一种抑制核型多角体病毒的方法技术
A method for inhibiting nuclear polyhedrosis virus
The present invention relates to a method for inhibiting nuclear polyhedrosis virus. The method of the invention to the nuclear polyhedrosis virus genome by CRISPR/Cas9 point target by cutting, to destroy the integrity of closed circular double stranded DNA genome or the key gene function of the normal exercise, so as to clear the virus, prevent virus replication effect.
【技术实现步骤摘要】
一种抑制核型多角体病毒的方法
本专利技术属于生物
，更具体地，本专利技术涉及一种抑制核型多角体病毒的方法。
技术介绍
杆状病毒(baculovirus)是一类囊膜包被的闭合、环状、双链、超螺旋DNA病毒，因包埋在多角体中的病毒粒子成杆状而得名。杆状病毒专一性寄生于节肢动物，其寄生的昆虫种类达600多种，包括鳞翅目、膜翅目、双翅目和鞘翅目等7个目。根据杆状病毒多角体蛋白所组成的包涵体的形态、包涵体在细胞中的分布以及病毒诱导的细胞病理学特征，可将杆状病毒科分为两个病毒属：核型多角体病毒属(Nucleopolyhedrocirus，NPV)和颗粒体病毒属(Granuleovirus，GV)。核型多角体病毒属的特点是在感染细胞核内形成结晶蛋白包涵体，呈多角体，每个多角体内包埋着许多病毒粒子。根据囊膜内核衣壳数目的多少，NPV属分为单粒包埋型多角体病毒(SNPV)和多粒包埋型多角体病毒(MNPV)。核型多角体病毒经口或伤口感染，多在寄主的血、脂肪、气管和皮肤等细胞的细胞核内发育。经口进入虫体的病毒被胃液消化，游离出杆状病毒粒子，通过中肠上皮细胞进入体腔，侵入细胞，在细...
【技术保护点】
一种抑制核型多角体病毒的方法，其特征在于，所述的方法包括：以核型多角体病毒的ie‑1基因和me53基因作为靶标，利用CRISPR/Cas系统介导的基因组编辑方法切割病毒基因组，从而抑制核型多角体病毒。
【技术特征摘要】
1.一种抑制核型多角体病毒的方法，其特征在于，所述的方法包括：以核型多角体病毒的ie-1基因和me53基因作为靶标，利用CRISPR/Cas系统介导的基因组编辑方法切割病毒基因组，从而抑制核型多角体病毒。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，以核型多角体病毒的ie-1基因中GTGAACCAACCATCGGCAGC和GAGTCAAATATTAAAGTATT作为切割的靶标；以核型多角体病毒的me53基因中GCAAAGTGTTTGAAATAATT和GTGCACCAGACCCGACGCGG作为切割的靶标。3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的核型多角体病毒是家蚕核型多角体病毒。4.一种核酸构建体，其特征在于，所述核酸构建体包括操作性连接的：Cas9表达盒，sgRNA表达盒；其中，所述的sgRNA表达盒包括：靶向核型多角体病毒的ie-1基因的sgRNA表达盒，以及靶向核型多角体病毒的me53基因的表达盒。5.如权利要求4述的核酸构建体，其特征在于，所述的靶向核型多角体病毒的ie-1基因的sgRNA表达盒包括：含有SEQIDNO:4所示序列的sgRNA表达盒以及含有SEQIDNO:5所示序列的sgRNA表达盒；所述的靶向核型多角体病毒的me53基因的表达盒包括：含有SEQIDNO:6所示序列的sgRNA表达盒以及含有SEQIDNO:7所示序列的sgRNA表达盒。6.如权利要求5所述的核酸构建体，其特征在于，所述的靶向核型多角体病毒的ie-1基因的sgRNA表达盒中，以U6-2小核RNA基因的启动子作为启动子。7.如权利要求5所述的核酸构建体，其特征在于，所述的靶向核型多角体病毒的me53基因的sgRNA表达盒中，以U6-2小核RNA基因的启动子作为启动子。8...
【专利技术属性】
技术研发人员：黄勇平，谭安江，陈树清，
申请(专利权)人：中国科学院上海生命科学研究院，
类型：发明
国别省市：上海,31
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