一类用于治疗神经系统疾病的新化合物技术方案

本发明专利技术属于医药技术领域，涉及具有式I结构的化合物及其药学上可接受的盐，

A new class of compounds used for the treatment of nervous system diseases

The invention belongs to the field of medical technology, which relates to a compound with a I structure and an acceptable salt in pharmaceuticals,

【技术实现步骤摘要】
一类用于治疗神经系统疾病的新化合物
本专利技术属于医药
，更确切地说，是涉及一类具有神经元损伤保护作用的化合物及其制备方法、含有它们的药物组合物和作为神经系统疾病药物的用途。
技术介绍
“脑卒中”(cerebralstroke)又称“中风”、“脑血管意外”(cerebralvascularaccident，CVA)，是一种急性脑血管疾病，由于脑部血管突然破裂或因血管阻塞导致血液不能流入大脑而引起脑组织损伤的一组疾病，包括缺血性和出血性卒中。脑卒中已成为我国主要的死亡原因之一，而缺血性脑卒中占脑卒中的60-80％。具有高致残、高致死的特点。因此针对脑卒中的治疗成为目前神经系统疾病的重要研究课题。除急性期溶栓外，神经保护剂对脑卒中患者的康复有要的意义。目前研究用于神经保护的药物主要有谷氨酸受体拮抗剂、自由基清除剂、钙通道拮抗剂、γ-氨基丁酸(GABA)激动剂、胞二磷胆碱、炎症反应抑制剂、雌激素、促红细胞生成素(EPO)等，部分实验证明有一定神经保护作用，临床效果还需进一步研究，临床急需开发新的药物作为神经保护剂用于治疗脑卒中。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是，开发新的具有神经保护作用的化合物，用于制备治疗脑卒中及其他神经系统疾病的药物。为解决上述问题，本专利技术提供了具有式I结构的化合物及其药学上可接受的盐：其中：R1、R2为：氢，羟基，烷基，烷氧基；R3为：氢，烷基，苯甲基，苯乙基。本专利技术具有式I结构的化合物及其药学上可接受的盐，优选的式I化合物为：本专利技术式I结构的化合物及其药学上可接受的盐，所述药学上可接受的盐指：化合物与无机酸、有机酸成盐。特别地本专利技术所述药学上可接受的盐指：盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、磷酸盐、乙酸盐、丙酸盐、丁酸盐、乳酸盐、甲磺酸盐、对甲苯磺酸盐、马来酸盐、苯甲酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、富马酸盐、牛磺酸盐、葡萄糖酸盐。本专利技术式I化合物的制备方法，其中中间体Ⅱ在液溴和三氯甲烷存在下室温反应生成中间体Ⅲ，中间体Ⅲ和中间体Ⅳ在乙腈和碳酸氢钠存在下，室温反应，加水淬灭反应，经萃取，洗涤，纯化最终制得化合物Ⅰ，其中R1、R2、R3如权利要求1所述。另一种本专利技术式I化合物的制备方法，其中中间体Ⅱ在乙酸乙酯和溴化铜存在下反应生成中间体Ⅲ，中间体Ⅲ和中间体Ⅳ在N,N-二甲基甲酰胺和碳酸氢钠存在下，室温反应，加水淬灭反应，经萃取，洗涤，纯化最终制得化合物Ⅰ,其中R1、R2、R3如权利要求1所述。本专利技术还涉及一种治疗神经系统疾病的药物组合物，它包含治疗有效量的任一项所述的具有式I结构的化合物或其药学上可接受的盐及一种或多种药用载体。其中所述神经系统疾病为脑卒中。另外本专利技术还涉及所述的具有式I结构的化合物及其药学上可接受的盐在用于制备治疗神经系统疾病的药物方面的用途。其中所述神经系统疾病为脑卒中。尽管本专利技术的化合物可以不经任何配制直接给药，但所述的各种化合物优选以药物制剂的形式使用，给药途径可以是非肠道途径(如静脉、肌肉给药)及口服给药。本专利技术化合物的药物组合物制备如下：使用标准和常规的技术，使本专利技术化合物与制剂学上可接受的固体或液体载体结合，以及使之任意地与制剂学上可接受的辅助剂和赋形剂结合制备成微粒或微球。固体剂型包括片剂、分散颗粒、胶囊、缓释片、缓释微丸等等。固体载体可以是至少一种物质，其可以充当稀释剂、香味剂、增溶剂、润滑剂、悬浮剂、粘合剂、崩解剂以及包裹剂。惰性固体载体包括磷酸镁、硬脂酸镁、滑粉糖、乳糖、果胶、丙二醇、聚山梨酯80、糊精、淀粉、明胶、纤维素类物质例如甲基纤维素、微晶纤维素、低熔点石蜡、聚乙二醇、甘露醇、可可脂等。液体剂型包括溶剂、悬浮液例如注射剂、粉剂等等。药物组合物以及单元剂型中含有的活性成份(本专利技术化合物)的量可以根据患者的病情、医生诊断的情况特定地加以应用，所用的化合物的量或浓度在一个较宽的范围内调节。本专利技术的具有式I结构的化合物或其药学上可接受的盐，具有明显的神经保护作用，对脑卒中及其他神经系统疾病有重要意义。下面通过药效学实验进一步说明本专利技术化合物的神经保护作用。1材料与方法：1.1实验材料1.1.1实验动物实验用鼠为SPF级SpragueDawley大鼠，购自北京维通利华实验动物技术有限公司。其中孕16-18天大鼠用于神经元培养。1.1.2主要试剂及仪器DMEM培养基、Neurobasal培养基、胎牛血清、0.25％胰蛋白酶购Invitrogen公司。细胞培养板、细胞培养瓶及离心管购自Corning公司。2,2-偶氮二(2-甲基丙基咪)二盐酸盐(2,2'-Azobis(2-methylpropionamidine)dihydrochloride,AAPH),CCK-8细胞活性试剂盒购自东仁公司。1.2实验方法1.2.1原代神经元培养用10％水合氯醛将16－18天孕龄大鼠麻醉后，置于超净工作台内，无菌条件下分离出胚胎，转移到Neuralbasal培养基中。取皮层，剔除脑膜、血管，用培养基洗涤2次，剪碎，吹打分散细胞，0.25％胰酶消化10分钟，过滤去除所有组织块，将细胞混悬于含10％胎牛血清的DMEM培养基中，接种于24孔培养板中，第二天去除培养板中的培养基，更换为神经元培养基：含有2％B-27添加剂的Neuralbasal培养基，之后隔天换液。7天后用于实验。1.2.2AAPH诱导的细胞损伤和细胞活力检测：2,2-偶氮二(2-甲基丙基咪)二盐酸盐(2,2'-Azobis(2-methylpropionamidine)dihydrochloride,AAPH)溶于DMEM中制备1mM；5mM；10mM；20mM和40mM的溶液，分别加入到神经元中，同时加入CCK-8溶液，作用4小时后在利用分光光度计测定495nm波长的吸光度，从而分析细胞活力，观察AAPH对细胞活力的影响。1.2.3新化合物对神经元的保护作用。原代培养神经元，先用40mM的AAPH诱导损伤4h。更换培养基并加入不同浓度的新化合物D5，D13，D16，其中每种化合物低浓度为1μM，中浓度为10μM，高浓度为100μM。保护24h，加入CCK-8溶液，作用4小时后在利用分光光度计测定495nm波长的吸光度，从而分析细胞活力，判断对神经元的保护作用。1.2.4新化合物的抗凋亡作用原代培养神经元，先用40mM的AAPH诱导损伤4h。更换培养基并加入不同浓度的新化合物D5，D13，D16，其中每种化合物低浓度为1μM，中浓度为10μM，高浓度为100μM。保护24h，加入抗凋亡检测试剂溶液，之后再荧光显微镜下观察凋亡细胞的数量，分别记录10个视野的正常细胞，凋亡细胞，并计算其百分比。从而判断新化合物的抗凋亡作用。1.2.5统计与分析本实验结果均用SPSS15.0进行统计分析，实验数据以均数±标准差表示，组间比较用方差分析。P<0.05有统计学意义。表1本专利技术化合物对AAPH诱导的神经元的保护作用表2本专利技术化合物对AAPH诱导的神经元的抗凋亡作用2.结果：2.1AAPH能够模拟脑卒中制备神经元损伤模型原代培养神经元表达神经元特异性标记物神经丝蛋白(Neurofilament,NF)表明培养的细胞分别为神经元，而给予不同浓度AAPH可对神经元造成损伤，细胞本文档来自技高网...

【技术保护点】
具有式I结构的化合物及其药学上可接受的盐：

【技术特征摘要】
1.具有式I结构的化合物及其药学上可接受的盐：其中：R1、R2为：氢，羟基，烷基，烷氧基；R3为：氢，烷基，苯甲基，苯乙基。2.根据权利要求1所述的具有式I结构的化合物及其药学上可接受的盐，其中式I化合物为：3.根据权利要求1所述的具有式I结构的化合物及其药学上可接受的盐，所述药学上可接受的盐指：化合物与无机酸、有机酸成盐。4.根据权利要求3所述的化合物及其药学上可接受的盐，所述药学上可接受的盐指：盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、磷酸盐、乙酸盐、丙酸盐、丁酸盐、乳酸盐、甲磺酸盐、对甲苯磺酸盐、马来酸盐、苯甲酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、富马酸盐、牛磺酸盐、葡萄糖酸盐。5.权利要求1中式I化合物的制备方法，其特征在于：中间体Ⅱ在液溴和三氯甲烷存在下室温反应生成中间体Ⅲ，中间体Ⅲ和中间体Ⅳ在乙腈和碳酸氢钠存在下，室温反...

【专利技术属性】
技术研发人员：王群，郭安臣，杨涛，
申请(专利权)人：王群，郭安臣，杨涛，
类型：发明
国别省市：北京,11