细胞裂解液中尼古丁的定量检测方法技术

本发明专利技术公开了一种细胞裂解液中尼古丁的定量检测方法，以细胞裂解液作为待测对象，所述细胞裂解液由细胞液/全血中加入细胞裂解溶剂制备而得；依次进行以下步骤：在细胞裂解液中加入氢氧化钠溶液、乙醚，所得的乙醚层干燥后复溶、离心，得上清液Ⅰ；上清液Ⅰ经层析处理，得上清液Ⅱ；将上清液Ⅱ进行高效液相色谱系统分析；以所得的尼古丁药物峰面积为Y，代入公式Y＝74729X–354.61，经换算，得待测细胞液/全血中的尼古丁浓度。

Quantitative detection of nicotine in cell lysate

The invention discloses a quantitative detection method of nicotine in cell lysate, the cell lysate as the object to be measured, the cell lysate by adding cell lysis solvent system in whole blood cell liquid / prepared; followed by the following steps: adding sodium hydroxide solution, ethyl ether in cell lysates, the the ether layer dry after dissolution and centrifugation, the supernatant of supernatant by chromatography; 1, supernatant II; the supernatant by high performance liquid chromatography analysis of the system; the drug nicotine peak area derived for Y substitution formula Y = 74729X - 354.61, the conversion to liquid / nicotine concentration in whole blood cells to be measured.

【技术实现步骤摘要】
细胞裂解液中尼古丁的定量检测方法
本专利技术涉及一种动物(包括人)细胞裂解液中尼古丁的定量检测方法。
技术介绍
在烟草的燃烧过程中，可以产生5000多种已知的化学物质，其中有十几种致癌或促癌物质。烟草的主要有害物质有：尼古丁：又称烟碱，是高度成瘾性物质，其成瘾性仅次于海洛因。尼古丁可作用于吸烟者的大脑，使吸烟者对烟草产生依赖性，是导致烟草成瘾的主要成份。尼古丁还可引起血管收缩，血压升高，心跳加快，引起冠状动脉痉挛，血管内膜受损，诱发心绞痛和心肌梗死。烟焦油：俗称“烟油子”，每支卷烟5-15mg不等，内含多种致癌物和促癌物。它可黏附在气管、肺泡的粘膜上，影响其功能，长期可以致癌，是引起肺癌和喉癌的主要原因。焦油还是吸烟者牙齿和手指发黄的原因。最新研究表明，所谓“低焦油含量”的卷烟并不安全，不会因为改吸这类卷烟而降低烟草导致的疾病风险。其他包括：一氧化碳、多种有毒化合物(如苯并芘、甲醛、氰化钾、丙烯、醛等)、放射性物质和多种有害金属(镉、汞、铅、砷、镍等)。现代科学研究表明，尼古丁通过肺粘膜、消化道粘膜迅速扩散到全身，通过血脑屏障进入大脑，尼古丁能够模拟乙酰胆碱(Ach)活性，同神经元表本文档来自技高网...

【技术保护点】
细胞裂解液中尼古丁的定量检测方法，其特征是：以细胞裂解液作为待测对象，所述细胞裂解液由细胞液/全血中加入细胞裂解溶剂制备而得；依次进行以下步骤：1)、吸取细胞裂解液0.4mL于带盖容器中，加入0.2mL 1.0M的氢氧化钠溶液，混匀后加入3mL乙醚，振荡器漩涡2±0.2min，9000±500r/min高速离心5±0.5min，分别得到位于上层的乙醚层、位于下层的残渣；在残渣中加入2mL乙醚重复上述振荡器漩涡、高速离心；合并两次离心所得的乙醚层，于35±1℃水浴中氮气流吹干，所得的干燥物用0.2mL的10％乙腈水溶液复溶，漩涡混匀1±0.2min，18000±500r/min高速离心5±0.5...

【技术特征摘要】
1.细胞裂解液中尼古丁的定量检测方法，其特征是：以细胞裂解液作为待测对象，所述细胞裂解液由细胞液/全血中加入细胞裂解溶剂制备而得；依次进行以下步骤：1)、吸取细胞裂解液0.4mL于带盖容器中，加入0.2mL1.0M的氢氧化钠溶液，混匀后加入3mL乙醚，振荡器漩涡2±0.2min，9000±500r/min高速离心5±0.5min，分别得到位于上层的乙醚层、位于下层的残渣；在残渣中加入2mL乙醚重复上述振荡器漩涡、高速离心；合并两次离心所得的乙醚层，于35±1℃水浴中氮气流吹干，所得的干燥物用0.2mL的10％乙腈水溶液复溶，漩涡混匀1±0.2min，18000±500r/min高速离心5±0.5min后，吸取上清液Ⅰ；2)、称取碱性硅藻土2g放入玻璃层析柱中，振动处理5±0.5min；3)、然后将步骤1)中的上清液Ⅰ全部加入步骤2)的玻璃层析柱中，先用3mL纯水淋洗，然后用1％氨水溶液5mL淋洗，再用10％甲醇溶液3mL淋洗；最后用5mL洗液洗脱作为待测物的尼古丁，收集全部洗脱液，于45±1℃水浴中氮气流吹干，干燥物用0.2mL溶液Ⅰ复溶，漩涡混匀1±0.2min，18000±500r/min高速离心5±0.5min后，吸取上清液Ⅱ进行后续的高效液相色谱系统分析...

【专利技术属性】
技术研发人员：葛建，年夫照，林芳，胡华军，刘辉军，邓同乐，张永勇，刘军，
申请(专利权)人：中国计量大学，云南农业大学，
类型：发明
国别省市：浙江,33