净化二苯乙烯类药物的免疫亲和搅拌棒及其制备方法技术

本发明专利技术涉及一种净化二苯乙烯类药物的免疫亲和搅拌棒及其制备方法，其利用不锈钢棒为原材料，依次通过不锈钢棒的表面处理、键合硅胶颗粒、脱水固定、硅烷化处理、氨基固定、活化反应、偶联反应、不锈钢棒去活化和共价键固定等步骤，制备得到净化二苯乙烯类药物的免疫亲和搅拌棒。本发明专利技术提供的免疫亲和搅拌棒，通过将硅胶颗粒成功键合在不锈钢棒上，使得抗体附着的表面积加大，提高免疫亲和搅拌棒的柱容量和稳定性，延长免疫亲和搅拌棒的使用次数；本发明专利技术扩展了免疫亲和萃取技术联合固相微萃取技术在兽药残留方向的应用，为兽药残留检测方法提供了新的思路。

Immunoaffinity stirring rod for purifying two styrene medicine and preparation method thereof

The invention relates to a method for purifying two styrene drugs immunoaffinity stirring rod and a preparation method thereof, the use of stainless steel rod as raw material, followed by stainless steel rod surface treatment, bonded silica particles, fixed, dehydration treatment, amino silane fixation, activating reaction, coupling reaction, stainless steel rod to activation and covalent bond fixed steps, prepared by the immune purification two styrene drug affinity stirring rod. The present invention provides immune affinity stirrer, by successful bonding silica particles on a stainless steel rod, the antibody attached to the surface area increase, improve the immunoaffinity stirring rod column capacity and stability, prolong the use time of the immunoaffinity stirring rod; the invention extends the immune affinity extraction technique combined with solid phase micro extraction technology in application of veterinary drug residues, provides a new method for the detection of veterinary drug residues.

【技术实现步骤摘要】
净化二苯乙烯类药物的免疫亲和搅拌棒及其制备方法
本专利技术涉及兽药残留检测
，具体涉及一种净化二苯乙烯类药物的免疫亲和搅拌棒及其制备方法。
技术介绍
二苯乙烯类药物为一类典型的人工合成的非甾体类雌激素，用于动物的激素缺乏治疗和节育，20世纪60年代曾作为官方批准使用的促生长添加剂，应用于畜牧业生产中。但随后对其进行药物毒理研究，表明此类药物可诱导癌症的发生。尤其是动物源性食品中二苯乙烯类雌激素的残留，可通过食物链进入人体，并对人体的内分泌系统的正常功能产生干扰，甚至诱发乳腺癌和前列腺癌和白血病等疾病(Huetal.2013)。同时，在环境水样中也发现了二苯乙烯类药物的残留情况。在20世纪末，各国陆续公布法令，禁止将二苯乙烯类雌激素应用畜牧业生产中。因此，对于此类激素的药物残留检测方法的探索意义重大。在残留分析方法中，样品的前处理技术是整个过程的关键及瓶颈。传统的前处理技术，药物富集倍数低，有毒有害的有机试剂的使用量大，对操作者和环境都有危害。而且操作步骤繁琐，费时费力。因此，开发高效、简单、有机溶剂用量小的绿色前处理技术成为了分析化学发展的重要课题。专利技术内容本专利技术提供了本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种净化二苯乙烯类药物的免疫亲和搅拌棒的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：S101：将不锈钢棒的一端浸入浓盐酸溶液中刻蚀，然后用去离子水冲洗，烘干后冷却至室温；其中，所述浸入的长度为1.0cm～3.0cm，所述刻蚀的时间为25min～30min，所述烘干为130烘干1h；S102：将冷却后且刻蚀过的不锈钢棒的一端蘸取硅酸钾溶液，然后粘附5μm的硅胶颗粒，使不锈钢表层被硅胶颗粒均匀覆盖；再将不锈钢棒粘附硅胶部分置于浓硝酸的瓶口烟熏15s，然后在室温下干燥15h；其中，所述硅酸钾溶液的质量分数为30％；S103：去除经过S102处理后的不锈钢棒中的水分；S104：将经过S103处理后的不锈钢棒的...

【技术特征摘要】
1.一种净化二苯乙烯类药物的免疫亲和搅拌棒的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：S101：将不锈钢棒的一端浸入浓盐酸溶液中刻蚀，然后用去离子水冲洗，烘干后冷却至室温；其中，所述浸入的长度为1.0cm～3.0cm，所述刻蚀的时间为25min～30min，所述烘干为130烘干1h；S102：将冷却后且刻蚀过的不锈钢棒的一端蘸取硅酸钾溶液，然后粘附5μm的硅胶颗粒，使不锈钢表层被硅胶颗粒均匀覆盖；再将不锈钢棒粘附硅胶部分置于浓硝酸的瓶口烟熏15s，然后在室温下干燥15h；其中，所述硅酸钾溶液的质量分数为30％；S103：去除经过S102处理后的不锈钢棒中的水分；S104：将经过S103处理后的不锈钢棒的附有硅胶的一端浸入含APTES的乙醇水溶液中，室温摇晃过夜；其中，所述含APTES的乙醇水溶液中，乙醇、超纯水和APTES的体积比为90:5:5，所述摇晃的速率为60r/min；S105：将经过S104处理后的不锈钢棒依次采用无水乙醇、超纯水和无水乙醇冲洗，然后放入连接有氮气罐的真空抽滤瓶中，抽出所述真空抽滤瓶中空气并充满氮气，并将所述真空抽滤瓶的下半部分浸入80的液体石蜡中，恒温保持10～15h；S106：将经过S105处理后的不锈钢棒进行活化和偶联反应；S107：将经过S106处理后的不锈钢棒浸泡于乙醇胺水溶液中，室温摇晃过夜；其中，所述乙醇胺水溶液中乙醇胺的浓度为0.2mg/mL，所述乙醇胺水溶液的pH值为8.32，所述摇晃的速率为60r/min；S108：将经过S107处理后的不锈钢棒浸入0.2mg/mL的NaCNBH3溶液中，4保温48h，得到所述免疫亲和棒。2.根据权利要求1所述的净化二苯乙烯类药物的免疫亲和搅拌棒的制备方法，其特征在于：所述S106中，所述活化和偶联反应包括：将经过S105处理后的不锈钢棒浸入到pH值为8.5的活化剂中，5h后用超纯水冲洗，然后浸入到含单克隆抗体的PBS液中，室温摇晃过夜；其中，所述含单克隆抗体的PBS溶液中，单克隆抗体的浓度为0.5mg/mL，所述摇晃的速率为60r/min。3.根据权利要求2所述的净化二苯乙烯类药物的免疫亲和搅拌棒的制备...

【专利技术属性】
技术研发人员：李存，王翠翠，张欣达，杨琳燕，郭永泽，李娜，赵世瑾，
申请(专利权)人：天津农学院，
类型：发明
国别省市：天津,12