莲藕中一种新马铃薯Y病毒科病毒的检测试剂盒及其检测方法技术
Detection kit and detection method of a new potato virus Y in lotus root
The invention discloses a detection kit for new virus of potato virus Y in lotus root, including two specific primers, the kit also includes a M MLV reverse transcriptase and M enzyme reaction buffer, MLV dNTPs, Taq DNA polymerase, Mg2
【技术实现步骤摘要】
莲藕中一种新马铃薯Y病毒科病毒的检测试剂盒及其检测方法
本专利技术属于植物病毒检测
，具体涉及莲藕中一种新马铃薯Y病毒科病毒的检测试剂盒与检测方法。
技术介绍
莲藕(Nelumbonucifera)是睡莲科莲属多年生大型水生草本植物，原产中国和印度，有三千多年的栽培历史，生产上可分为藕莲、籽莲和花莲。莲藕富含淀粉、蛋白质、维生素、矿物质等多种营养成分，是我国南方地区的主要水生蔬菜，其栽培面积近33.3万hm2。本研究室前期研究中发现僵藕中含有马铃薯Y病毒科病毒的典型风轮状内含体结构，这表明莲藕存在某种马铃薯Y病毒侵染。2016年，我们提取莲藕叶片小RNA，进行高通量测序，经BLAST比对发现，部分contig与马铃薯Y病毒科(Potyviridae)马铃薯Y病毒属(Potyvirius)的甘薯潜隐病毒(Sweetpotatolatentvirus,SPLV)有低于77％相似性，由于其相似性较低，依据Adams等(2005)提出的马铃薯Y病毒科种类划分标准(不同蛋白编码区核苷酸相似性低于74-78％)，应属于一种新的病毒。该病毒由于缺乏完整的基因组序列，不能制...
【技术保护点】
莲藕中一种新马铃薯Y病毒科病毒的检测试剂盒，其特征在于，包括两条特异性引物：SPLVF2‑1：5’‑GAATCGTATCAATCCTTGAG‑3’；SPLVR3‑1：5’‑GCTTCTGCGACATCACTAAAG‑3’。
【技术特征摘要】
1.莲藕中一种新马铃薯Y病毒科病毒的检测试剂盒，其特征在于，包括两条特异性引物：SPLVF2-1：5’-GAATCGTATCAATCCTTGAG-3’；SPLVR3-1：5’-GCTTCTGCGACATCACTAAAG-3’。2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括M-MLV反转录酶、M-MLV酶反应缓冲液、dNTPs、TaqDNA聚合酶、Mg2+和PCR反应缓冲液。3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括标准阳性模板。4.一种莲藕中新马铃薯Y病毒科病毒的检测方法，其特征在于，其包括以下步骤：(1)提取待测样品总RNA；(2)设计并合成引物；(3)RT-PCR①反转录合成cDNA，以莲藕总RNA为模板，以SPL...
【专利技术属性】
技术研发人员：贺振，刘娴，董婷婷，朱延达，陈春峰，李良俊，
申请(专利权)人：扬州大学，
类型：发明
国别省市：江苏,32
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