性和抗菌活性，其通过物理作用造成细胞膜的穿孔而达到抗幽门螺旋杆菌的效果，在使用过程中不容易使幽门螺旋杆菌产生耐药性。

Antibacterial peptides with anti Helicobacter pylori activity and fusion protein containing the antibacterial peptide

The invention provides an antibacterial peptide with the activity of anti Helicobacter pylori and a fusion protein containing the antibacterial peptide, which belongs to the pharmaceutical field. The amino acid sequence of the peptides are shown in SEQ ID NO:1. The fusion protein has the following structure: the primary amino acid sequence of carrier protein connecting peptide antimicrobial peptides; the antibacterial peptide has the amino acid sequence of SEQ ID NO:1 shown. The antibacterial peptide has anti Helicobacter pylori activity, and has strong antibacterial activity and stability in the gastric environment, the effect of perforation through physical interaction caused by the cell membrane to anti Helicobacter pylori, in the use of the process is not easy to produce drug resistance of Helicobacter pylori.

【技术实现步骤摘要】
具有抗幽门螺旋杆菌活性的抗菌肽以及包含该抗菌肽的融合蛋白
本专利技术涉及制药领域，具体而言，涉及一种具有抗幽门螺旋杆菌活性的抗菌肽以及包含该抗菌肽的融合蛋白。
技术介绍
幽门螺旋杆菌是上世纪80年代由澳大利亚两位科学家发现并于2005年获得诺贝尔生理学奖。目前，世界上有50％以上的人口感染有这种病原菌，其中20％的感染者将会引起慢性胃炎、消化性和十二指肠溃疡、胃癌和粘膜相关淋巴组织瘤的临床症状。世界卫生组织已把它列为Ⅰ类致癌原。在发展中国家更加广泛流行，我国有些地区人口感染率高达60％以上。抗生素是治疗幽门螺旋杆菌感染的有效方法，但幽门螺旋杆菌对多种抗生素产生耐药性，甚至同一感染病人对7种抗生素抵抗。目前，对有这种明显疾病症状个体治疗方法主要是用一种质子泵结合二种或三种抗生素的联合疗法，其有80％的根除率和随后的临床症状的改善，已经成为标准的治疗方法。但是，随着抗生素耐药菌株的增加、重新感染、并发症和高治疗费用及治疗依从性差等因素限制了抗生素对幽门螺旋杆菌感染的根治，其中最主要的原因就是细菌的耐药性。鉴于此，目前急需对幽门螺旋杆菌感染疾病，提出一种不依赖于抗生素的治疗方案。
技术实现思路
本专利技术的第一目的在于提供一种具有抗幽门螺旋杆菌活性的抗菌肽以及包含该抗菌肽的融合蛋白。这种抗菌肽具有抗幽门螺旋杆菌活性，且在胃环境中具有较强的稳定性和抗菌活性，其通过物理作用造成细胞膜的穿孔而达到抗幽门螺旋杆菌的效果，在使用过程中不容易使幽门螺旋杆菌产生耐药性。本专利技术的第二目的在于提供一种上述抗菌肽以及融合蛋白在制备治疗幽门螺旋杆菌病的药物中应用，由于该抗菌肽在胃环境中不会被胃蛋白酶破坏，且在胃酸环境下依然能保持较强的抗菌活性，可作为活性成分用于制备治疗幽门螺旋杆菌病的药物。本专利技术的第三目的在于提供一种用于编码上述抗菌肽的基因、以及用于编码上述融合蛋白的基因。本专利技术的第四目的在于提供一种编码抗菌肽的基因以及编码融合蛋白的基因在制备治疗幽门螺旋杆菌病的药物中的应用。本专利技术的第五目的在于提供一种具有抗幽门螺旋杆菌活性的抗菌肽的制备方法，该方法采用基因工程方法表达包含有抗菌肽的融合蛋白，从而降低抗菌肽的等电点，使其达到高水平的表达，降低生产成本。本专利技术的第六目的在于提供一种具有抗幽门螺旋杆菌活性的蚕血淋巴及其制备方法和用途。这种蚕血淋巴中同时含有融合蛋白和肠激酶，该融合蛋白经肠激酶的特异性酶切后，获得具有天然结构的抗菌肽，因此，该蚕血淋巴具有了抗幽门螺旋杆菌的活性、且该蚕血淋巴可以直接口服或冷冻干燥就可用于治疗幽门螺旋杆菌感染，极大的降低抗菌肽的生产成本。为了实现本专利技术的上述目的，特采用以下技术方案：第一方面，本专利技术提供一种具有抗幽门螺旋杆菌活性的抗菌肽、融合蛋白，具体为：一种具有抗幽门螺旋杆菌活性的抗菌肽，抗菌肽的氨基酸序列为(1)或(2)：(1)SEQIDNO:1所示的序列；(2)由SEQIDNO:1所示的序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的且与SEQIDNO:1具有相同的生物活性的衍生序列。一种具有抗幽门螺旋杆菌活性的抗菌肽，抗菌肽的氨基酸序列为(1)或(2)：(1)SEQIDNO:1所示的序列；(2)由SEQIDNO:1所示的序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的且与SEQIDNO:1具有相同的生物活性的衍生序列。一种包含有上述抗菌肽的融合蛋白，融合蛋白具有以下一级氨基酸序列结构：载体蛋白-连接肽-蛋白酶作用位点肽段-抗菌肽；抗菌肽具有SEQIDNO:1所示的氨基酸序列。进一步地，上述载体蛋白包括家蚕杆状病毒核多角体蛋白、谷胱甘肽巯基转移酶、绿色荧光蛋白、或泛素样小蛋白。进一步地，上述家蚕杆状病毒核多角体蛋白的氨基酸序列为SEQIDNO:2。进一步地，上述连接肽包括(GGGGS)n,其中n＝1～4。进一步地，上述蛋白酶作用位点肽段为特异性蛋白内切酶的作用位点，特异性蛋白内切酶包括肠激酶、凝血酶、凝血因子Xa、PreScission蛋白酶、烟草花叶病毒蛋白酶、人鼻病毒蛋白酶、泛素样小蛋白酶。进一步地，上述蛋白酶作用位点肽段包括LVPRGS、IEGR、IDGR、LEVLFQ、ENLYFQG、LEVLFQG或泛素样蛋白三级结构。进一步地，上述蛋白酶作用位点肽段为DDDDK，DDDDK为肠激酶的作用位点。进一步地，上述肠激酶为牛肠激酶，牛肠激酶的氨基酸序列为SEQIDNO:3。进一步地，上述融合蛋白的氨基酸序列为SEQIDNO:4。第二方面，本专利技术提供一种抗菌肽、融合蛋白在制备治疗幽门螺旋杆菌病的药物中的应用，具体为：一种抗菌肽在制备治疗幽门螺旋杆菌病的药物中的应用，抗菌肽的氨基酸序列如SEQIDNO:1所示。一种用于治疗幽门螺旋杆菌的药物或保健品，其包括如SEQIDNO:1所示的抗菌肽、以及医药学上可接受的载体或辅料。一种融合蛋白在制备治疗幽门螺旋杆菌病的药物中的应用，融合蛋白具有以下一级氨基酸序列结构：载体蛋白-连接肽-蛋白酶作用位点肽段-抗菌肽；抗菌肽具有SEQIDNO:1所示的氨基酸序列。进一步地，上述载体蛋白包括家蚕杆状病毒核多角体蛋白、谷胱甘肽巯基转移酶、绿色荧光蛋白、或泛素样小蛋白。进一步地，上述蛋白酶作用位点肽段为特异性蛋白内切酶的作用位点，特异性蛋白内切酶包括肠激酶、凝血酶、凝血因子Xa、PreScission蛋白酶、烟草花叶病毒蛋白酶、人鼻病毒蛋白酶、泛素样小蛋白酶。进一步地，上述蛋白酶作用位点肽段包括DDDDK、LVPRGS、IEGR、IDGR、LEVLFQ、ENLYFQG、LEVLFQG或泛素样蛋白三级结构。进一步地，上述融合蛋白的氨基酸序列为SEQIDNO:4。进一步地，上述幽门螺旋杆菌病包括由幽门螺旋杆菌感染引起的胃炎、消化道溃疡、淋巴增生性胃淋巴瘤、胃癌。一种用于治疗幽门螺旋杆菌的药物或保健品，其包括融合蛋白、以及医药学上可接受的载体或辅料，融合蛋白具有以下一级氨基酸序列结构：载体蛋白-连接肽-蛋白酶作用位点肽段-抗菌肽；抗菌肽具有SEQIDNO:1所示的氨基酸序列。进一步地，还包括肠激酶，融合蛋白的氨基酸序列为SEQIDNO:4。第三方面，本专利技术提供一种用于编码具有抗幽门螺旋杆菌活性的抗菌肽的基因、融合蛋白的基因，具体为：一种用于编码具有抗幽门螺旋杆菌活性的抗菌肽的基因，抗菌肽的氨基酸序列如SEQIDNO:1所示。一种用于编码包含上述抗菌肽的融合蛋白的基因，融合蛋白具有以下一级氨基酸序列结构：载体蛋白-连接肽-蛋白酶作用位点肽段-抗菌肽；抗菌肽具有SEQIDNO:1所示的氨基酸序列。进一步地，上述载体蛋白包括家蚕杆状病毒核多角体蛋白、谷胱甘肽巯基转移酶、绿色荧光蛋白、或泛素样小蛋白。进一步地，上述蛋白酶作用位点肽段为特异性蛋白内切酶的作用位点，特异性蛋白内切酶包括肠激酶、凝血酶、凝血因子Xa、PreScission蛋白酶、烟草花叶病毒蛋白酶、人鼻病毒蛋白酶、泛素样小蛋白酶。进一步地，上述蛋白酶作用位点肽段包括DDDDK、LVPRGS、IEGR、IDGR、LEVLFQ、ENLYFQG、LEVLFQG或泛素样蛋白三级结构。进一步地，上述融合蛋白的氨基酸序列为SEQIDNO:4。一种包含上述基因的重组载体。一种包含上述重组载体的宿主细胞。进一步地本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种具有抗幽门螺旋杆菌活性的抗菌肽，其特征在于，所述抗菌肽的氨基酸序列为(1)或(2)：(1)SEQ ID NO:1所示的序列；(2)由SEQ ID NO:1所示的序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的且与SEQ ID NO:1具有相同的生物活性的衍生序列。

【技术特征摘要】
1.一种具有抗幽门螺旋杆菌活性的抗菌肽，其特征在于，所述抗菌肽的氨基酸序列为(1)或(2)：(1)SEQIDNO:1所示的序列；(2)由SEQIDNO:1所示的序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的且与SEQIDNO:1具有相同的生物活性的衍生序列。2.一种包含有如权利要求1所述的抗菌肽的融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白具有以下一级氨基酸序列结构：载体蛋白-连接肽-蛋白酶作用位点肽段-抗菌肽；所述抗菌肽具有SEQIDNO:1所示的氨基酸序列。3.根据权利要求2所述的融合蛋白，其特征在于，所述载体蛋白包括家蚕杆状病毒核多角体蛋白、谷胱甘肽巯基转移酶、绿色荧光蛋白、或泛素样小蛋白。4.根据权利要求3所述的融合蛋白，其特征在于，所述家蚕杆状病毒核多角体蛋白的氨基酸序列为SEQIDNO:2。5.根据权利要求2所述的融合蛋白，其特征在于，所述连接...

【专利技术属性】
技术研发人员：张孝林，汪建飞，蒋安民，贡成良，范涛，张钦元，
申请(专利权)人：安徽科技学院，
类型：发明
国别省市：安徽,34