一种生物传感器及其制备方法、靶分子浓度检测方法技术

本发明专利技术公开了一种生物传感器及其制备方法、靶分子浓度检测方法。生物传感器的制备方法包括以下步骤：S1，将链霉亲和素、羧基、氨基、巯基中的一种或者多种修饰到磁珠上，将生物素修饰到待检测的靶分子的核酸适配体上；S2，在反应液中加入所述核酸适配体和所述磁珠，将所述核酸适配体偶联到所述磁珠的部分位点上；所述反应液为浓度在100mM以上的盐缓冲液；S3，将能与所述核酸适配体互补配对的DNA序列偶联到贵金属纳米粒子上；S4，将步骤S2得到的磁珠和步骤S3得到的贵金属纳米粒子置于杂交液中反应5～60min，通过碱基互补配对，形成由磁珠、核酸适配体、贵金属纳米粒子构成的生物传感器。本发明专利技术可实现高灵敏度地浓度检测，且成本低，效率高。

A biosensor and its preparation method and target molecular concentration detection method

The invention discloses a biological sensor, a preparation method and a target molecular concentration detection method. Method for preparing biosensor comprises the following steps: S1, the streptavidin, carboxyl, amino, sulfhydryl groups in one or more modified magnetic beads. The biotinylated nucleic acid target molecules to be detected aptamer; S2, the addition of the aptamer and the beads in the reaction liquid in the aptamer coupled to the beads on the part of the sites; the reaction liquid concentration of salt buffer in 100mM above; S3, will be with the aptamer complementary DNA sequence coupled to noble metal nanoparticles; S4, the noble metal nanoparticles in liquid S3 hybridization step S2 magnetic beads and obtained by the reaction of 5 ~ 60min, through base pairing, formed by biological sensor bead, aptamer, noble metal nanoparticles. The invention can realize high sensitivity concentration detection, with low cost and high efficiency.

【技术实现步骤摘要】
一种生物传感器及其制备方法、靶分子浓度检测方法
本专利技术涉及生物检测技术，特别是涉及一种生物传感器及其制备方法、靶分子浓度检测方法。
技术介绍
生物标志物是一种疾病的生物学状态的指示器，其可以是蛋白质、DNA或RNA的片段，具有特异性，因此可以作为靶向疾病的标志物。特别是癌症生物标记物,是癌症的征兆。通过检测它们,可以对癌症进行诊断。随着生物技术的发展，许多癌症的生物标志物已经被发现。通过对这些生物标记物的检测，可以在预期的时间对疾病进行诊断和治疗。其中蛋白质的显著变化可以揭示生物体作为一种生物标记物的生理和病理过程，指示疾病的生物学状态。这些蛋白质在生命科学的基础研究，疾病诊断，药物研究，人体健康分析和生物安全监测具有重要意义。蛋白质识别是基于抗原特异性和免疫应答抗体的一种广泛应用的技术。但也有一些不足，例如，时间花费多，成本高，所产生的抗体的免疫原性、化学改性可能导致活性降低甚至失活，限制抗体抗原在蛋白质分析中的应用。因此，开展更为方便、高灵敏高特异性的蛋白质识别研究对生物系统具有重要意义。以上
技术介绍
内容的公开仅用于辅助理解本专利技术的专利技术构思及技术方案，其并不必本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种生物传感器的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：S1，将链霉亲和素、羧基、氨基、巯基中的一种或者多种修饰到磁珠上，将生物素修饰到待检测的靶分子的核酸适配体上；S2，在反应液中加入所述核酸适配体和所述磁珠，将所述核酸适配体偶联到所述磁珠的部分位点上；所述反应液为浓度在100mM以上的盐缓冲液；S3，将能与所述核酸适配体互补配对的DNA序列偶联到贵金属纳米粒子上；S4，将步骤S2得到的磁珠和步骤S3得到的贵金属纳米粒子置于杂交液中反应5～60min，通过碱基互补配对，形成由磁珠、核酸适配体、贵金属纳米粒子构成的生物传感器。

【技术特征摘要】
1.一种生物传感器的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：S1，将链霉亲和素、羧基、氨基、巯基中的一种或者多种修饰到磁珠上，将生物素修饰到待检测的靶分子的核酸适配体上；S2，在反应液中加入所述核酸适配体和所述磁珠，将所述核酸适配体偶联到所述磁珠的部分位点上；所述反应液为浓度在100mM以上的盐缓冲液；S3，将能与所述核酸适配体互补配对的DNA序列偶联到贵金属纳米粒子上；S4，将步骤S2得到的磁珠和步骤S3得到的贵金属纳米粒子置于杂交液中反应5～60min，通过碱基互补配对，形成由磁珠、核酸适配体、贵金属纳米粒子构成的生物传感器。2.根据权利要求1所述的生物传感器的制备方法，其特征在于：步骤S2中将所述核酸适配体序列偶联到所述磁珠上后还包括：在所述反应液中加入游离的生物素，将所述生物素偶联到所述磁珠的另外部分位点上；磁分离洗涤后，再将封闭剂连接到所述磁珠上进行封闭。3.根据权利要求2所述的生物传感器的制备方法，其特征在于：所述封闭剂为牛血清蛋白、脱脂奶粉或者无交叉反应的血清。4.根据权利要求1所述的生物传感器的制备方法，其特征在于：步骤S2中，所述盐缓冲液为Tris的盐缓冲液。5.根据权利要求1所述的生物传感器的制备方法，其特征在于：步骤S3中，所述贵金属纳米粒子为金纳米球颗粒、金纳米棒颗粒、金/银复合纳米颗粒、...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙树清，杨瑞，吴振杰，
申请(专利权)人：清华大学深圳研究生院，
类型：发明
国别省市：广东,44