蒽醌类化合物、制备方法及应用技术

本发明专利技术提供了一种蒽醌类化合物、制备方法及应用，属于化合物领域。该蒽醌类化合物具有抗植物病原细菌活性，作为杀菌剂应用可用来预防和治疗植物病原细菌引起的植物病害。该蒽醌类化合物提取自海洋真菌Fusarium equiseti GLY27，所述海洋真菌Fusarium equiseti GLY27的保藏号是CGMCC 14348。该蒽醌类化合物用于预防和治疗由植物病原细菌引起的植物病害，其中所述植物病原细菌为丁香假单胞杆菌P.syringae、燕麦食酸菌A.avenae、胡萝卜软腐欧文氏菌E.carotovora。

Anthraquinone compounds, preparation methods and Applications

The invention provides an anthraquinone compound, a preparation method and an application, which belongs to the field of compound. The anthraquinone compound has the activity of resisting plant pathogenic bacteria. As a fungicide, it can be used to prevent and treat plant diseases caused by plant pathogenic bacteria. The anthraquinones extracted from marine fungus Fusarium equiseti GLY27, CGMCC 14348 is preserved by the marine fungus Fusarium equiseti GLY27. The anthraquinones are used for the prevention and treatment of plant diseases caused by plant pathogenic bacteria. The plant pathogenic bacteria are cloaca Syringa P.syringae, oat A.avenae, carrot soft rot E.carotovora.

【技术实现步骤摘要】
蒽醌类化合物、制备方法及应用
本专利技术涉及化合物领域，尤其涉及一种蒽醌类化合物、制备方法及应用。
技术介绍
植物病害严重危害农业生产，每年造成巨大的经济损失。据联合国粮农组织(FAO)统计，每年农作物因遭受病害造成的减产损失平均为总产量的10％～15％。其中，植物细菌病害带来的问题尤为严重，随着农用硫酸链霉素的停用，极为缺乏有效的防治药剂，而铜制剂等防治效果一般，且属于化学农药，易造成环境污染和食品安全问题，同时还会造成病原菌抗药性的出现。因此研发新型环境友好型高效低毒生物农药用来防治植物细菌病害成为迫在眉睫的课题。海洋真菌由于能够产生结构新颖、生物活性显著的次级代谢产物而引起了人们的关注。自2007年以来，每年从海洋真菌中获得的新化合物数目在100个以上，仅2015年，就报道了400多个新的海洋真菌次级代谢产物。这些化合物当中很多都具有诸如抗菌、抗炎、抗癌、酶抑制等显著地生物活性。然而目前对于海洋真菌次级代谢产物的活性研究大多集中于人类医学方面，对于其在农业方面的应用很少，特别是在防治植物病原细菌方面，文献调研发现，目前并没有对于海洋真菌次级代谢产物防治植物细菌病害的报道。因此从海洋真菌中获得具有抗植物病原细菌活性的化合物具有十分广阔的发展前景。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种蒽醌类化合物、制备方法及应用，该蒽醌类化合物自海洋真菌FusariumequisetiGLY27中分离得到，具有抗植物病原细菌活性，作为杀菌剂应用可用来预防和治疗植物病原细菌引起的植物病害。本专利技术一方面提供了一种蒽醌类化合物，其结构式如式(I)所示，所述式(I)结构中R基团选自酮基或羟基。该蒽醌类化合物提取自海洋真菌FusariumequisetiGLY27，所述海洋真菌FusariumequisetiGLY27已在中国普通微生物菌种保藏管理中心保藏，保藏号是CGMCC14348。本专利技术另一方面提供了上述蒽醌类化合物的制备方法，包括以下步骤：在菌种培养基中进行对海洋真菌Fusariumequiseti培养，转入发酵培养基中进行发酵；将所得发酵物用乙酸乙酯浸泡后再用甲醇：二氯甲烷为1:1的溶液浸泡，减压浓缩，过滤，将剩余水相用乙酸乙酯萃取，萃取物减压浓缩、干燥后得粗提物；将粗提物进行层析、洗脱、浓缩后获得式(I)所述化合物。作为优选技术方案，所述菌种培养基为马铃薯葡萄糖平板培养基，配比为：马铃薯5-6g/L、葡萄糖15-20g/L、琼脂18-20g/L，其余为去离子水；在菌种培养基中28℃培养5-7天。作为优选技术方案，所述马铃薯葡萄糖平板培养基作为优选技术方案，所述发酵培养基为大米固体培养基，500mL锥形瓶中加入大米40g，水30mL，接种真菌后，28℃发酵培养30-40天。作为优选技术方案，将所得发酵物用乙酸乙酯浸泡2次，随后用甲醇：二氯甲烷体积比为1:1的溶液浸泡2次。作为优选技术方案，所述粗提物进行层析、洗脱、浓缩的步骤包括：将粗提物进行减压硅胶柱层析，固定相为100-200目正相硅胶，流动相为10％乙酸乙酯-石油醚混合溶剂，再用100％乙酸乙酯洗脱，将100％乙酸乙酯洗脱液浓缩；浓缩后的洗脱液再进行ODS反相硅胶柱层析，流动相为30％、40％、50％、60％、70％、80％甲醇水溶液，将50％甲醇水溶液的洗脱液浓缩后进行SephadexLH-20凝胶柱层析，流动相为50％二氯甲烷-甲醇溶液，浓缩后即得式(I)化合物。流动相为30％-80％甲醇水溶液，30-80％甲醇洗脱液浓缩后进行SephadexLH-20凝胶柱层析，流动相为50％二氯甲烷-甲醇溶液，浓缩后即得式(I)化合物。本专利技术的再一方面提供了上述蒽醌类化合物的应用，所述蒽醌类化合物用于预防和治疗由植物病原细菌引起的植物病害。作为优选技术方案，所述植物病原细菌为丁香假单胞杆菌P.syringae、燕麦食酸菌A.avenae、胡萝卜软腐欧文氏菌E.carotovora。本专利技术的又一方面提供了一种植物病原细菌杀菌剂，其有效成分为上述蒽醌类化合物，还包括溶剂或助剂。作为优选技术方案，所述植物病原细菌杀菌剂为所述蒽醌类化合物溶解于二甲基亚砜后，再配制成为水溶液，蒽醌类化合物的浓度≥3.91μg/mL，二甲基亚砜终浓度≤1％。与现有技术相比，本专利技术所具有的优势及有益效果在于：1、本专利技术首次发现了海洋真菌FusariumequisetiGLY27提取的化合物的抗植物病原细菌活性，杀菌活性高、效果好，低浓度下可发挥优异的杀菌性能，并首次确定了其结构中手性碳的绝对构型；2、本专利技术的蒽醌类化合物，可作为农用杀菌剂主要成分用来预防和治疗植物病原细菌引起的病害，并且对由丁香假单胞杆菌P.syringae、燕麦食酸菌A.avenae、胡萝卜软腐欧文氏菌E.carotovora引起的植物细菌病害防治效果显著；3、本专利技术的蒽醌类化合物可以通过真菌发酵进行大规模生产，成本低，制备效率高，不受资源限制，应用前景广阔。附图说明图1为本专利技术实施例所提供的蒽醌类化合物A的1HNMR谱图；图2为本专利技术实施例所提供的蒽醌类化合物A的13CNMR谱图；图3为本专利技术实施例所提供的蒽醌类化合物A的HRESIMS谱图；图4为本专利技术实施例所提供的蒽醌类化合物B的1HNMR谱图；图5为本专利技术实施例所提供的蒽醌类化合物B的13CNMR谱图；图6为本专利技术实施例所提供的蒽醌类化合物B的HRESIMS谱图；图7为本专利技术实施例所提供的蒽醌类化合物B的ECD谱图。具体实施方式下面将对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。本专利技术的一实施例提供了一种蒽醌类化合物，其结构式如式(I)所示，所述式(I)结构中R基团选自酮基或羟基。该蒽醌类化合物提取自海洋真菌FusariumequisetiGLY27，所述海洋真菌FusariumequisetiGLY27的保藏号是CGMCC14348。该海洋真菌为木贼镰刀菌，已在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏日期为2017年7月3日，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所。本专利技术的另一实施例提供了蒽醌类化合物的制备方法，包括以下步骤：在菌种培养基中进行对海洋真菌FusariumequisetiGLY27培养，转入发酵培养基中进行发酵；将所得发酵物用乙酸乙酯浸泡后再用甲醇：二氯甲烷体积比为1:1的溶液浸泡，减压浓缩，过滤，将剩余水相用乙酸乙酯萃取，萃取物减压浓缩、干燥后得粗提物；将粗提物进行层析、洗脱、浓缩后获得式(I)所述化合物。本实施例中，海洋真菌经过菌种活化和发酵扩大培养后能够产生代谢产物，利于提取物的制备，发酵后的发酵产物经过乙酸乙酯浸泡，再经过甲醇：二氯甲烷体积比为1:1的溶液浸泡，能够充分提取其中的次级代谢产物。乙酸乙酯的萃取能够保证提取物活性的基础上进行浓缩和提纯。层析、洗脱、浓缩能够获得纯化的化合物。在一优选的实施例中，所述菌种培养基为马铃薯葡萄糖平板培养基，在菌种培养基中28℃培养5-7天；其中，马铃薯葡萄糖平板培养基配比为：马铃薯5-6g本文档来自技高网...

【技术保护点】
蒽醌类化合物，其特征在于，结构式如式(I)所示，

【技术特征摘要】
1.蒽醌类化合物，其特征在于，结构式如式(I)所示，所述式(I)结构中R基团选自酮基或羟基。2.权利要求1所述的蒽醌类化合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：在菌种培养基中进行对海洋真菌FusariumequisetiGLY27培养，转入发酵培养基中进行发酵；将所得发酵物用乙酸乙酯浸泡后再用甲醇：二氯甲烷体积比为1:1的溶液浸泡，减压浓缩，过滤，将剩余水相用乙酸乙酯萃取，萃取物减压浓缩、干燥后得粗提物；将粗提物进行层析、洗脱、浓缩后获得式(I)所述化合物。3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述菌种培养基为马铃薯葡萄糖平板培养基，配比为：马铃薯5-6g/L、葡萄糖15-20g/L、琼脂18-20g/L，其余为去离子水；在菌种培养基中28℃培养5-7天。4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述发酵培养基为大米固体培养基，500mL锥形瓶中加入大米40g，水30mL，接种真菌后，28℃发酵培养30-40天。5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，将所得发酵物用乙酸乙酯浸泡2次，随后用甲醇：二氯甲烷为1:1的溶液浸泡2次。6.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述粗提物进行层析、洗...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵栋霖，张成省，李义强，尤祥伟，邹平，徐茜，陈志厚，孟晨，袁源，徐辰生，林伟，荆常亮，廖锦建，徐宗昌，
申请(专利权)人：中国农业科学院烟草研究所，福建省烟草公司南平市公司，
类型：发明
国别省市：山东,37