一种桔小实蝇卵的显微注射方法技术

本发明专利技术公开了一种桔小实蝇卵的显微注射方法，该方法包括以下步骤：用将放有桔小实蝇卵的黑色纱布固定在离心管的管口，倒扣离心管将桔小实蝇卵在体积浓度1.5‑2％的次氯酸钠溶液中浸泡，使桔小实蝇卵充分接触次氯酸钠溶液；将处理过的去壳卵用纯水洗涤，将次氯酸钠溶液尽量洗涤干净；将处理好的去壳卵挑取到覆盖湿润滤纸的培养皿中；在解剖镜下将桔小实蝇去壳卵依次横向排序；转移桔小实蝇去壳卵到玻片上，用镊子的背部轻轻滑过玻片，固定，并将去壳卵干燥；随后用水饱和油覆盖去壳卵表面；进行显微注射。本发明专利技术解决了桔小实蝇卵在显微注射中难以干燥和内压过大的问题，提高注射后卵孵化率达10％‑30％，感染率达15％‑50％。

Microinjection method of Bactrocera dorsalis ovum

The invention discloses a method of microinjection into the eggs of Bactrocera dorsalis, the method comprises the following steps: fixed on the nozzle of the centrifuge tube with black gauze will be placed upside down the eggs of Bactrocera dorsalis, centrifugal tube will soak the sodium hypochlorite solution in volume concentration of 1.5 Bactrocera egg 2%, the eggs of Bactrocera dorsalis full contact sodium hypochlorite solution; treatment the egg shell is washed by pure water, the sodium hypochlorite solution to wash clean; put the egg shell out onto a culture dish covered with moistened filter paper; under anatomical lens will go to shell eggs in the lateral ordering of Bactrocera dorsalis; transfer to egg shell to slide on the fly, glide slide gently with the back fixing forceps, and will go to shell egg drying; then water saturated oil to cover the surface of egg shell; microinjection. The invention solves the difficult to dry in the eggs of Bactrocera dorsalis in microinjection and internal pressure is too large, improve the hatching rate of 10% after injection of 30%, the infection rate was 15% 50%.

【技术实现步骤摘要】
一种桔小实蝇卵的显微注射方法
本专利技术属于病虫防害领域，具体地是涉及一种桔小实蝇卵的显微注射方法
技术介绍
桔小实蝇(Bactroceradorsalis)是危害水果和蔬菜的危险性有害生物，我国于1911年首次在台湾省台北市的柑桔园发现，在大陆于1937年报道有该虫发生。鉴于该虫寄主范围广，繁殖快及对水果贸易造成的严重危害，许多国家将其列为检疫对象。利用环境友好型防治方法防治害虫是当今害虫防治的趋势。实现桔小实蝇的规模化饲养，有利于开发环保型防控技术，如不育昆虫技术(sterileinsecttechnique,SIT)和利用天敌昆虫(如寄生蜂)防治害虫。桔小实蝇的规模化饲养中，现有用显微注射桔小实蝇卵的方法如下：用新鲜橙子扎洞诱导桔小实蝇产卵1h，剥开橙子挑取已产桔小实蝇卵。在解剖镜下用毛笔将桔小实蝇卵排序，转移桔小实蝇卵到贴在有双面胶的玻片上，轻轻按压；将桔小实蝇卵在干燥剂中干燥30min左右。随后用水饱和油覆盖去壳卵表面，防止进一步干燥。显微注射完毕，将注射过的桔小实蝇卵挑到预先保温的幼虫食物中；培养7d后，将幼虫挑取到湿润沙子中，让其自然成蛹；蛹培养7d后，将蛹从沙中轻轻筛本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种桔小实蝇卵的显微注射方法，其特征在于，包括以下步骤：(B1)用将放有桔小实蝇卵的黑色纱布固定在离心管的管口，倒扣离心管将桔小实蝇卵在体积浓度1.5‑2％的次氯酸钠溶液中浸泡，轻轻晃动离心管使桔小实蝇卵充分接触次氯酸钠溶液；(B2)将处理过的去壳卵用纯水洗涤，期间轻轻晃动，将次氯酸钠溶液尽量洗涤干净；将处理好的去壳卵挑取到覆盖湿润滤纸的培养皿中；(B3)先准备好粘着有双面胶的玻片；在解剖镜下将桔小实蝇去壳卵依序横向排序在厚滤纸上，翻转粘着双面胶的玻片，将排列好的桔小实蝇去壳卵转移到双面胶上，用镊子的背部轻轻滑过玻片，从而转移桔小实蝇去壳卵到玻片上，并将去壳卵在干燥剂中干燥8‑12min，随后...

【技术特征摘要】
1.一种桔小实蝇卵的显微注射方法，其特征在于，包括以下步骤：(B1)用将放有桔小实蝇卵的黑色纱布固定在离心管的管口，倒扣离心管将桔小实蝇卵在体积浓度1.5-2％的次氯酸钠溶液中浸泡，轻轻晃动离心管使桔小实蝇卵充分接触次氯酸钠溶液；(B2)将处理过的去壳卵用纯水洗涤，期间轻轻晃动，将次氯酸钠溶液尽量洗涤干净；将处理好的去壳卵挑取到覆盖湿润滤纸的培养皿中；(B3)先准备好粘着有双面胶的玻片；在解剖镜下将桔小实蝇去壳卵依序横向排序在厚滤纸上，翻转粘着双面胶的玻片，将排列好的桔小实蝇去壳卵转移到双面胶上，用镊子的背部轻轻滑过玻片，从而转移桔小实蝇去壳卵到玻片上，并将去壳卵在干燥剂中干燥8-12min，随后用水饱和油覆盖去壳卵表面，防止进一步干燥；(B4)进行显微注射，完毕，保留注射过的桔小实蝇去壳卵。2.根据权利要求1所述的桔小实蝇卵的显微注射方法，其特征在于，还包括(B5)保持覆盖卵的水饱和油充足，将玻片放置在有湿润滤纸的培养皿中，置于桔小实蝇孵化环境中。3.根据权利要求1所述的桔小实蝇卵的显微注射方法，其特征在于，步骤(B1)中，将桔小实蝇卵在体积浓...

【专利技术属性】
技术研发人员：不公告发明人，
申请(专利权)人：广州威佰昆生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44