一种毛细管电泳分离小麦醇溶蛋白的方法技术

本发明专利技术公开了一种毛细管电泳分离小麦醇溶蛋白的方法。所述方法包括如下步骤：以阳离子型聚乙烯吡咯烷酮作为材料，在毛细管的管壁上制备涂层；采用毛细管电泳分离小麦样品，即实现小麦醇溶蛋白的分离；所述阳离子型聚乙烯吡咯烷酮为阳离子化的聚乙烯吡咯烷酮，粘均分子量为20000～25000；按照下述步骤制备所述涂层：依次采用所述阳离子型聚乙烯吡咯烷酮的水溶液和运行缓冲液A冲洗所述石英毛细管。本发明专利技术以阳离子化的聚乙烯吡咯烷酮(CPVP)作为涂层材料，对毛细管柱进行动态修饰，通过优化，筛选出小麦醇溶蛋白适宜的抽提分离条件，建立了一个稳定分离小麦醇溶蛋白技术方法，能有效区分不同品种的小麦醇溶蛋白，成为一种小麦品种指纹图谱分离技术。

A method for separation of wheat gliadin by capillary electrophoresis

The invention discloses a method for separation of wheat gliadin by capillary electrophoresis. The method comprises the following steps: using cationic polyvinyl pyrrolidone as the material, the coating was prepared on the wall of the capillary; separating the wheat samples by capillary electrophoresis separation, namely wheat gliadin; polyvinylpyrrolidone the cationic polyvinylpyrrolidone as cationic, viscosity average molecular weight from 20000 to 25000; in accordance with the following steps: preparing the coating followed by water solution and running buffer A of the cationic polyvinylpyrrolidone rinsing the capillary. The invention uses cationic polyvinyl pyrrolidone (CPVP) as coating material, the dynamic modification of capillary column was optimized by screening, alcohol soluble wheat protein extract appropriate separation conditions, establish a stable separation method of alcohol soluble wheat protein, can effectively distinguish between different varieties of wheat gliadin. A wheat variety fingerprint separation technology.

【技术实现步骤摘要】
一种毛细管电泳分离小麦醇溶蛋白的方法
本专利技术涉及一种毛细管电泳分离小麦醇溶蛋白的方法。
技术介绍
醇溶蛋白是小麦种子胚乳中的主要储藏蛋白。在其成熟种子中，醇溶蛋白约占总蛋白的40～50％。醇溶蛋白在结构上为单亚基，经酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳，其电泳谱带按分子量大小和迁移率不同，分为α、β、γ和ω四种类型。醇溶蛋白组成具有多态性，在小麦品种间存在明显差异，其电泳图谱的带型主要受基因型控制，因此醇溶蛋白电泳图谱可以作为指纹图谱用于品种鉴定、种子纯度检测、亲缘关系分析等。醇溶蛋白的分离方法目前主要包括酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳、反向高压液相色谱法和毛细管电泳。其中酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳是国际种子检验协会1986年公布的分析方法，应用广泛。这种方法的不足之处在于费时、费力并且分辨率低，并且需要使用有毒试剂。毛细管电泳分离蛋白具有快速、高效、分辨率高等特点，对于植物储存蛋白分离具有独特优势。但毛细管管壁吸附是分离醇溶蛋白的一个难题，因此需要对毛细管电泳分离方法进行改进。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种毛细管电泳分离小麦醇溶蛋白的方法，本专利技术方法以阳离子化的聚乙烯吡咯烷酮(CPVP，阳离本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种毛细管电泳分离小麦醇溶蛋白的方法，包括如下步骤：以阳离子型聚乙烯吡咯烷酮作为材料，在毛细管的管壁上制备涂层；采用毛细管电泳分离小麦样品，即实现小麦醇溶蛋白的分离。

【技术特征摘要】
1.一种毛细管电泳分离小麦醇溶蛋白的方法，包括如下步骤：以阳离子型聚乙烯吡咯烷酮作为材料，在毛细管的管壁上制备涂层；采用毛细管电泳分离小麦样品，即实现小麦醇溶蛋白的分离。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述阳离子型聚乙烯吡咯烷酮为二甲基二烯丙基氯化铵和乙烯吡咯烷酮的共聚物，其粘均分子量为20000～25000。3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：按照下述步骤制备所述涂层：依次采用所述阳离子型聚乙烯吡咯烷酮的水溶液和运行缓冲液A冲洗所述石英毛细管；所述阳离子型聚乙烯吡咯烷酮的水溶液冲洗后包括静置的步骤。4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其特征在于：所述阳离子型聚乙烯吡咯烷酮的水溶液的质量百分比浓度为0.1～0.5％；所述运行缓冲液A为pH为6.5的磷酸盐缓冲液与乙腈的混合液；所述磷酸盐缓冲液的浓度为10mM～20mM；所述磷酸盐缓冲液与所述乙腈的体积比为4：1。5.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其特征...

【专利技术属性】
技术研发人员：张晋丹，冯旻，
申请(专利权)人：中国科学院植物研究所，
类型：发明
国别省市：北京,11