独龙重楼乙醇提取物及其在制药中的应用与其化学成分分离和鉴定方法技术

技术编号:16745610 阅读:66 留言:0更新日期:2017-12-08 14:50
提供独龙重楼(Paris dulongensis H. Li & Kurita)具有抗癌活性的乙醇提取物(PDE4)和总皂苷(PDE5)及其制备方法和其在制备治疗或预防白血病、肝癌、肺癌、乳腺癌、结肠癌的药物中的应用,以及提供PDE5中化学成分的分离和鉴定方法。采用色谱柱层析及半制备高效液相色谱的分离方法,以及质谱和核磁共振波谱的鉴定方法,从PDE5中分离、鉴定出了重楼皂苷V、重楼皂苷I、β‑蜕皮激素、原薯蓣皂苷、Parisaponin I和人参皂苷Rg1。本发明专利技术首次阐明PDE5的主要化学成分,通过提供的方法,可以简单、快速地从PDE5中获取上述化学成分,用于建立独龙重楼、独龙重楼提取物PDE4或独龙重楼总皂苷PDE5的质量控制标准。

【技术实现步骤摘要】
独龙重楼乙醇提取物及其在制药中的应用与其化学成分分离和鉴定方法
:本专利技术属于医药
和天然产物提取分离
,尤其涉及独龙重楼乙醇提取物PDE4、独龙重楼总皂苷PDE5及其制备方法和其用于制备治疗癌症的药物,以及独龙重楼抗癌活性部位PDE5的化学成分分离和鉴定方法。
技术介绍
:黑药花科(Melanthiaceae)重楼属(Paris)植物有很高的药用价值,其中滇重楼[Parispolyphyllavar.yunnanensis(Franch.)Hand.-Mazz]和七叶一枝花[Parispolyphyllavar.chinensis(Franch.)Hara]收载于2015年版《中华人民共和国药典》。重楼属植物的人工种植取得了很大的进步,比如在云南省怒江傈僳族自治州,2014年重楼属植物种植面积就有约200公顷[王跃虎,牛红梅,张兆云,胡向阳,李恒.重楼属植物的药用价值及其化学物质基础.中国中药杂志,2015,40(5),833-839]。在怒江州人工种植的重楼属植物中,除了滇重楼、长柱重楼[Parisforrestii(Takht.)H.Li]外,独龙重楼(Paris本文档来自技高网...

【技术保护点】
独龙重楼乙醇提取物PDE4,其特征在于所述的PDE4由下述方法制备而得:独龙重楼干燥根茎粉碎后,用90%~95%乙醇,60~65℃提取3~4h,过滤后得滤液和滤渣,滤渣按上述条件再提取2次,合并3次提取所得滤液,浓缩后得到独龙重楼乙醇提取物PDE4。

【技术特征摘要】
1.独龙重楼乙醇提取物PDE4,其特征在于所述的PDE4由下述方法制备而得:独龙重楼干燥根茎粉碎后,用90%~95%乙醇,60~65℃提取3~4h,过滤后得滤液和滤渣,滤渣按上述条件再提取2次,合并3次提取所得滤液,浓缩后得到独龙重楼乙醇提取物PDE4。2.独龙重楼乙醇提取物PDE5,其特征在于所述的PDE5由下述方法制备而得:将PDE4加水制成混悬液,依次用石油醚、氯仿、正丁醇分别萃取3次,萃取液浓缩后,分别得到石油醚萃取部分、氯仿萃取部分和正丁醇萃取部分PDE5,所述的PDE5中含有重楼皂苷V、重楼皂苷I、β-蜕皮激素、原薯蓣皂苷、ParisaponinI和人参皂苷Rg1,总含量为10-95%重量。3.药物组合物,其中含有治疗有效量的权利要求1所述的独龙重楼乙醇提取物PDE4和药学上可接受的载体。4.药物组合物,其中含有治疗有效量的权利要求2所述的独龙重楼乙醇提取物PDE5和药学上可接受的载体。5.权利要求2所述的独龙重楼乙醇提取物PDE5中化合物重楼皂苷V、重楼皂苷I、β-蜕皮激素、原薯蓣皂苷、ParisaponinI和人参皂苷Rg1的分离和鉴定方法,其特征在于该方法包括下述步骤:(1)用80~100目的硅胶柱层析对PDE5进行划段,氯仿-甲醇v/v5:1、3:1、2:1、1:1和0:1依次进行梯度洗脱,经TLC检测分为6部分C1~C6;(2)C1部分经RP-18中压反相硅胶柱层析,用甲醇-水5:95→100:0,v/v梯度洗脱,再经TLC检测合并,得到10部分C-1-1~C-1-10,C-1-2部分为50%甲醇洗脱部分,经SephadexLH-20凝胶柱色谱后,再经半制备型HPLC,WelchMaterialsUltimateAQ-C18色谱柱,5.0μm,φ4.6×300mm;流速v=1.0mL/min;乙腈-水,16:84制备得到β-蜕皮激素,tR=23.918min,C-1-10部分为90%甲醇洗脱部分,经SephadexLH-20凝胶柱色谱后,再经过正相硅胶柱层析二氯甲烷-甲醇,12:1分别得到重楼皂苷V和重楼皂苷I;(3)C3部分经RP-18中压反相硅胶柱层析,甲醇-水30...

【专利技术属性】
技术研发人员:王跃虎汉秋燕李晓艳左何英杨珺夏梦媛罗吉凤李恒杨永平
申请(专利权)人:中国科学院昆明植物研究所贡山县一园中草药种植农民专业合作社
类型:发明
国别省市:云南,53

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