一种菌根真菌子实体及其在抗肿瘤中的应用制造技术

本发明专利技术公开一种菌根真菌子实体在制备抗肿瘤药物中的应用，所述菌根真菌子实体为紫褶口蘑，所述紫褶口蘑为真菌界担子菌门伞菌纲伞菌目口蘑科紫褶口蘑属。本发明专利技术所述菌根真菌子实体，可通过组织分离法得到纯培养菌种，然后将菌种的菌丝体进行发酵得到发酵液，最后对发酵液进行提取得到提取物，经过试验，所得提取物具有显著的抑制肿瘤细胞作用，因此，本发明专利技术为肿瘤的治疗提供了新的选择。

Application of a true fungus and mycorrhizal in anti-tumor

The invention discloses a mycorrhizal fungus's application in preparing antitumor drugs, the fruiting body is really mycorrhizal the purple purple pleated mushroom, mushroom fungi Basidiomycota fold for basidiomycetes Agaricales tricholomaceae purple fold tricholoma. The mycorrhizal fruiting body can be true, pure culture by tissue isolation method, and then the mycelium strains were fermented to produce fermented liquid, at the end of the fermentation broth was extracted from extract, through the test, the extract has obvious effect of inhibiting tumor cell, therefore, the invention provides a new choice for tumor the treatment.

【技术实现步骤摘要】
一种菌根真菌子实体及其在抗肿瘤中的应用
本专利技术涉及一种真菌及其应用，尤其是一种自真菌界(Fungi)担子菌门(Basidiomycota)伞菌纲(Agaricomycetes)伞菌目(Agaricales)口蘑科(Tricholomataceae)紫褶口蘑属的紫褶口蘑及其在抗肿瘤中的应用。
技术介绍
恶性肿瘤是一类严重危害人类健康和生命的疾病，在所有死亡原因中已经超过心脑血管疾病、成为排名第一的死亡原因。随着自然生态的失衡和环境污染的加剧，恶性肿瘤的发病率和死亡率在世界范围内呈现着上升趋势。大型真菌代谢产物含有丰富的活性物质，如具有抗肿瘤功效的真菌多糖、甾醇类、核苷类、萜类化合物、真菌蛋白等，现有报道具有抗肿瘤活性的大型真菌有香菇(Lentinusedodes)、灵芝(Ganodermaspp)、茯苓(Poriacocos)、金针菇(Flammulinavelutipes)、黑木耳(Auriculariaauricular)、鸡油菌(Cantharellusspp)、珊瑚菌(Clavariaspp)、齿菌(Hydnumspp)、香蘑(Lepistanuda)、松茸(Tricholomamatsutake)、双孢蘑菇(Agaricusbisporus)、墨汁鬼伞(Coprinusatramentarius)、滑菇(Pholiotanameko)、栓菌(Tremellaspp)、灰树花(Grifolafrondosa)、桦褐孔菌(Inonotusobliquus)等多孔菌，这些大型真菌子实体或发酵液的提取物所具有的活性成分，已经开始被开发，特别是香菇多糖、灵芝多糖、灵芝三萜等功效显著的化合物已经被明晰，因而从大型真菌中继续寻找有新的作用机制和特殊化学结构的细胞药物具有重大潜力，成为癌症防治研究的一个新的热点。
技术实现思路
本专利技术的目的在于结合上述
技术介绍
寻找一种新的具有抗肿瘤效果的菌根真菌子实体。为实现上述目的，本专利技术采取的技术方案为：一种菌根真菌子实体在制备抗肿瘤药物中的应用，所述菌根真菌子实体为紫褶口蘑，所述紫褶口蘑为真菌界担子菌门伞菌纲伞菌目口蘑科紫褶口蘑属。本专利技术中的菌根真菌子实体为紫褶口蘑，来自真菌界(Fungi)担子菌门(Basidiomycota)伞菌纲(Agaricomycetes)伞菌目(Agaricales)口蘑科(Tricholomataceae)紫褶口蘑属。紫褶口蘑(Tricholosporumsp.)为口蘑科(Tricholomataceae)、紫褶口蘑属(Tricholosporum)的一个新物种，采自辽宁阜新三塔沟风景区内玉米地旁的腐殖层。子实体群生于阔叶林腐殖层上，常形成蘑菇圈，菌盖平展，淡黄色至橙色，带部分紫色，中部略凸起，菌盖边缘撕裂状，有绒毛状附属物，并呈波浪状，干燥时部分内卷，菌褶淡紫色，直生至弯生，不等长，褶缘近似锯齿状，菌柄圆柱形，下部稍粗，有绒毛状附属物，中下部颜色稍深，颜色近菌盖，上部白色，菌柄实心，纤维质，菌肉白色。担孢子十字型，6.1～6.5×5.5～5.9μm。作为本专利技术所述菌根真菌子实体在制备抗肿瘤药物中的应用的优选实施方式，所述子实体的rDNA-ITS序列为：GGAAGGATCATTATTGAATGAACTTGGTCCAAGTTGTTGCTGGCTCCTTGGAGCATATATGTGTGCACGCTTGGTACTCATTCTATTTACCCACCTGTGCACTCTTTTGTAGAGCCCTGAGATATTTAGTTATTCAGGTGTTTCCTGAGTTGAAGGTTTGCTGTGCGAAAGTCAGCTTTCCTTTATTTTTTATCTCTAGGGATTCTATGTATTCTTATATACTCCTAATGAATGTAACAGAATGTTATGTTGGTTTTAAAAAAACACAATATACAACTTTCAACAATGGATCTCTTGGCTCTCGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATAAGTAATGTGAATTGCAGAATTCAGTGAATCATCGAATCTTTGAACGCATCTTGCGCCCCTTGGTATTCCGAGGAGCATGCCTGTTTGAGTGTCATTAAATTTCTCAATCCTTCCTTTCGTTCTCAATGAATGAAAGAGGTTGGCATTGGAATGTGGAAGCTGCAGGCTTTTTATTATTATAATAAAGTCAGCTCTTCTAAAAAGCATTAGCTAAATGTTTTGAGAATTAAACTAGCATTGGTGTGATAATTATCTACGCCATTTGTTAAATCTCTTCATAGTTTAGCTTCTAATATAACATTGGTCTTTGGGACCTTGTTTTGATAATTTGACCTCAAATCAGGTAGGACTACCCGCTGAACTTAAGCATATCAA。子实体及菌丝体经试剂盒提取DNA，并以ITS1/ITS4引物扩增和测序，子实体和菌丝体共同的rDNA-ITS序列如上所示。作为本专利技术所述菌根真菌子实体在制备抗肿瘤药物中的应用的优选实施方式，所述菌根真菌子实体先通过组织分离法得到纯培养菌种，然后将菌种的菌丝体进行发酵得到发酵液，最后对发酵液进行提取得到提取物用于制备抗肿瘤药物。本专利技术所述菌根子实体通过组织分离法进行多次纯化培养，得到菌根真菌，所得菌根真菌已于2017年4月10日保藏于中国典型培养物保藏中心(地址：中国，武汉，武汉大学，邮编430072)，保藏编号：CCTCCNO:M2017185，保藏菌株号：HMGIM-D160241，拉丁文分类命名为：Tricholosporumsp.，子实体及菌种的rDNA-ITS序列已提交至NCBI，登记号分别为：MF538720，MF538721。作为本专利技术所述菌根真菌子实体在制备抗肿瘤药物中的应用的优选实施方式，所述采用组织分离法进行培养时，采用的培养基包含：玉米粉水提物、麦芽提取物、酵母提取物、琼脂粉和去离子水。采用组织分离方法在MMN、PDA等通用培养基上接种组织块无法萌发获得纯培养，而在改良的复合培养基上生长情况较好，其配方包含：玉米粉水提物、麦芽提取物、酵母提取物、琼脂粉和去离子水。作为本专利技术所述菌根真菌子实体在制备抗肿瘤药物中的应用的优选实施方式，所述培养基中，各组分的质量浓度为：玉米粉水提物50g/L、麦芽提取物20g/L、酵母提取物3g/L、琼脂粉20g/L。作为本专利技术所述菌根真菌子实体在制备抗肿瘤药物中的应用的优选实施方式，所述培养基采用如下方法配置而成：称取玉米粉，溶解至一部分去离子水，煮沸，15min后使用3层纱布过滤，保存滤液，然后称取麦芽提取物、酵母提取物，溶解至玉米粉提取液，继续添加一部分去离子水，加热并完全溶解后，称取琼脂粉并不断搅拌至完全溶解，然后添加剩余去离子水定容，分装至三角瓶或试管中，加胶塞密封，121℃高压灭菌20分钟，灭菌完成后待温度降至60℃后取出，洁净条件下倒平板或摆斜面，制成平板或斜面试管培养基。在该培养基上菌丝呈现淡紫色、有气生菌丝，基内菌丝较弱，且生长一段时间(10d)后形成拧结状，质地绒状。作为本专利技术所述菌根真菌子实体在制备抗肿瘤药物中的应用的优本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种菌根真菌子实体在制备抗肿瘤药物中的应用，其特征在于，所述菌根真菌子实体为紫褶口蘑，所述紫褶口蘑为真菌界担子菌门伞菌纲伞菌目口蘑科紫褶口蘑属。

【技术特征摘要】
1.一种菌根真菌子实体在制备抗肿瘤药物中的应用，其特征在于，所述菌根真菌子实体为紫褶口蘑，所述紫褶口蘑为真菌界担子菌门伞菌纲伞菌目口蘑科紫褶口蘑属。2.如权利要求1所述的菌根真菌子实体在制备抗肿瘤药物中的应用，其特征在于，所述子实体的rDNA-ITS序列为：GGAAGGATCATTATTGAATGAACTTGGTCCAAGTTGTTGCTGGCTCCTTGGAGCATATATGTGTGCACGCTTGGTACTCATTCTATTTACCCACCTGTGCACTCTTTTGTAGAGCCCTGAGATATTTAGTTATTCAGGTGTTTCCTGAGTTGAAGGTTTGCTGTGCGAAAGTCAGCTTTCCTTTATTTTTTATCTCTAGGGATTCTATGTATTCTTATATACTCCTAATGAATGTAACAGAATGTTATGTTGGTTTTAAAAAAACACAATATACAACTTTCAACAATGGATCTCTTGGCTCTCGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATAAGTAATGTGAATTGCAGAATTCAGTGAATCATCGAATCTTTGAACGCATCTTGCGCCCCTTGGTATTCCGAGGAGCATGCCTGTTTGAGTGTCATTAAATTTCTCAATCCTTCCTTTCGTTCTCAATGAATGAAAGAGGTTGGCATTGGAATGTGGAAGCTGCAGGCTTTTTATTATTATAATAAAGTCAGCTCTTCTAAAAAGCATTAGCTAAATGTTTTGAGAATTAAACTAGCATTGGTGTGATAATTATCTACGCCATTTGTTAAATCTCTTCATAGTTTAGCTTCTAATATAACATTGGTCTTTGGGACCTTGTTTTGATAATTTGACCTCAAATCAGGTAGGACTACCCGCTGAACTTAAGCATATCAA。3.如权利要求1所述的菌根真菌子实体在制备抗肿瘤药物中的应用，其特征在于，所述菌根真菌子实体先通过组织分离法得到纯培养菌种，然后将菌种的菌丝体进行发酵得到发酵液，最后对发酵液进行提取得到提取物用于制备抗肿瘤药物。4.如权利要求3所述的菌根真菌子实体在制备抗肿瘤药...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡惠萍，刘远超，黄志勇，黄龙花，谢意珍，吴清平，
申请(专利权)人：广东省微生物研究所，广东粤微食用菌技术有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44