一种用于新城疫病毒检测的试剂、检测方法及应用技术

本申请公开了一种用于新城疫病毒检测的试剂、检测方法及应用。本申请的新城疫病毒检测试剂，包括引物对和探针，引物对上下游引物分别为Seq ID No.1和Seq ID No.2所示序列，探针为Seq ID No.3所示序列或者其反向互补序列；SEQ ID No.3所示的探针序列中，第30碱基修饰6‑荧光基团‑dT，第31碱基替换为dSpacer，第32碱基修饰荧光淬灭基团‑dT，3’端修饰C3 Spacer。本申请的试剂，能通过重组酶聚合酶扩增对新城疫病毒进行灵敏、特异、高效检测。与现有检测方法相比，本申请的试剂和检测方法，时间短，易操作，可快速得出结论，适于现场检测，对新城疫病毒的快速防控具有重大意义。

A reagent, detection method and application for the detection of Newcastle disease virus

The present application discloses a reagent, detection method and application for the detection of Newcastle disease virus. Newcastle disease virus detection reagent of the application, including primers and probes, primers primers were Seq ID and Seq No.1 ID No.2 shown in sequence, as shown by Seq ID probe No.3 sequence or its reverse complementary sequence; SEQ ID No.3 probe sequence is shown in thirtieth, 6 fluorophore modified bases dT, thirty-first base substitutions for dSpacer, thirty-second base modification in the fluorescence quenching group dT, 3 'end modified C3 Spacer. The reagents used in this application can be amplified by recombinant enzyme polymerase to detect NDV sensitive, specific and efficient. Compared with the existing detection methods, the reagents and detection methods in this application are short in time, easy to operate, quick to draw conclusions, suitable for on-site detection, and of great significance for the rapid prevention and control of Newcastle disease virus.

【技术实现步骤摘要】
一种用于新城疫病毒检测的试剂、检测方法及应用
本申请涉及新城疫病毒检测领域，特别是涉及一种用于新城疫病毒检测的试剂、检测方法及应用。
技术介绍
新城疫(Newcastledisease,ND)是由新城疫病毒(Newcastlediseasevirus,NDV)引起的一种禽类急性、高度接触性传染病。该病常呈败血症，以高热、呼吸困难、下痢、神经机能紊乱、黏膜和浆膜出血为特征，具有很高的发病率和死亡率，我国农业部将其列为一类动物疫病。NDV为副黏病毒科副黏病毒属的禽副黏病毒I型(APM-I)，是一种具有囊膜的单股、负链、不分节段的RNA病毒。NDV基因组长约15.2kbp，其中NP、P、M、F、HN和L基因分别编码病毒的六种特异性结构蛋白。M基因长为1095bp，保守性高，其编码的M蛋白(即基质蛋白)位于囊膜的内层，在RNA的合成和病毒的自身装配上起重要的作用。病禽是主要的传染源，NDV存在于病禽的所有组织器官、体液、分泌物和排泄中，以脑、脾、肺含毒量最高，以骨髓含毒时间最长。在自然条件下NDV主要通过呼吸道、消化道，也可经眼结膜、破损的皮肤或泄殖腔粘膜侵入宿主。ND是危害我国禽业养殖最重本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于新城疫病毒检测的试剂，其特征在于：所述试剂包括引物对和探针，所述探针在引物对的扩增靶标区域内，所述引物对的上游引物为Seq ID No.1所示序列，所述引物对的下游引物为Seq ID No.2所示序列，所述探针为Seq ID No.3所示序列或者Seq ID No.3所示序列的反向互补序列；Seq ID No.1：5’‑TCTATCTGTTGGGCTCAGTGATGTGCTCGGACCCT‑3’Seq ID No.2：5’‑TCCAGAGTATCTTGGCAACCTGGGGAGAGGCATTT‑3’Seq ID No.3：5’‑AGGTGCACGGACTAAGCTACTTGCTCCTT...

【技术特征摘要】
1.一种用于新城疫病毒检测的试剂，其特征在于：所述试剂包括引物对和探针，所述探针在引物对的扩增靶标区域内，所述引物对的上游引物为SeqIDNo.1所示序列，所述引物对的下游引物为SeqIDNo.2所示序列，所述探针为SeqIDNo.3所示序列或者SeqIDNo.3所示序列的反向互补序列；SeqIDNo.1：5’-TCTATCTGTTGGGCTCAGTGATGTGCTCGGACCCT-3’SeqIDNo.2：5’-TCCAGAGTATCTTGGCAACCTGGGGAGAGGCATTT-3’SeqIDNo.3：5’-AGGTGCACGGACTAAGCTACTTGCTCCTTTCTTCTCTAGCAGTGGGA-3’其中，SEQIDNo.3所示的探针序列中，第30个碱基修饰6-荧光基团-dT，第31个碱基替换为碱基类似物，第32个碱基修饰荧光淬灭基团-dT，3’端修饰C3Spacer。2.根据权利要求1所述的用于新城疫病毒检测的试剂，其特征在于：所述6-荧光基团-dT为6-FAM-dT。...

【专利技术属性】
技术研发人员：林彦星，蔡良语，秦智锋，曹琛福，陈兵，马岚，曾少灵，孙洁，陶虹，郑晓聪，刘建利，唐金明，吕建强，杨俊兴，花群义，
申请(专利权)人：深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心，深圳市检验检疫科学研究院，清华大学深圳研究生院，
类型：发明
国别省市：广东,44