The invention belongs to the field of new nanomaterials, immunoassay and Biosensing Technology. The invention relates to a preparation method and application of a current type immunosensor for detecting hepatitis B surface antigen. For the first time, the mesoporous core shell type gold @ palladium @ three element alloy nanoparticle is introduced into the construction of electrochemical immunosensor, which is used to mark antibody on hepatitis B surface and amplify current signal. Electrochemical immunosensor, the invention realizes accurate quantitative detection of hepatitis B surface antigen, has the advantages of simple operation, rapid response, high sensitivity, low detection limit advantages, can be used for clinical analysis, provide an important basis for early diagnosis of hepatitis B virus infection.
【技术实现步骤摘要】
一种检测乙型肝炎表面抗原的电流型免疫传感器的制备方法及应用
本专利技术属于新型纳米材料、免疫分析和生物传感
，提供了一种检测乙型肝炎表面抗原的电流型免疫传感器的制备方法及应用，具体涉及一种基于介孔核壳型金@钯@铂三元合金纳米微球的电化学免疫传感器的构建方法，以及由该方法构建的电化学免疫传感器在检测乙型肝炎表面抗原中的应用。
技术介绍
乙型肝炎病毒感染是全球最严重的健康问题之一，乙型肝炎病毒携带者正在面临由这种持续性感染引发并发症的风险，例如引发慢性肝炎、肝硬化和肝癌。乙型肝炎病毒感染的潜伏期约为半年，因此，乙型肝炎病毒感染的早期诊断对降低其并发症发病率具有重要意义。乙型肝炎表面抗原是一种重要的乙型肝炎病毒标志物，它能够在潜伏期内乙型肝炎病毒携带者的血液中被检测出来，血液中乙型肝炎表面抗原的浓度为乙型肝炎病毒感染的早期诊断提供了重要依据。因此，发展高灵敏的乙型肝炎表面抗原的定量检测方法对乙型肝炎病毒感染的早期诊断尤为重要。电化学免疫传感器是基于抗原和抗体特异性结合的一种分析方法，具有检测迅速、检出限低、灵敏度高、操作简单和制备成本低的优点。近年来，电化学免疫传...
【技术保护点】
一种检测乙型肝炎表面抗原的电流型免疫传感器的制备方法及应用一种检测乙型肝炎表面抗原的电流型免疫传感器的制备方法，所述方法包括：（1）制备金纳米棒分散液；（2）制备介孔核壳型金@钯@铂三元合金纳米微球标记的乙型肝炎表面检测抗体分散液；（3）制备检测乙型肝炎表面抗原的电流型免疫传感器的工作电极；（4）制作检测乙型肝炎表面抗原的电流型免疫传感器的工作曲线。
【技术特征摘要】
1.一种检测乙型肝炎表面抗原的电流型免疫传感器的制备方法及应用一种检测乙型肝炎表面抗原的电流型免疫传感器的制备方法，所述方法包括：（1）制备金纳米棒分散液；（2）制备介孔核壳型金@钯@铂三元合金纳米微球标记的乙型肝炎表面检测抗体分散液；（3）制备检测乙型肝炎表面抗原的电流型免疫传感器的工作电极；（4）制作检测乙型肝炎表面抗原的电流型免疫传感器的工作曲线。2.如权利要求1所述一种检测乙型肝炎表面抗原的电流型免疫传感器的制备方法，其特征在于，所述步骤（1）的制备金纳米棒分散液包括：①制备金晶种分散液取2.5mL、0.2mol/L的十六烷基三甲基溴化铵溶液和1.5mL、1.0mmol/L的氯金酸溶液置于50mL圆底烧瓶中，在35.0℃水浴中强磁力搅拌30.0min后，快速加入0.6mL、0.01mol/L的新配置的硼氢化钠溶液，停止磁力搅拌，在35.0℃水浴中静置3.0h，得到金晶种分散液；②制备金纳米棒分散液取50.0mL、0.2mol/L的十六烷基三甲基溴化铵溶液，5.0mL、15.0mmol/L的氯金酸溶液，2.5mL、4.0mmol/L的硝酸银溶液和45.0mL超纯水置于500mL三口烧瓶中，摇匀后，置于35.0℃水浴中，缓慢加入1.25mL、0.08mol/L的抗坏血酸溶液，待混合液稳定后，将200.0~500.0μL的金晶种分散液逐滴加入，在35.0℃水浴中静置24.0h后，离心，用超纯水洗涤，将所得到的沉淀重新分散于20.0mL超纯水中，得到金纳米棒分散液。3.如权利要求1所述一种检测乙型肝炎表面抗原的电流型免疫传感器的制备方法，其特征在于，所述步骤（2）的制备介孔核壳型金@钯@铂三元合金纳米微球标记的乙型肝炎表面检测抗体分散液包括：①制备介孔核壳型金@钯@铂三元合金纳米微球取2.5mL、20.0mmol/L的氯金酸溶液，2.5mL、20.0mmol/L的四氯钯酸钠溶液，4.0mL、20.0mmol/L的氯铂酸溶液和0.1g的PluronicF127置于50mL圆底烧瓶中，超声分散后，置于油浴中，在磁力搅拌下迅速加入1.5~4.5mL、0.4mol/L的抗坏血酸溶液，油浴升温至80.0℃，持续磁力搅拌1.0h后，停止油浴，自然冷却至室温，离心，用超纯水洗涤，将所得到的固体置于30.0℃真空干燥箱内干燥24.0h，得到介孔核壳型金@钯@铂三元合金纳米微球；②制备介孔核壳型金@钯@铂三元合金纳米微球标记的乙型肝炎表面检测抗体分散液取3.0~9.0mg介孔核壳型金@钯@铂三元合金纳米微球分散到1.0mL、pH=7.0的磷酸盐缓冲液中，加入1.0~2...
【专利技术属性】
技术研发人员：王平，李明党，裴福彬，马恩慧，余昊轩，董云会，李月云，
申请(专利权)人：山东理工大学，
类型：发明
国别省市：山东,37
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