一种诱导成纤维细胞为脂肪细胞样细胞的方法技术

本发明专利技术涉及一种诱导成纤维细胞为脂肪细胞样细胞的方法，属于细胞生物学领域。该方法针对当前将成纤维细胞转分化为脂肪细胞方法中普遍存在的需载体介导和转基因操作、实验设施和技术水平要求较高、产生的脂肪细胞安全性较差等问题，发明专利技术了一种利用鱼卵母细胞提取物诱导成纤维细胞重编程为脂肪细胞样细胞的方法。由于利用该方法产生的脂肪细胞样细胞仅通过鱼卵母细胞提取物的诱导和脂肪细胞定向诱导培养获得，不涉及外源基因插入，实验操作相对简单，产生的脂肪细胞样细胞安全性相对较好，在脂肪组织代谢及调控研究等领域具有广阔的应用前景。

A method for inducing fibroblasts to be adipocyte like cells

The present invention relates to a method for inducing fibroblasts to be adipocyte like cells, which belongs to the field of cell biology. The method to resolve the problem of the fibroblasts to differentiate into fat cell method existed in the carrier mediated and transgenic operation, experimental facilities and technology for the higher level, the fat cells of poor security, invented a method using fish oocyte extracts induced reprogramming of fibroblasts into adipocytes like cells. The fat cells generated by this method of inducing culture obtained only by induction and fat cell directional fish oocyte extracts, does not involve the insertion of foreign gene, the operation is relatively simple, fat cells have relatively good safety, has broad application prospects in the field of adipose tissue metabolism and regulation research.

【技术实现步骤摘要】
一种诱导成纤维细胞为脂肪细胞样细胞的方法
本专利技术涉及一种诱导成纤维细胞为脂肪细胞样细胞的方法，属于细胞生物学

技术介绍
肥胖是一种较为常见的脂肪组织代谢紊乱性疾病，并由此可引发高血压、心脏病、糖尿病以及癌症等（GalicS,etal.,2010;AilhaudG,etal.,1992）。系统、深入研究脂肪组织代谢规律与调控机制对于肥胖的治疗和预防具有重要意义。目前用于研究脂肪组织代谢与调控规律的细胞主要包括由原代培养获得的前体脂肪细胞和商品化的用于产生脂肪细胞的细胞系。通常，由原代培养获得的前体脂肪细胞与研究对象具有相同或相似的遗传特征，是研究脂肪细胞基因表达调控最佳的细胞类型，但目前，原代前体脂肪细胞在培养方法和鉴定上仍不太成熟。用于产生脂肪细胞的商品化细胞系主要是基于小鼠胚胎成纤维细胞建立的细胞系，包括3T3-L1、3T3-F442A、NIH-3T3和C3H10T1/2，其中，3T3-L1和3T3-F442A是研究脂肪细胞最为常用的前体脂肪细胞系，需要在特定条件下诱导才能转变为脂肪细胞，NIH-3T3和C3H10T1/2细胞系与前二者不同，它们为非定向前体脂肪细胞系本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种诱导成纤维细胞为脂肪细胞样细胞的方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）成纤维细胞的制备，包括成纤维细胞的分离、鉴定和培养；（2）诱导剂的制备，诱导成纤维细胞发生重编程的诱导剂为鱼卵母细胞提取物；（3）成纤维细胞的诱导，利用所述步骤（2）中制备的鱼卵母细胞提取物对所述步骤（1）中制备的成纤维细胞进行诱导，通过诱导，使成纤维细胞重编程为具有多向分化潜能的诱导多能干细胞；（4）诱导多能干细胞向脂肪细胞样细胞的分化，将所述步骤（3）中获得的诱导多能干细胞在脂肪细胞诱导培养基和维持培养基中进行交替诱导；（5）脂肪细胞样细胞的鉴定，通过油红O染色的方法对所述步骤（4）中获得的诱导细胞进行鉴定。

【技术特征摘要】
1.一种诱导成纤维细胞为脂肪细胞样细胞的方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）成纤维细胞的制备，包括成纤维细胞的分离、鉴定和培养；（2）诱导剂的制备，诱导成纤维细胞发生重编程的诱导剂为鱼卵母细胞提取物；（3）成纤维细胞的诱导，利用所述步骤（2）中制备的鱼卵母细胞提取物对所述步骤（1）中制备的成纤维细胞进行诱导，通过诱导，使成纤维细胞重编程为具有多向分化潜能的诱导多能干细胞；（4）诱导多能干细胞向脂肪细胞样细胞的分化，将所述步骤（3）中获得的诱导多能干细胞在脂肪细胞诱导培养基和维持培养基中进行交替诱导；（5）脂肪细胞样细胞的鉴定，通过油红O染色的方法对所述步骤（4）中获得的诱导细胞进行鉴定。2.采用权利要求1所述一种诱导成纤维细胞为脂肪细胞样细胞的方法，其特征在于，所述步骤（3）中使用的鱼卵母细胞提取物终浓度为10~20μg/ml，成纤维细胞在添加鱼卵母细胞提取物的培养基中的诱导培养时间为72小时。3.采用权利要求1所述一种诱导成纤维细胞为脂肪细胞样细胞的方法，其特征在于，所...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱向情，潘兴华，陈强，
申请(专利权)人：陈强，
类型：发明
国别省市：云南,53