一种基于介孔石墨相氮化碳的抗肿瘤药物载体的制备方法及应用技术

本发明专利技术涉及基于介孔石墨相氮化碳的抗肿瘤药物载体的制备方法及应用，可有效解决基于介孔石墨相氮化碳的抗肿瘤药物载体的制备及作为抗肿瘤药物载体的应用问题，利用硬模板法制备介孔石墨相氮化碳，硅溶胶HS‑40和单氰胺混合，室温搅拌2h，油浴去除水分，研磨，引入硬模板孔道中，置于高温电阻炉中煅烧，冷却，研粉末，加入到NH4HF2溶液中，搅拌去除模板，过滤，水洗，再加入超纯水搅拌，过滤，水洗，乙醇冲洗，冷冻干燥，得介孔石墨相氮化碳mpg‑C3N4；然后与抗肿瘤药物搅拌均匀，超声并旋蒸至去除溶剂，包裹上活化的透明质酸，得基于介孔石墨相氮化碳的抗肿瘤药物载体。本发明专利技术制备方法简单，原料丰富，成本低，易生产，产品质量好，使用效果好。

Preparation and application of an anti-tumor drug carrier based on mesoporous graphite phase nitriding

The invention relates to a mesoporous graphitic carbon nitride anticancer drug carrier preparation method and application, which can effectively solve the problem of mesoporous graphitic carbon nitride antitumor drug carrier preparation and application as anticancer drug carrier based on the use of hard template synthesis of mesoporous Kong Shi graphite carbon nitride, silicon sol HS 40 cyanamide and mixing, stirring at room temperature 2h, grinding oil bath to remove moisture, into the hard template pore, calcination, in high temperature resistance furnace cooling, grinding powder, added to the NH4HF2 solution, stirring to remove the template, filtering, washing, add water into the mixing, filtering, washing, washing with ethanol. Freeze drying, the mesoporous graphitic carbon nitride mpg C3N4; then the antitumor drug and stirring, ultrasonic and evaporation to remove solvent, hyaluronic acid coated activated, the mesoporous based on Shi Moxiang An antitumor drug carrier for carbon nitride. The preparation method of the invention is simple, the raw material is rich, the cost is low, the production is easy, the quality of the product is good, and the use effect is good.

【技术实现步骤摘要】
一种基于介孔石墨相氮化碳的抗肿瘤药物载体的制备方法及应用
本专利技术涉及医药，特别是一种基于介孔石墨相氮化碳的抗肿瘤药物载体的制备方法及应用。
技术介绍
纳米材料一直是是近年来的研究热点，它具有的一些特殊效应，如表面效应、小尺寸效应、量子尺寸效应、增强的渗透滞留效应等，使得纳米材料在力学性能、电学性能、热学性能、磁学性能、光学性能以及化学和催化性能等方面，有着其它材料无可比拟的特性，并且在医学领域的应用也越来越广泛。氮化碳仅由碳和氮这两种元素组成，元素储量丰富，原材料来源广泛且价格低廉，合成方法简便，操作简单。介孔石墨相氮化碳（简称mpg-C3N4）属于窄带隙半导体，其带隙宽度约为2.7eV，无毒，不含金属；同时，mpg-C3N4能吸收部分可见光，在可见光的激发下能够产生活性氧ROS进而杀死肿瘤细胞；mpg-C3N4还可以作为一种荧光探针，其进入细胞核的能力能与4',6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI，一种能够与DNA强力结合的荧光染料)相媲美，可用于肿瘤细胞的标记。但其吸收波长较小，在水相中极易聚沉，分散性低。氮化碳常用的制备方法主要有高压热解法、气相沉积法、电化学沉积法、离子注入法、水热或溶剂热合成法等。近年来，一种直接加热缩聚单氰胺、双聚氰胺和三聚氰胺等有机物前驱体的方法成为应用的比较多的制备石墨相氮化碳（g-C3N4）晶体的方法。但是，这些方法制备的多为块状材料，而且其比表面积往往小于10m2/g，实际应用范围狭窄。为此，通常考虑向石墨相氮化碳（g-C3N4）中引入孔径可调的孔结构，或改变氮化碳的纳米粒径和形貌以及通过剥离的手段制备少层或者单层的石墨相氮化碳（g-C3N4）来增加其比表面积,以增强其在各个领域的应用。目前，如何制备出基于介孔石墨相氮化碳的抗肿瘤药物载体，以及将介孔石墨相氮化碳(mpg-C3N4)以及作为药物递释系统转运载体，并与抗肿瘤药物联合应用于治疗肿瘤的光动力药物还未见有公开报道。
技术实现思路
针对上述情况，为克服现有技术之缺陷，本专利技术之目的就是提供一种基于介孔石墨相氮化碳的抗肿瘤药物载体的制备方法及应用，可有效解决基于介孔石墨相氮化碳的抗肿瘤药物载体的制备及作为抗肿瘤药物载体的应用问题。本专利技术解决的技术方案是，一种基于介孔石墨相氮化碳的抗肿瘤药物载体的制备方法，利用硬模板法制备介孔石墨相氮化碳（mpg-C3N4），于玻璃容器中加入硅溶胶HS-40（即LUDOXHS-40）和单氰胺，室温搅拌两个小时使其充分混合均匀，于油浴中搅拌12h，以去除水分；产物研磨后，引入硬模板孔道中，置于加盖的坩埚内，在550℃以上高温电阻炉中煅烧3-4h，冷却至室温，研碎至粉末，加入到NH4HF2溶液中，搅拌去除模板，过滤，水洗5次，再加入超纯水搅拌，过滤，水洗5次，用乙醇冲洗，冷冻干燥，得黄色产物介孔石墨相氮化碳mpg-C3N4；然后与抗肿瘤药物搅拌均匀，超声并旋蒸至去除溶剂，包裹上活化的透明质酸（简称HA），得基于介孔石墨相氮化碳的抗肿瘤药物载体。所述的抗肿瘤药物为血卟啉单甲醚（简称HMME）、吲哚菁绿，二氢卟吩，阿霉素，多西紫杉醇等药物中的一种或几种；所述的NH4HF2溶液是NH4HF2晶体溶于水中制成，浓度为4mol/L；所述活化的透明质酸是，取透明质酸（MW7.7KDa）20-30mg加入超纯水20-30mL中，搅拌溶解均匀，再加入200-250mg的1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐（简称EDC•HCl）和100-150mg的N-羟基琥珀酰亚胺（简称NHS）搅拌20-30min，即成活化的透明质酸。该方法制备的介孔石墨相氮化碳的抗肿瘤药物载体有效用于抗肿瘤药物载体，实现抗肿瘤药物载体中的应用。本专利技术制备方法简单，原料丰富，成本低，易生产，产品质量好，有效用于制备抗肿瘤药物，作为光疗介质进行光动力治疗体内浅表肿瘤，并用激光照射以促进载体介孔石墨相氮化碳（mpg-C3N4）与抗肿瘤药物共同产生活性氧杀死肿瘤细胞，使用效果好，是肿瘤治疗药物上的一大创新。具体实施方式以下结合具体情况和实施例对本专利技术具体实施方式作详细说明。实施例1本专利技术一种基于介孔石墨相氮化碳的抗肿瘤药物载体的制备方法，包括以下步骤：1、制备介孔石墨相氮化碳，采用硬质模板法制备介孔石墨相氮化碳，方法是：(1)于玻璃容器中加入16-20gLUDOXHS-40和4-5g单氰胺，加水至100mL，室温搅拌2h，充分混合均匀，成水溶液；(2)将水溶液置于50-60℃油浴中搅拌12-24h，以去除水分，得干物，干物；(3)将干物（产物）研磨成粉，引入硬模板孔道中，置于加盖的坩埚内，在高温电阻炉中以2.5℃/min的速率升温至550℃，保温煅烧3-4h；(4)冷却至室温，再用研钵研碎至粉末状，加入浓度为4mol/L的氟化氢铵溶液200-250mL中，搅拌2d，去除模板，过滤，用水冲洗5次；(5)再加入200mL超纯水搅拌1d，过滤，500ml水洗5次；(6)用乙醇冲洗3次，冷冻干燥，得黄色的介孔石墨相氮化碳（mpg-C3N4）；2、制备透明质酸修饰的介孔石墨相氮化碳（HA@mpg-C3N4），方法是：于冰浴中向活化的透明质酸溶液中加入浓度3mg/mL的10-15mL介孔石墨相氮化碳（mpg-C3N4）溶液，室温反应2-4h；在12000r/min离心15min，去除多余的透明质酸，沉淀物用水复溶，装入MW8-14KDa的透析袋透析2d，透析液冷冻干燥即得透明质酸修饰的介孔石墨相氮化碳（HA@mpg-C3N4）；3、制备透明质酸修饰的介孔石墨相氮化碳载药血卟啉单甲醚（HA@mpg-C3N4-HMME），方法是：(1)介孔石墨相氮化碳载药血卟啉单甲醚(mpg-C3N4-HMME)的制备：将血卟啉单甲醚（HMME）与透明质酸修饰的介孔石墨相氮化碳按质量比1-3:1混合在一起，溶解于质量浓度50%的乙醇水溶液中，室温超声2-4h，旋蒸，除去溶剂，得棕红色产物，将产物用水复溶，12000r/min离心5min，除去上层的上清液，得下层的介孔石墨相氮化碳载药血卟啉单甲醚(mpg-C3N4-HMME)；(2)制备活化透明质酸修饰的介孔石墨相氮化碳载药血卟啉单甲醚（HA@mpg-C3N4-HMME）：于冰浴中向活化的透明质酸溶液中加入制得的介孔石墨相氮化碳载药血卟啉单甲醚(mpg-C3N4-HMME)，室温反应2-4h，然后12000r/min离心15min，沉淀物用水复溶，装入MW8-14KDa透析袋透析2d；透析液冷冻干燥，即得透明质酸修饰的介孔石墨相氮化碳载药血卟啉单甲醚（HA@mpg-C3N4-HMME）；4、制备活化的透明质酸修饰的介孔石墨相氮化碳载药血卟啉单甲醚过氧化氢酶（HA@mpg-C3N4-HMME/CAT）：将2.50mg过氧化氢酶（CAT）溶解于pH7的PBS溶液中，加入介孔石墨相氮化碳载药血卟啉单甲醚（HA@mpg-C3N4-HMME）2.50mg，超声2-4h，然后旋蒸至溶剂全无，置于活化的透明质酸溶液中，室温反应2-4h，12000r/min离心15min，得沉淀物，沉淀物用水复溶，装入MW8-14KDa透析袋透析2d，透析液冷冻干燥，得透明质酸包衣的棕红色产物即为基于介孔石墨相氮化碳的抗肿瘤药物载体（H本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种基于介孔石墨相氮化碳的抗肿瘤药物载体的制备方法，其特征在于，于玻璃容器中加入硅溶胶HS‑40和单氰胺，室温搅拌两个小时使其充分混合均匀，于油浴中搅拌12h，以去除水分；产物研磨后，引入硬模板孔道中，置于加盖的坩埚内，在550℃以上高温电阻炉中煅烧3‑4h，冷却至室温，研碎至粉末，加入到NH4HF2溶液中，过滤，水洗5次，再加入超纯水搅拌，过滤，水洗5次，用乙醇冲洗，冷冻干燥，得黄色产物介孔石墨相氮化碳mpg‑C3N4；然后与抗肿瘤药物搅拌均匀，超声并旋蒸至去除溶剂，包裹上活化的透明质酸，得基于介孔石墨相氮化碳的抗肿瘤药物载体；所述的抗肿瘤药物为血卟啉单甲醚、吲哚菁绿，二氢卟吩，阿霉素，多西紫杉醇等药物中的一种或几种；所述的NH4HF2溶液是NH4HF2晶体溶于水中制成，浓度为4mol/L；所述活化的透明质酸是，取透明质酸20‑30mg加入超纯水20‑30mL中，搅拌溶解均匀，再加入200‑250mg的1‑乙基‑(3‑二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐和100‑150mg的N‑羟基琥珀酰亚胺搅拌20‑30min，即成活化的透明质酸。

【技术特征摘要】
1.一种基于介孔石墨相氮化碳的抗肿瘤药物载体的制备方法，其特征在于，于玻璃容器中加入硅溶胶HS-40和单氰胺，室温搅拌两个小时使其充分混合均匀，于油浴中搅拌12h，以去除水分；产物研磨后，引入硬模板孔道中，置于加盖的坩埚内，在550℃以上高温电阻炉中煅烧3-4h，冷却至室温，研碎至粉末，加入到NH4HF2溶液中，过滤，水洗5次，再加入超纯水搅拌，过滤，水洗5次，用乙醇冲洗，冷冻干燥，得黄色产物介孔石墨相氮化碳mpg-C3N4；然后与抗肿瘤药物搅拌均匀，超声并旋蒸至去除溶剂，包裹上活化的透明质酸，得基于介孔石墨相氮化碳的抗肿瘤药物载体；所述的抗肿瘤药物为血卟啉单甲醚、吲哚菁绿，二氢卟吩，阿霉素，多西紫杉醇等药物中的一种或几种；所述的NH4HF2溶液是NH4HF2晶体溶于水中制成，浓度为4mol/L；所述活化的透明质酸是，取透明质酸20-30mg加入超纯水20-30mL中，搅拌溶解均匀，再加入200-250mg的1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐和100-150mg的N-羟基琥珀酰亚胺搅拌20-30min，即成活化的透明质酸。2.根据权利要求1所述的基于介孔石墨相氮化碳的抗肿瘤药物载体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：一、制备介孔石墨相氮化碳，采用硬质模板法制备介孔石墨相氮化碳，方法是：(1)于玻璃容器中加入16-20gLUDOXHS-40和4-5g单氰胺，加水至100mL，室温搅拌2h，充分混合均匀，成水溶液；(2)将水溶液置于50-60℃油浴中搅拌12-24h，以去除水分，得干物，干物(3)将干物研磨成粉，引入硬模板孔道中，置于加盖的坩埚内，在高温电阻炉中以2.5℃/min的速率升温至550℃，保温煅烧3-4h；(4)冷却至室温，再用研钵研碎至粉末状，加入浓度为4mol/L的氟化氢铵溶液200-250mL中，搅拌2d，去除模板，过滤，用水冲洗5次；(5)再加入200mL超纯水搅拌1d，过滤，500ml水洗5次；(6)用乙醇冲洗3次，冷冻干燥，得黄色的介孔石墨相氮化碳；二、制备...

【专利技术属性】
技术研发人员：王蕾，赵洪娟，李丽，郝永伟，牛梦亚，郑翠霞，胡玉洁，宋庆龄，牛秀秀，张振中，
申请(专利权)人：郑州大学，
类型：发明
国别省市：河南,41