包含蛋白酶变体和淀粉酶变体的洗涤剂组合物制造技术

本发明专利技术涉及包含蛋白酶变体以及α‑淀粉酶或其变体的洗涤剂组合物。此外，本发明专利技术涉及使用这些洗涤剂组合物的方法。

Detergent compositions containing protease variants and amylase variants

The present invention relates to detergent compositions containing protease variants and alpha amylase or its variants. In addition, the invention relates to a method for the use of these detergent compositions.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】包含蛋白酶变体和淀粉酶变体的洗涤剂组合物序列表的引用本申请包括一个处于计算机可读形式的序列表，将其通过引用结合在此。专利技术背景专利
本专利技术涉及包含蛋白酶变体和淀粉酶变体的新颖组合物，其中各自的变体分别在包括以下各项的一个或多个特性方面展现出相对于亲本蛋白酶和亲体淀粉酶的改变：洗涤性能、洗涤剂稳定性和/或储存稳定性。本专利技术的这些组合物适合用作例如清洁或洗涤剂组合物，例如衣物洗涤剂组合物和餐具洗涤组合物(包括自动餐具洗涤组合物)。相关领域的说明酶作为洗涤配制品的部分已经在洗涤剂工业中使用了数十年。从商业视角看，蛋白酶在这样的配制品中是最相关的酶，而其他酶(包括脂肪酶、淀粉酶、纤维素酶、半纤维素酶或多种酶的混合物)也通常被使用。为了改进酶的成本和/或性能，对具有改变的特性的酶进行着持续搜寻，这些改变的特性例如是在低温下增加的活性、增加的稳定性、在给定的pH下增加的比活性、改变的Ca2+依赖性、在其他洗涤剂成分(例如漂白剂、表面活性剂等)的存在下增加的稳定性等。例如，常用于洗涤剂中的一个蛋白酶家族是枯草杆菌酶。这个家族先前已经进一步由SiezenRJ和LeunissenJAM，1997，ProteinScience[蛋白质科学]，6，501-523分组为6个不同的亚组。这些亚组之一是枯草杆菌蛋白酶家族，其包括枯草杆菌酶，如BPN’、枯草杆菌蛋白酶309(诺维信公司(NovozymesA/S))、枯草杆菌蛋白酶嘉士伯(Carlsberg)(诺维信公司)、枯草杆菌蛋白酶S41(来自嗜冷的南极芽孢杆菌TA41的枯草杆菌酶，DavailS等人，1994，TheJournalofBiologicalChemistry[生物化学杂志]，269(26)，99，17448-17453)和枯草杆菌蛋白酶S39(来自嗜冷的南极芽孢杆菌TA39的枯草杆菌酶，NarinxE等人，1997，ProteinEngineering[蛋白质工程]，10(11)，第1271-1279页)。TY145是来自芽孢杆菌属(Bacillus)物种TY145(NCIMB40339)的枯草杆菌酶，其首次描述于WO92/17577(诺维信公司)以及后来描述于申请WO2004/067737(诺维信公司)(披露了TY-145枯草杆菌酶的三维结构和使用蛋白质工程来改变TY-145枯草杆菌酶的功能性)。其他酶，例如α-淀粉酶，通常是来自地衣芽孢杆菌(B.licheniformis)的α-淀粉酶，也称为Termamyl。类似于正在寻求改进的蛋白酶，α-淀粉酶正在开发中。已经对洗涤剂组合物进行了描述，但是持续需要改进的洗涤剂组合物，其中洗涤剂组合物内的酶，例如漂白系统或螯合剂。因此，本专利技术的目的是提供这样的洗涤剂组合物。
技术实现思路
本专利技术涉及洗涤剂组合物，这些洗涤剂组合物包含：(i)至少一种蛋白酶变体，其在对应于SEQIDNO:1的位置171、173、175、179或180的一个或多个位置处包含取代，其中该蛋白酶变体与SEQIDNO:1具有至少75％但小于100％的序列一致性，并且其中该蛋白酶变体具有蛋白酶活性，以及(ii)至少一种α-淀粉酶，其具有SEQIDNO:2、3、4、5、6、7、8或9的氨基酸序列或其与SEQIDNO:2、3、4、5、6、7、8或9具有有至少75％但小于100％的序列一致性的变体，并且其中该α-淀粉酶变体具有α-淀粉酶活性。本专利技术还涉及一种洗涤方法，该洗涤方法包括用根据本专利技术的洗涤剂组合物洗涤织物，优选地在40℃或更低的温度，或更优选地在30℃或更低的温度，或甚至更优选地在20℃或更低的温度下进行该洗涤。序列表综述SEQIDNO:1是成熟TY145蛋白酶的氨基酸序列。SEQIDNO:2是成熟SP722α-淀粉酶的氨基酸序列。SEQIDNO:3是成熟AA560α-淀粉酶的氨基酸序列。SEQIDNO:4是成熟TS23α-淀粉酶的氨基酸序列。SEQIDNO:5是成熟噬细胞菌属(cytophaga)α-淀粉酶的氨基酸序列。SEQIDNO:6是成熟SP707α-淀粉酶的氨基酸序列。SEQIDNO:7是成熟LASB0000α-淀粉酶的氨基酸序列。SEQIDNO:8是成熟SP7.7α-淀粉酶的氨基酸序列。SEQIDNO:9是成熟LE174的氨基酸序列。SEQIDNO:10是成熟TLL脂肪酶的氨基酸序列。定义术语“蛋白酶”在此被定义为水解肽键的酶。它包括属于EC3.4酶组(包括其13个亚类中的每一个)的任何酶。EC编号参考来自NC-IUBMB的1992年酶命名法[EnzymeNomenclature1992]，加利福尼亚州圣地亚哥市学术出版社(AcademicPress，SanDiego，California)，分别包括在Eur.J.Biochem.[欧洲生物化学期刊]，1994，223，1-5；Eur.J.Biochem.[欧洲生物化学期刊]，1995，232，1-6；Eur.J.Biochem.[欧洲生物化学期刊]，1996，237，1-5；Eur.J.Biochem.[欧洲生物化学期刊]，1997，250，1-6；以及Eur.J.Biochem.[欧洲生物化学期刊]，1999，264，610-650中出版的增刊1-5。术语“枯草杆菌酶”是指根据Siezen等人，ProteinEngng.[蛋白质工程学]4(1991)719-737和Siezen等人，ProteinScience[蛋白质科学]，6(1997)501-523的丝氨酸蛋白酶亚组。丝氨酸蛋白酶或丝氨酸肽酶是特征为在活性位点具有与底物形成共价加合物的丝氨酸的蛋白酶的一个亚组。另外，枯草杆菌酶(以及丝氨酸蛋白酶)的特征为除了丝氨酸以外，还具有两个活性位点氨基酸残基，即组氨酸和天冬氨酸残基。枯草杆菌酶可以被划分为6个亚类，即，枯草杆菌蛋白酶家族、嗜热蛋白酶家族、蛋白酶K家族、羊毛硫氨酸抗生素肽酶家族、Kexin家族和Pyrolysin家族。术语“蛋白酶活性”意指蛋白质水解活性(EC3.4)。本专利技术的蛋白酶是内切肽酶(EC3.4.21)。出于本专利技术的目的，根据下面实例1中所描述的程序确定蛋白酶活性。在此描述的这些蛋白酶变体具有SEQIDNO:1的成熟多肽的蛋白酶活性的至少20％，例如，至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％、至少90％、至少95％或至少100％。术语“α-淀粉酶”意指具有α-淀粉酶活性(即α-1,4-葡聚糖-4-葡聚糖水解酶(EC3.2.1.1)的活性)的α-淀粉酶，该α-淀粉酶构成一组催化淀粉和其他直链和支链的1,4-葡糖苷寡糖和多糖的水解的酶。出于在本专利技术的洗涤剂组合物中存在的α-淀粉酶的目的，可以如在下面实例1中所述确定α-淀粉酶活性。在此描述的这些α-淀粉酶具有SEQIDNO:2的成熟多肽的α-淀粉酶活性的至少20％，例如，至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％、至少90％、至少95％或至少100％。术语“脂肪酶”意指具有脂肪酶活性的脂肪酶。本文定义的脂肪酶可以是羧酸酯水解酶EC3.1.1，其包括例如EC3.1.1.3三酰甘油脂肪酶、EC3.1.1.4磷脂酶A2、EC3.1.1.5溶血磷脂酶、EC3.1.1.26半乳糖脂酶、E本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种洗涤剂组合物，该洗涤剂组合物包括：(i)至少一种蛋白酶变体，其在对应于SEQ ID NO:1的位置171、173、175、179或180的一个或多个位置处包含取代，其中所述蛋白酶变体与SEQ ID NO:1具有至少75％但小于100％的序列一致性，并且其中该蛋白酶变体具有蛋白酶活性，以及(ii)至少一种具有SEQ ID NO:2、3、4、5、6、7、8或9的氨基酸序列的α‑淀粉酶或其与SEQ ID NO:4、5、6、7、8或9具有至少75％但小于100％的序列一致性的变体，并且其中所述α‑淀粉酶变体具有α‑淀粉酶活性。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.02.04 EP 15153789.11.一种洗涤剂组合物，该洗涤剂组合物包括：(i)至少一种蛋白酶变体，其在对应于SEQIDNO:1的位置171、173、175、179或180的一个或多个位置处包含取代，其中所述蛋白酶变体与SEQIDNO:1具有至少75％但小于100％的序列一致性，并且其中该蛋白酶变体具有蛋白酶活性，以及(ii)至少一种具有SEQIDNO:2、3、4、5、6、7、8或9的氨基酸序列的α-淀粉酶或其与SEQIDNO:4、5、6、7、8或9具有至少75％但小于100％的序列一致性的变体，并且其中所述α-淀粉酶变体具有α-淀粉酶活性。2.根据权利要求1所述的洗涤剂组合物，其中所述至少一种蛋白酶变体在对应于SEQIDNO:1的位置173、175或180的至少一个位置处包含取代。3.根据权利要求1所述的洗涤剂组合物，其中所述至少一种蛋白酶变体在对应于位置171、173、175、179或180的至少一个位置处包含取代，并且其中a.对应于SEQIDNO:1的位置171的位置处的氨基酸选自下组，该组由以下各项组成：W、K、E、D和N；和/或b.对应于SEQIDNO:1的位置173的位置处的氨基酸为P；和/或c.对应于SEQIDNO:1的位置175的位置处的氨基酸选自下组，该组由以下各项组成：A、V和P；和/或d.对应于SEQIDNO:1的位置179的位置处的氨基酸选自下组，该组由以下各项组成：C、V、Q、S、T、E、H、K、M、N、Y和A；和/或e.对应于SEQIDNO:1的位置180的位置处的氨基酸为Y。4.根据前述权利要求中任一项所述的洗涤剂组合物，其中当参考SEQIDNO:1时，所述取代选自S173P、S175P或F180Y。5.根据前述权利要求中任一项所述的洗涤剂组合物，其中所述至少一种α-淀粉酶是SEQIDNO:2、3、4、5、6、7、8或9的亲本α-淀粉酶的变体，并且其中所述α-淀粉酶变体具有α-淀粉酶活性。6.根据权利要求4所述的洗涤剂组合物，其中所述至少一种α-淀粉酶变体选自下组，该组由以下各项组成：a.α-淀粉酶，其在对应于SEQIDNO:4的位置181、182、183和184的两个或更多个位置处包含缺失和/或取代，并且其中所述至少一种α-淀粉酶变体与SEQIDNO:2具有至少75％但小于100％的序列一致性；b.α-淀粉酶，其在以下位置中包含一个或多个修饰：SEQIDNO:5的9、118、149、182、186、195、202、257、295、299、320、323、339、345和458，并且其中所述至少一种α-淀粉酶变体与SEQIDNO:3具有至少75％但小于100％的序列一致性；c.α-淀粉酶，其在以下位置中包含一个或多个修饰：SEQIDNO:2的140、195、206、243、260和476，并且其中所述至少一种α-淀粉酶变体与SEQIDNO:2具有至少75％但小于100％的序列一致性；d.α-淀粉酶，其在以下位置中包含一个或多个修饰：SEQIDNO:4的180、181、243和475，并且其中所述至少一种α-淀粉酶变体与SEQIDNO:4具有至少75％但小于100％的序列一致性；e.α-淀粉酶，其在以下位置中包含一个或多个修饰：SEQIDNO:5的178、179、187、203、458、459、460和476，并且其中所述至少一种α-淀粉酶变体与SEQID...

【专利技术属性】
技术研发人员：MDGP托斯卡诺，C安德森，BM吕，
申请(专利权)人：诺维信公司，
类型：发明
国别省市：丹麦,DK