可用于G‑四链体DNAs检测的荧光探针及其制备方法技术

本发明专利技术提供了一种可用于G‑四链体DNAs检测的荧光探针，名称为3‑(4‑二甲氨基苯基)‑2‑(N‑甲基吡啶‑4‑基)丙烯腈碘盐。其制备方法：(1)4‑吡啶乙腈盐酸盐与三乙胺反应制备得到4‑吡啶乙腈；(2)4‑吡啶乙腈和碘甲烷反应得到4‑吡啶乙腈甲基化碘盐；(3)4‑吡啶乙腈甲基化碘盐、4‑二甲氨基苯甲醛和叔丁醇钾反应得到目标产物3‑(4‑二甲氨基苯基)‑2‑(N‑甲基吡啶‑4‑基)丙烯腈碘盐。所制备的荧光探针与G‑四链体DNAs的结合能力远大于与双螺旋DNA的结合能力，与G‑四链体DNAs结合后的荧光强度也显著大于与双螺旋DNA结合后的荧光强度，其可用于G‑四链体DNAs的特异检测。

Can be used for fluorescent probe and preparation method of G four chain DNAs detection

The present invention provides a fluorescent probe for G four chain DNAs detection. The name for the 3 (4 two methyl amino phenyl) 2 (N methyl pyridine 4 acrylonitrile base) salt. The preparation method: (1) 4 pyridine hydrochloride and three acetonitrile triethylamine was prepared by 4 pyridine acetonitrile; (2) 4 pyridine acetonitrile and methyl iodide reaction of 4 pyridine acetonitrile methyl salt; (3) 4 acetonitrile pyridine methylation 4 two iodized salt, formaldehyde and potassium tert butyl alcohol reaction to obtain the target product 3 (4 two methyl amino phenyl) 2 (N methyl pyridine 4 acrylonitrile base) salt. The binding ability of fluorescent probe and G DNAs four chain preparation is far greater than the ability to combine with the double helix of DNA, and the fluorescence intensity of G four chain DNAs combined with the fluorescence intensity was significantly greater than the combined with double spiral DNA, which can be used for specific detection of G four chain DNAs.

【技术实现步骤摘要】
可用于G-四链体DNAs检测的荧光探针及其制备方法
本专利技术涉及荧光探针，特别涉及一种可用于G-四链体DNAs检测的荧光探针及其制备方法和应用。
技术介绍
人端粒末端DNA由富含鸟嘌呤(G)的重复序列组成，该富G序列在一价阳离子(如K+和Na+)的诱导下可以通过G碱基间的Hoogsteen氢键作用形成平面G-四分体，并进一步堆积形成G-四链体结构。G-四链体结构也存在于原癌基因启动子区如c-myc、c-kit和bcl-2等。c-myc、c-kit和bcl-2在癌细胞中过度表达，而且其相关蛋白会影响癌细胞的增殖和凋亡。人端粒富G单链DNA是端粒酶的作用底物，端粒酶在正常体细胞中不表达活性或活性很低，而在85-90％的癌细胞中活性很高。有机小分子化合物可以诱导G-四链体结构的形成并使之稳定，从而可以抑制端粒酶的活性或降低癌基因的转录表达而达到抗肿瘤的目的，而且可以作为这些G-四链体DNAs的荧光探针，辅助G-四链体DNA生物功能的研究及与之相关疾病的诊断。然而人体细胞核中存在大量的双螺旋DNA，所以开发能选择性识别G-四链体结构DNAs的探针分子具有重要的理论及实际意义。因此，选择性好本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种可用于G‑四链体DNAs检测的荧光探针，其特征在于，名称为3‑(4‑二甲氨基苯基)‑2‑(N‑甲基吡啶‑4‑基)丙烯腈碘盐，结构式为：

【技术特征摘要】
1.一种可用于G-四链体DNAs检测的荧光探针，其特征在于，名称为3-(4-二甲氨基苯基)-2-(N-甲基吡啶-4-基)丙烯腈碘盐，结构式为：2.如权利要求1所述的一种可用于G-四链体DNAs检测的荧光探针的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)4-吡啶乙腈的合成：在室温下，用N,N-二甲基甲酰胺将4-吡啶乙腈盐酸盐全部溶解后，按摩尔比4-吡啶乙腈盐酸盐﹕三乙胺＝1﹕3～5，逐滴加入三乙胺，滴加完后继续搅拌5～10h后，抽滤，用N,N-二甲基甲酰胺洗涤滤饼三次，旋蒸滤液除去溶剂，得黑色油状液体和三乙胺盐酸盐的混合物，梯度洗脱法对该混合物进行柱层析，先用石油醚将残存的N,N-二甲基甲酰胺分离出去，再用体积比为1﹕6～10的乙酸乙酯和二氯甲烷的混合液分离提纯产物，得黄色油状液体4-吡啶乙腈；(2)4-吡啶乙腈甲基化碘盐的合成：在冰水浴冷却下，用N,N-二甲基甲酰胺将4-吡...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙金鱼，魏春英，
申请(专利权)人：山西大学，
类型：发明
国别省市：山西,14